"Calu-3:人肺腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
有一些细胞是数量多一点比较HAO生长,生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不HAO,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
266 Bl细胞类似产品::GM03671C细胞、KM-H2细胞、SACC-83细胞
NCI-H2195细胞类似产品::Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、HEK 293 EBNA细胞、VMCUB1细胞
H-1975细胞类似产品::SK-MEL-28细胞、U-343-MG细胞、PT67细胞
IPECJ2细胞类似产品::EOC-20细胞、CAL-12T细胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:该细胞是从一名25岁的白人男性肺腺癌患者的胸水中分离建立的;该患者曾使用过环磷酰胺、博来霉素、阿霉素进行治疗。该细胞接种至裸鼠可成瘤;可作转染宿主。
Calu-3:人肺腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
CV1细胞类似产品::OVISE细胞、HSC细胞、H-2110细胞
SCLC-21H细胞类似产品::SPCA-1细胞、NCIH2107细胞、231-luc细胞
CL1细胞类似产品::BEL 7404细胞、HEL-92细胞、MiaPaCa-2细胞
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升GAO到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法:消化20分钟。1:2。5-6天长满。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
Calu-3:人肺腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
RMG-I细胞类似产品::HMCB细胞、C3H-10T1/2细胞、293T/17细胞
WM-239A细胞类似产品::KYSE 410细胞、BRL-3A细胞、Mel-624细胞
P3HR1-BL细胞类似产品::Pan02细胞、MCA-205细胞、SK-ES-1细胞
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Centre Antoine Lacassagne-33细胞类似产品::Det. 562细胞、MV522细胞、MAC1细胞
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RPMI6666细胞类似产品::CCRF/CEM-C7细胞、MPP89细胞、DH 82细胞
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LLCPK1细胞类似产品::SK-NMC细胞、B-CPAP细胞、HBEpiC细胞
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HIT T-15细胞类似产品::CORL23细胞、SGC 7901细胞、SK RC 20细胞
ARO 81-1细胞类似产品::FHCRC-11细胞、MV-3细胞、CNE-2Z细胞
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Mouse podocyte细胞类似产品::PANC 813细胞、MEC-1细胞、L5178Y-R细胞
Colon-38细胞类似产品::CEM/0细胞、786-0WT细胞、LTEP-s细胞
10RGB细胞类似产品::OCM1A细胞、TKB-1细胞、CEM-T4细胞
Calu-3:人肺腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
MDCK2细胞类似产品::MDA-MB-134细胞、Jurkat77细胞、SPC-A-1细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞类似产品::YH-13细胞、SLK细胞、NCIH1869细胞
IMR32细胞类似产品::Tu686细胞、TE8细胞、266 Bl细胞
GLC-82细胞类似产品::C2C12细胞、NCI-H292细胞、1E8-H细胞
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ECC1细胞类似产品::MC3T3-E1 Subclone 24细胞、GM-3573细胞、DKMG细胞
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COLO 684细胞类似产品::NCI-SNU-620细胞、AtT-20细胞、SKMEL2细胞
NCTC 929细胞类似产品::Panc02.03细胞、HPMEC细胞、S3 HeLa细胞
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NS-1-Ag4-1细胞类似产品::H661细胞、Tb1Lu细胞、OUMS27细胞
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OS-732细胞类似产品::6T-CEM细胞、H-EMC-SS细胞、M-1细胞
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OS-732细胞类似产品::6T-CEM细胞、H-EMC-SS细胞、M-1细胞
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CT-26细胞类似产品::Immortal Pig Intestinal-2I细胞、Hs-606-T细胞、A2780/Taxol细胞
H889细胞类似产品::MDAMB415细胞、MDA.MB.435细胞、Ramos 2G6 4C10细胞
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COLO 357细胞类似产品::MB-49细胞、PC 61-5-3细胞、AR42J细胞
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D341 Med细胞类似产品::A172细胞、ZR-75-30细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞
MDA MB 175 VII细胞类似产品::Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞、H-1623细胞、TO 175.T细胞
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SUP T1细胞类似产品::BT-325细胞、MT-2细胞、SKNF1细胞
SK HEP 01细胞类似产品::HcaF细胞、Wien-133细胞、CAMA-1细胞
PANC 1005细胞类似产品::BEP2D细胞、Psi-2-DAP细胞、JVM-3细胞
SNUC2B细胞类似产品::PaTu 8988 S细胞、H-727细胞、C-28/I2细胞
H-2291细胞类似产品::SuDHL 4细胞、BCaP-37细胞、HeLa/DDP细胞
Molm14细胞类似产品::CAL78细胞、HCE-2 [50.B1]细胞、HS 445T细胞
Kit225-K6细胞类似产品::NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞
Kit225-K6细胞类似产品::NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞
RT 112细胞类似产品::PLC/PRF5细胞、H-2291细胞、KYSE0520细胞
Centre Antoine Lacassagne-27细胞类似产品::MDA435细胞、HIT-T15细胞、C17.2细胞
Farage细胞类似产品::NRK clone 52E细胞、NTera2/D1细胞、H-1522细胞
LU-65M细胞类似产品::OE19细胞、LL/2细胞、NCIH1436细胞
H292细胞类似产品::SNU620细胞、BALB/3T3 clone A31细胞、NCI-H157细胞
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751-NA-15细胞类似产品::SMA-560细胞、SW 480细胞、KYSE 70细胞
COLO 16细胞类似产品::EFM192C细胞、MSTO-211H细胞、MES23.5细胞
SF295细胞类似产品::H-2081细胞、Lu-165细胞、PK136细胞
IEC6细胞类似产品::HEK 293-EBNA细胞、COR-L23细胞、ME-180细胞
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GT39细胞类似产品::NCI.H460细胞、RPMI8226细胞、HCC1588细胞
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Ramos (RA)细胞类似产品::BALB/3T3 clone A31细胞、H19-7细胞、Nb-2细胞
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Calu-3:人肺腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
BCaP-37细胞类似产品::HCT-FET细胞、High Five细胞、H22-H8D8细胞
A10细胞类似产品::SK-MEL2细胞、alphaTC clone 6细胞、OV90细胞
HCCC-9810细胞类似产品::ES2细胞、CAL-148细胞、MDA-MB-231细胞
E.L.4细胞类似产品::HEL9217细胞、HEL299细胞、SVHUC细胞
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IGROV1细胞类似产品::NCI.H226细胞、GH3细胞、SW982细胞
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