"CHO-K1:中国仓鼠卵巢复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SK-HEP-1细胞类似产品::SKM-1细胞、MC3T3-E1细胞、rRMECs细胞
VMM5细胞类似产品::NuTu 19细胞、HCC9724细胞、EM3细胞
MDA PCa 2b细胞类似产品::COLO357细胞、NCI-H78细胞、HCT/FU细胞
LS-180细胞类似产品::COLO678细胞、ABC1细胞、K1735细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:1957年,PuckTT从成年中国仓鼠卵巢的活检组织建立了CHO细胞,CHO-K1是CHO的一个亚克隆。CHO-K1的生长需要脯酸。
CHO-K1:中国仓鼠卵巢复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
MDA-kb2细胞类似产品::COLO-699细胞、ketr 3细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞
Panc 5.04细胞类似产品::WBF344细胞、CA-OV-3细胞、MESSA Dx5细胞
HEK.EBNA细胞类似产品::NCIH2196细胞、WM115F细胞、NCIH226细胞
细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次ZuiHAO只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握HAO细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性HAO,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的点,要做HAO建系的维持必须记录HAO细胞档案,换液传代和做HAO细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
CHO-K1:中国仓鼠卵巢复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
HN 4细胞类似产品::NTERA2细胞、EFM-192A细胞、NCI-H1915细胞
HCC1500细胞类似产品::OEC33细胞、HTR-8/SV neo细胞、H1417细胞
RSC-364细胞类似产品::NCI-H-128细胞、KMBC细胞、MES-SA细胞
ARH 77细胞类似产品::UMUC-14细胞、MDA-453细胞、HET1A细胞
IMR 32细胞类似产品::RenCa细胞、MDA-MB-134 VI细胞、H1048细胞
B95-8细胞类似产品::TE 32.T细胞、CoC1细胞、118MG细胞
QSG-7701细胞类似产品::SW 626细胞、Y3-Ag1.2.3细胞、RPTC细胞
LWnt-3A细胞类似产品::A549 ATCC细胞、Epstein-Barr-3细胞、DMS 114细胞
B16F0细胞类似产品::HEK-293-FT细胞、NCI H2106细胞、MLA144细胞
NCTC-3960细胞类似产品::JVM-2细胞、HuT102细胞、TPC-1细胞
BC-024细胞类似产品::MGH-UI细胞、SUM 159细胞、MV-1-Lu细胞
J-111细胞类似产品::Vero 76 clone E6细胞、LAD2细胞、HT-22细胞
NCIH1693细胞类似产品::C4-2 B细胞、Metastatic Variant-522细胞、COLO-320DM细胞
NU-GC-3细胞类似产品::MGC803细胞、ACCM细胞、MC 116细胞
W133细胞类似产品::HN 4细胞、UPCISCC090细胞、Sp2/0细胞
H2110细胞类似产品::COV504细胞、HEK-AD 293细胞、CCD18Co细胞
H2110细胞类似产品::COV504细胞、HEK-AD 293细胞、CCD18Co细胞
NCIH929细胞类似产品::U-251MG细胞、HuCCT-1细胞、MARC145细胞
KOPN8细胞类似产品::HCC 94细胞、OE-19细胞、BS-C-1细胞
HS-766T细胞类似产品::SW-1353细胞、NCI-H2085细胞、C32r细胞
HCC2935细胞类似产品::GLC82细胞、L5178Y TK+/-3.7.2c细胞、OC-3-VGH细胞
624细胞类似产品::MCMEC细胞、D10.G4.1细胞、CMT 64细胞
H1693细胞类似产品::PC-14细胞、QGY7703细胞、NE1-E6E7细胞
A 2058细胞类似产品::SK-N-BE2C细胞、G-292, clone A141B1细胞、LS 174 T细胞
CHO-K1:中国仓鼠卵巢复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
Calu-3细胞类似产品::H-378细胞、OP-9细胞、Hs 611.T细胞
SF-539细胞类似产品::SCCVII细胞、HCC4006细胞、UMR 106细胞
HLEC细胞类似产品::50.B1细胞、HEK293A细胞、KE-39细胞
NCIH1792细胞类似产品::HOS TE85细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞、HCC1833细胞
Bat lung细胞类似产品::LTEP-sm细胞、SHI1细胞、H-187细胞
SW 579细胞类似产品::ATN-1细胞、WM 115细胞、EPC细胞
HuNS1细胞类似产品::HHFK细胞、MPASMC细胞、ACHN细胞
Pa18C细胞类似产品::HS-766T细胞、BSC40细胞、NCI-441细胞
CMT-167细胞类似产品::SCLC21H细胞、Hs-578-T细胞、SU8686细胞
SK-MEL-1细胞类似产品::BV173细胞、ACC-M细胞、MDA-436细胞
BJAB细胞类似产品::COLO 320 DM细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞、tdott细胞
GH 3细胞类似产品::HLCL9B10细胞、SP-2/0-AG14细胞、SU-DHL2细胞
