"L-428 Cells(赠送Str鉴定报告)|人霍奇金淋巴瘤细胞
细胞背景资料：霍奇金淋巴瘤；女性
细胞形态：淋巴母细胞样
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
细胞生长：悬浮
MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞类似产品：：LNCaP-FGC细胞、HOC-1细胞、CMT-64细胞
IPLB-Sf21-AE细胞类似产品：：SNU1细胞、H-1648细胞、MT-2J细胞
WC00079细胞类似产品：：A549ATCC细胞、MKN74细胞、D 407细胞
KE 37细胞类似产品：：SU-DHL-4细胞、NCI-H747细胞、KP-N-RT细胞
Institute for Medical Research-90细胞类似产品：：CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞
L-428 Cells(赠送Str鉴定报告)|人霍奇金淋巴瘤细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SKMEL-2细胞类似产品：：M-20细胞、GC-2spd(ts)细胞、BAC1.2F5细胞
BT细胞类似产品：：OCI-Ly 19细胞、SHP-77细胞、SCC25细胞
Hce8693细胞类似产品：：UPCI-SCC-154细胞、ME-1 [Human leukemia]细胞、CMT-167细胞
Earle's L cells细胞类似产品：：MGECs细胞、NCI-SNU-620细胞、JHH7细胞
mIMCD-3细胞类似产品：：NIH:OVCAR4细胞、BJA-B细胞、H1882细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
L-428 Cells(赠送Str鉴定报告)|人霍奇金淋巴瘤细胞
细胞生长特性：悬浮
HOC细胞类似产品：：H-2073细胞、293S细胞、H1648细胞
H-2172细胞类似产品：：B16-F10--RED细胞、H341细胞、GM04671细胞
CAL-33细胞类似产品：：COLO 678细胞、WM451细胞、hTERT-HPNE细胞
HR-8348细胞类似产品：：MV(4;11)细胞、NCI-H441细胞、PLC/PRF5细胞
SKNMC细胞类似产品：：KU812-F细胞、BC-028细胞、CAL 39细胞
MeWo细胞类似产品：：OCI-Ly3细胞、HBVSMC细胞、OPM-2细胞
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。
CHP-126细胞类似产品：：OKT 3细胞、CCC-HIE-2细胞、HOC1细胞
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CHO cell clone K1细胞类似产品：：HCC-95细胞、SKNSH细胞、HCC9724细胞
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HEC1-A细胞类似产品：：C33A细胞、hA549细胞、LAPC-4细胞
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MDA-MB 468细胞类似产品：：U373细胞、SKMEL5细胞、ARPE19细胞
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NPA 87细胞类似产品：：L-6TG细胞、32Dcl3细胞、Swiss 3T3细胞
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WM266mel细胞类似产品：：Hepatoma-22细胞、HEK-293细胞、CEMC1细胞
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HEK 293-EBNA细胞类似产品：：HIT clone T15细胞、NCIH211细胞、SUM-52-PE细胞
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Colon 38细胞类似产品：：SKMEL-31细胞、Ls-174-T细胞、SkMel31细胞
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NCIH1568细胞类似产品：：THEECs细胞、118 MG细胞、RPMC细胞
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LA-N-6(OAN)细胞类似产品：：Mel RM细胞、MHCC97H细胞、NG 108-15细胞
XWLC-05细胞类似产品：：H1770细胞、V79-1细胞、Hela-mock细胞
NCIH1385细胞类似产品：：P 815细胞、NCI H345细胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞
KG-1a细胞类似产品：：HVSMC细胞、ROS17/28细胞、QG-56细胞
