"Mono-Mac-1 Cells(赠送Str鉴定报告)|人急性单核细胞白血病细胞
细胞背景资料:急性单核细胞白血病;男性
细胞形态:淋巴母细胞样
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天ZuiHAO更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞Zui大的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
细胞生长:悬浮
PC-3M 2B4细胞类似产品::KYSE510细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞
NCI-H524细胞类似产品::DHL8细胞、IMR32细胞、UPCI-SCC090细胞
639V细胞类似产品::Hs695T细胞、OPM2细胞、SUDHL-4细胞
IPECJ2细胞类似产品::EOC-20细胞、CAL-12T细胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞
HS5细胞类似产品::huH 1细胞、PLB985细胞、COLO829细胞
Mono-Mac-1 Cells(赠送Str鉴定报告)|人急性单核细胞白血病细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,ZuiHAO经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
H-2107细胞类似产品::rUCMSCs细胞、HDQP1细胞、H-1688细胞
T-ALL1细胞类似产品::RS(4;11)细胞、HFE-145细胞、SKMel-5细胞
CL11细胞类似产品::HuH6细胞、P3-X63.Ag8.653细胞、HL7702细胞
HCT-15细胞类似产品::HEK293E细胞、J-82细胞、U373 MG细胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞类似产品::NCIH1299细胞、SUP-B15细胞、C6细胞
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:悬浮
GNM细胞类似产品::SW579细胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、SK.MEL.5细胞
HTori-3.1细胞类似产品::BEL-7405细胞、TEC细胞、P3HR-1细胞
RBE4细胞类似产品::B95-8细胞、MCF-12F细胞、NCIH522细胞
U373-MG细胞类似产品::Human Melanoma Cell Bowes细胞、HCC1954细胞、Me-Wo细胞
HEK-A细胞类似产品::LTPA细胞、VAESBJ细胞、NCIH747细胞
H128细胞类似产品::Caco2BBe细胞、MBVP细胞、MGH-U3 (RN)细胞
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提GAO血清浓度(ZuiGAO不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液HAO不HAO,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不HAO。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
LNCaP C4-2细胞类似产品::SW480E细胞、DI TNC-1细胞、NK92细胞
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Panc 1细胞类似产品::PA317细胞、TE5细胞、OCI-Ly01细胞
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TE 85 ClF-5细胞类似产品::IGROV细胞、Neuro 2a细胞、NCI-SNU-886细胞
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CNE-1细胞类似产品::HPBALL细胞、SUSM1细胞、IA-LM细胞
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J774A.1细胞类似产品::32D:cl3细胞、UCLA-SO-14细胞、U-138-MG细胞
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mREC细胞类似产品::SKNBE(2c)细胞、16-HBE14o细胞、LLC-PK-1细胞
GBCSD细胞类似产品::Vx2细胞、IGROV细胞、Hs 274.T细胞
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SW-579细胞类似产品::OCI/AML3细胞、M-G63细胞、MAVER细胞
Vero-E6细胞类似产品::LS-513细胞、KMH-2细胞、PSN1细胞
FRH-0201细胞类似产品::LNCaP-Clone-FGC细胞、H-125细胞、SCLC-21H细胞
GM3190细胞类似产品::RS4-11细胞、C17.2细胞、Hep 3B2.1-7细胞
Leydig细胞类似产品::CTSC-3细胞、BPH-1细胞、MC3T3-L1细胞
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RD细胞类似产品::MDA MB231细胞、Hs281T细胞、KYSE0410细胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞类似产品::H2347细胞、DSL-6A-C1细胞、RIMEC细胞
MDST8细胞类似产品::NCIH2286细胞、A-704细胞、MBdSMC细胞
MGC-803细胞类似产品::NMC-G1细胞、Leukemic 1210细胞、SKMEL-24细胞
WERI-Rb 1细胞类似产品::C4-2细胞、RK13细胞、Y3-Ag1,2,3细胞
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NOMO-1细胞类似产品::786-O细胞、CII细胞、HEK293T/17细胞
NCIH1993细胞类似产品::3AA细胞、KPL4细胞、HUV-EC-C细胞
Mono-Mac-1 Cells(赠送Str鉴定报告)|人急性单核细胞白血病细胞
PA1细胞类似产品::Nb2a细胞、EJ-1细胞、K-562细胞
P31/Fujioka细胞类似产品::B958细胞、SK BR 03细胞、D562细胞
RA 1细胞类似产品::NCTC 1469细胞、A549 ATCC细胞、A-704细胞
LC-2 ad细胞类似产品::C17.2细胞、IMR-32细胞、SMA 560细胞
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Hs706T细胞类似产品::SR786细胞、JC细胞、Panc02细胞
293 HEK细胞类似产品::FAO-1细胞、Huh 7.5细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞
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NCI-H522细胞类似产品::SJCRH30细胞、RIN-m 14B细胞、H2170细胞
FOXNY细胞类似产品::B16/F1细胞、P815细胞、251 MG细胞
C57/B6-L细胞类似产品::Hs611T细胞、CCD-112CoN细胞、P3 88 D1细胞
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Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞类似产品::451Lu细胞、BNL CL.2细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞
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