HCT/FU细胞类似产品::Hs 27细胞、Panc-1-P细胞、HUVSMC细胞
HCC-44细胞类似产品::NU-GC-2细胞、BLO11细胞、TH1细胞
Swiss-3T3细胞类似产品::H-1688细胞、Capan2细胞、HCC1395细胞
GM-3573细胞类似产品::CCD18细胞、COLO-394细胞、CCRF-CEM C7细胞
HCEC细胞类似产品::HARAB细胞、VSC4.1细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞
MRC-V细胞类似产品::Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、HSC 3细胞、HO8910细胞
U-2 OS细胞类似产品::CL 1-0细胞、HSAS3细胞、MMQ细胞
QGY7701细胞类似产品::U343细胞、CX1细胞、AM细胞
NALM-6细胞类似产品::RCCJF细胞、NIH:OVCAR3细胞、MCF.7细胞
SCL II细胞类似产品::IBRS-2细胞、HO-8910细胞、J774.A1细胞
NPC-039细胞类似产品::MCF 7B细胞、PE/CA-PJ-34细胞、Sp2/O-Ag14细胞
MDA231-LM2-4175细胞类似产品::CSQT-2细胞、Leukemia L1210细胞、HCT-FET细胞
MHHCALL2细胞类似产品::SK-MEL-24细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞、WM35细胞
KMS-11细胞类似产品::NOR10细胞、NCIH2106细胞、BT细胞
SUDHL2细胞类似产品::L-M (TK-)细胞、SV-HUC细胞、NCTC929细胞
NCI-H146细胞类似产品::B16-F10细胞、HCC1143细胞、DLD-1细胞
WEHI3B细胞类似产品::OS-732细胞、HepG2/C3A细胞、Madison细胞
hA549细胞类似产品::MOLT16细胞、OVCA420细胞、Hs863T细胞
MDA.MB.231细胞类似产品::PANC 203细胞、VP267细胞、KY70细胞
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H-2591细胞类似产品::HTori-3细胞、A549细胞、CCRF CEM细胞
ASH3细胞类似产品::University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、MM1细胞、NCTC-929细胞
HSC-T6细胞类似产品::Hs742T细胞、MM6细胞、HOC-1细胞
PLC PRF 5细胞类似产品::RLE-6TN细胞、SKCO 1细胞、P388.D1细胞
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RSC-364细胞类似产品::NCI-H-128细胞、CV-1细胞、F442-A细胞
NCI-H716细胞类似产品::GM 637细胞、NT2-D1细胞、PK13细胞
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PL-9细胞类似产品::IOSE-29细胞、NCIH508细胞、NPC-039细胞
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U266 B1细胞类似产品::NCIH727细胞、NHA细胞、H920细胞
BE(2)M-17细胞类似产品::P3X63 AG8-653细胞、GM00637B细胞、50.B1细胞
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343MG细胞类似产品::Fox/NY细胞、ECC-12细胞、BCP-1细胞
MCF 7B细胞类似产品::J-111细胞、CCD 1112SK细胞、Hep 2细胞
CV-1 in Origin Simian-7细胞类似产品::MCF-7/ADR细胞、U937细胞、Vero C1008细胞
NCI-SNU-761细胞类似产品::293细胞、KM12细胞、SNU-182细胞
RCC10 RGB细胞类似产品::HCC1187细胞、HEC-1B细胞、Rat Skin 1细胞
SK-RC 42细胞类似产品::SW 13细胞、Hs 870.T细胞、USMC细胞
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HN13细胞类似产品::16-HBEo细胞、B16 F10细胞、R 1610细胞
TE85细胞类似产品::tdott细胞、NCIH208细胞、Hs 840.T细胞
MPASMC细胞类似产品::Panc_03_27细胞、H-1672细胞、T-HSC细胞
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H-1792细胞类似产品::Detroit 562细胞、NTERA-2 clone D1细胞、HuPT3细胞
H-1792细胞类似产品::Detroit 562细胞、NTERA-2 clone D1细胞、HuPT3细胞
MCF-7ADR细胞类似产品::Walker-Ca.256细胞、KASUMI1细胞、EJ 138细胞
H-87细胞类似产品::Panc813细胞、Karpas299细胞、ZR75-30细胞
CORL279细胞类似产品::MILE SVEN1细胞、SR细胞、U87 MG细胞
A375-MEL细胞类似产品::Hs 746.T细胞、SKLU-1细胞、Porcine Kidney-15细胞
PC-3M 2B4细胞类似产品::KYSE510细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞
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CHO-K1:中国仓鼠卵巢复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
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