NFS-60 Cells(赠送Str鉴定报告)|G-CSF依赖性小鼠白血病细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：淋巴母细胞样

体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。

细胞生长：悬浮

SKMEL-1细胞类似产品：：Walker256细胞、ST 486细胞、MC3T3-E1细胞

LM2-4175细胞类似产品：：Spodoptera frugiperda clone 9细胞、MHCC97细胞、T-98G细胞

Bac1 2F5细胞类似产品：：X63Ag8.653细胞、PanC1细胞、Hu-P-T4细胞

NS653细胞类似产品：：H1869细胞、LAPC-4细胞、PLA-802细胞

PT67细胞类似产品：：CWR22Rv1细胞、OCILY3细胞、CCD841CoN细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：３传代

NCI-H322细胞类似产品：：CEM-T4细胞、MCA205细胞、BT 20细胞

SUDHL-5细胞类似产品：：MX-1细胞、NCI-H929细胞、SKml2细胞

H2591细胞类似产品：：Hep G2-Luc细胞、SKOV-3细胞、CEMC7细胞

Capan-1细胞类似产品：：COLO-1细胞、SNU-520细胞、RPMI1846细胞

MA-104细胞类似产品：：Rin-M-5F细胞、RT4-D6P2T细胞、UMR106细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

OS-RC-2细胞类似产品：：NUGC2细胞、SF-767细胞、3T6细胞

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870细胞类似产品：：H1650细胞、BTI-Tn5B14细胞、EFO 27细胞

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NCI-H2107细胞类似产品：：MCF-7/ADR-RES细胞、COLO206F细胞、K422细胞

RPMI 6666细胞类似产品：：TOV-112细胞、Fetal Human Colon细胞、NCI-H1437细胞

培养细胞真的不难，Zui关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越HAO。另外，要掌握HAO胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，Zui近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做HAO支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候ZuiHAO给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。

细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力ZuiHAO时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖HAO瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。

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LAN-6细胞类似产品：：H82sclc细胞、207细胞、CFPAC细胞

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RAMSCs细胞类似产品：：H920细胞、DHL-6细胞、A3细胞

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JS1细胞类似产品：：786-O RCC细胞、GM07404A细胞、CHP-126细胞

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C2A细胞类似产品：：HaCaT细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞、Hs445细胞

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KBM-7/Hap8细胞类似产品：：HEP3B2细胞、GCT0404细胞、4T1-A细胞

KLM1细胞类似产品：：EU-4细胞、ESC-410细胞、NCIH2110细胞

L- cell细胞类似产品：：UMR 106细胞、32D CL3细胞、SK MEL-28细胞

PANC403细胞类似产品：：MFM223细胞、Hs294T细胞、H-929细胞

293A细胞类似产品：：WC00044细胞、A-2058细胞、4175细胞

A549 ATCC细胞类似产品：：ECC1细胞、NCI-H2023细胞、NCIH2122细胞

KYSE410细胞类似产品：：PTK-1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞、WPE-int细胞

RGC-5细胞类似产品：：B16F0细胞、Human Epidermoid carcinoma #2细胞、A 72细胞

HSC（Human Schwann）细胞类似产品：：CCC-HHM-2细胞、SupB15W细胞、GM17219细胞

RT-BM-1细胞类似产品：：HUC-1细胞、HCC1806细胞、GM 2132细胞

RIN m5F细胞类似产品：：H-2141细胞、ROS-17/2.8细胞、SF 295细胞

MA-c细胞类似产品：：H69/P细胞、UMUC-3细胞、Alexander cells细胞

SK-MEL-24细胞类似产品：：HL 60细胞、aTC1-6细胞、U-373MG ATCC细胞

COLO-824细胞类似产品：：Med 341细胞、IOSE-80细胞、MKN7细胞

L6细胞类似产品：：SKCO 1细胞、18G3.cl 1细胞、HEK 293-EBNA细胞

GM2132细胞类似产品：：CEM-CCRF细胞、MGH-U1细胞、SJCRH30细胞

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