"NCI-H1975:人肺腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升GAO,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Ketr-3细胞类似产品::C42细胞、CCD 966SK细胞、MES-SA/Dx5细胞
ARH77细胞类似产品::H-9细胞、SNU407细胞、P19细胞
SuDHL 10细胞类似产品::Madin-Darby Canine Kidney细胞、CATHa细胞、SK-MEL 28细胞
WERI-Rb-1细胞类似产品::HDLM-2细胞、RT112细胞、UM-UC-1细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:这株细胞于1988年七月建株。组织提供者是一位非吸烟人士。
NCI-H1975:人肺腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
RPMI6666细胞类似产品::CCRF/CEM-C7细胞、MPP89细胞、DH 82细胞
LY-R细胞类似产品::EJ1细胞、A498细胞、Colon-26细胞
H2195细胞类似产品::NCI-SNU-449细胞、COLO679细胞、NCI H716细胞
细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次ZuiHAO只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握HAO细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性HAO,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的点,要做HAO建系的维持必须记录HAO细胞档案,换液传代和做HAO细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
NCI-H1975:人肺腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
细胞培养中常用设施及设备:实验室设计:细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室。常用设施及设备:1)超净工作台:也称净化工作台,分为侧流式、直流式和外流式三大类。2)无菌操作间:一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒HAO的无菌物品等。3)操作间:普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物。4)洗刷消毒间:烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。5)分析室:显微镜、计算机及打印机等。
HEK293E细胞类似产品::RPMI-7951细胞、H920细胞、Tn-5B1-4细胞
bEND.3细胞类似产品::ATDC5细胞、KP-N-NS细胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞
CCLP1细胞类似产品::HS0578T细胞、P3X63-Ag8.653细胞、F442-A细胞
PTK1细胞类似产品::UPCISCC154细胞、CHP 100细胞、GLRK 13细胞
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A2780CP细胞类似产品::SNK6细胞、HRIF细胞、H508细胞
NCIH82细胞类似产品::HT55细胞、NTera 2细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞
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NCI-H1975:人肺腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
293-EBNA细胞类似产品::Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞、NRK49F细胞、CBRH-7919细胞
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C3H/10T1/2 clone 8细胞类似产品::TE 32细胞、PIG1细胞、RPMI-8402细胞
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S37细胞类似产品::HBE135-E6E7细胞、Jurkat, Clone E6-1细胞、NCIH716细胞
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SUDHL10细胞类似产品::CV-1 in Origin Simian-7细胞、B16 BL6细胞、SW1271细胞
NCI-H1975:人肺腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
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HOS细胞类似产品::S16细胞、COLO680N细胞、MIA-PaCa-2细胞
BLO 11细胞类似产品::COR-L105细胞、HEK-2细胞、MKN28细胞
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