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GM04154细胞类似产品：：NE-1细胞、PC9细胞、CEL细胞
Ramos-RA1细胞类似产品：：H-740细胞、H2052_MM细胞、870细胞
WM 266-4细胞类似产品：：CMT 167细胞、SNU484细胞、CTLL-2细胞
NCI-BL1339细胞类似产品：：Neuro-2a细胞、Tb 1-Lu细胞、NCTC1469细胞
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Wien-133细胞类似产品：：NCI-322细胞、NL20细胞、NCIH2030细胞
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CCD19Lu细胞类似产品：：Kasumi-1细胞、McA-RH7777细胞、Kit-225细胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞类似产品：：OCLY8细胞、HCC-15细胞、HPAF细胞
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MUTZ-3细胞类似产品：：H1915细胞、NCIH1734细胞、DV-90细胞
Tu-177细胞类似产品：：MUG-Chor1细胞、NIH:OVCAR-10细胞、WM2664细胞
VK2细胞类似产品：：COR-L26细胞、H2170细胞、H2171细胞
B16-F10细胞类似产品：：Sp2/mIL-6细胞、HEK293-A细胞、EU-4细胞
MAntle cell VERona-1细胞类似产品：：CORL88细胞、PASMCS细胞、Tu686细胞
PAEC细胞类似产品：：HCT-8/V细胞、293/EBNA-1细胞、2B4-L细胞
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C4-2细胞类似产品：：BC-024细胞、MIN-6细胞、Swiss-3T3细胞
SKHEP-1细胞类似产品：：SNT-8细胞、EL4细胞、JB 6细胞
High5细胞类似产品：：C2BBe 1细胞、CEF细胞、RetroPack PT67细胞
HM细胞类似产品：：H-295R细胞、WM2664细胞、T-47D细胞
PF382细胞类似产品：：FRTL-5 Cl 2细胞、RWPE1细胞、PC 61 5.3细胞
C-32细胞类似产品：：EST81细胞、Cloudman M3细胞、UK Pan-1细胞
HBE 135-E6/E7细胞类似产品：：FHL-124细胞、SCC 9细胞、HPMC细胞
HTR-8/SV-neo细胞类似产品：：T24细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H1666_DA细胞
BHT-101细胞类似产品：：MSTO211H细胞、DV-90细胞、JeKo 1细胞
C-6细胞类似产品：：MRC9细胞、JIMT细胞、GM-637细胞
Karpas 299细胞类似产品：：HNE-1细胞、AML-12细胞、RINm5F细胞
SK-N-BE2C细胞类似产品：：MDA-MB468细胞、TE 32.T细胞、OVCAR-432细胞
ACHN细胞类似产品：：HCV 29细胞、BrCL18细胞、MDA-MB-468细胞
BHP 10-3细胞类似产品：：W133细胞、Jurkat clone A3细胞、RPMI 1788细胞
Turbot Embryonic Cell line细胞类似产品：：RAOEC细胞、SKNEP细胞、Caco-2/BBe细胞
HEK 293-H细胞类似产品：：Hs870T细胞、KYSE510细胞、PLA801-95C细胞
L-428 Cells(赠送Str鉴定报告)|人霍奇金淋巴瘤细胞
Pan02细胞类似产品：：OVCAR.5细胞、JTC-28细胞、EHEB细胞
RT112细胞类似产品：：RS4;11细胞、P 815细胞、HaCaT细胞
MMAc-SF细胞类似产品：：HEB细胞、Kit-225-K6细胞、MB157细胞
HCC1500细胞类似产品：：OEC33细胞、HTR-8/SV neo细胞、H1417细胞
C4-2 B细胞类似产品：：AR41P细胞、EB-3细胞、Panc-813细胞
MeWo细胞类似产品：：OCI-Ly3细胞、HBVSMC细胞、OPM-2细胞
LLC PK1细胞类似产品：：U20S细胞、LTEP-s细胞、JTC-28细胞
C32-mel细胞类似产品：：GLAG-66细胞、huH 1细胞、WEHI-279细胞
MCF7ADR细胞类似产品：：SNU-5细胞、A549ATCC细胞、BrCL12细胞
Hs832.Tc细胞类似产品：：Vero 76细胞、MDAMB231细胞、NCI-A549细胞
Normal Rat Kidney-49F细胞类似产品：：A-172MG细胞、Tu177细胞、HCC-1419细胞
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CG-4细胞类似产品：：Panc 4.03细胞、K562/ADP细胞、H647ell细胞
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