"hMSC-BM:人间充质干复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
有一些细胞是数量多一点比较HAO生长,生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不HAO,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SKGT2细胞类似产品::Hs 895 T细胞、SK LU 1细胞、TE 32细胞
IOSE29细胞类似产品::C32r细胞、SCC7细胞、CORL26细胞
130T细胞类似产品::L 132细胞、HuPT4细胞、F81细胞
NHDF细胞类似产品::CAL 33细胞、UCLA-SO-M21细胞、D341 Med细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
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细胞形态:上皮细胞样
RMC-1细胞类似产品::VM-CUB-I细胞、LC-1-sq细胞、HuT102细胞
B16细胞类似产品::Panc-08.13细胞、CCD33Co细胞、Panc-8_13细胞
Panc02细胞类似产品::P815细胞、KTA-7细胞、CHOS细胞
细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次ZuiHAO只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握HAO细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性HAO,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的点,要做HAO建系的维持必须记录HAO细胞档案,换液传代和做HAO细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
MARC 145细胞类似产品::CoCL2细胞、CP70细胞、T-T细胞
Cates 1B细胞类似产品::KP2细胞、67NR细胞、A549细胞
CAL39细胞类似产品::SK-UT-1细胞、RBE细胞、BT-20细胞
PL-45细胞类似产品::KPNRTBM1细胞、SAOS 2细胞、DHL-4细胞
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SK-LU-1细胞类似产品::OCI-Ly 3细胞、LN 382细胞、211H细胞
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H-28细胞类似产品::NCIH2126细胞、NCI-H2228细胞、UACC-812细胞
RCF细胞类似产品::HA细胞、Malme-3 M细胞、MRASMC细胞
TE-6细胞类似产品::SK MEL 28细胞、MFC细胞、REC-1细胞
Institute for Medical Research-90细胞类似产品::CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞
SW626细胞类似产品::XWLC-05细胞、VMRC-LCD细胞、HCV29细胞
32D clone3细胞类似产品::A9细胞、4T1-A细胞、PANC-02-03细胞
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MDA-MB468细胞类似产品::MDA MB 453细胞、A375S2细胞、U-343MG细胞
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WIL2 Secreting细胞类似产品::H-441细胞、BNL-HCC细胞、WIL2-S细胞
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CAL39细胞类似产品::SK-UT-1细胞、SK-MEL-28细胞、RPE D407细胞
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Hs688(A)T细胞类似产品::WM266-4细胞、mousepodocyte细胞、HTR8/SVneo细胞
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NCI747细胞类似产品::N87细胞、KYSE0520细胞、NCI-H735细胞
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