"CCD-33Co Cells(赠送Str鉴定报告)|人结肠成纤维细胞
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：成纤维细胞样
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
细胞生长：贴壁
NCIH520细胞类似产品：：SUDHL-16细胞、A 172细胞、DC2.4细胞
GM12878细胞类似产品：：KM-12细胞、COR-L26细胞、HDLM2细胞
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GM07404D细胞类似产品：：H1838细胞、NS20Y细胞、KP2细胞
AKR细胞类似产品：：PA-TU S细胞、RS 4;11细胞、184A1细胞
CCD-33Co Cells(赠送Str鉴定报告)|人结肠成纤维细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Mv 1 Lu细胞类似产品：：Sf-21细胞、C4-1细胞、RL-65细胞
MT-3 [Human leukocytes]细胞类似产品：：PAMC82细胞、Hs 729T细胞、RPMI 8226/S细胞
LI7细胞类似产品：：BxPC-3细胞、3T3 J2细胞、T173细胞
CCD 19Lu细胞类似产品：：TE 671细胞、HCC1569细胞、H2198细胞
SK-N-FI细胞类似产品：：Tb 1 Lu细胞、P3/X63/Ag8细胞、MCF 10A细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
CCD-33Co Cells(赠送Str鉴定报告)|人结肠成纤维细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
RBL-I细胞类似产品：：PFSK1细胞、B16细胞、Institute for Medical Research-32细胞
HL7702细胞类似产品：：HPAFII细胞、MCAEC细胞、H-1373细胞
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NCI-H1184细胞类似产品：：H748细胞、L363细胞、Hs 870.T细胞
如何进行细胞复苏：１)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入３７℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；２)从３７℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加１０倍以上培养液，混匀；３)离心，１０００rpm，５min；４)弃去上清液，加入含１０%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，３７℃培养箱静置培养；５)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】１)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但ZuiHAO为对数生长期细胞。在冻存前一天ZuiHAO换一次培养液；２)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做HAO防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；３)冻存和复苏ZuiHAO用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放３７度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有３７度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
H-1341细胞类似产品：：A1847细胞、MDBK (NBL-1)细胞、D-341Med细胞
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HEK293EBNA细胞类似产品：：OACP4 C细胞、NCIH2110细胞、3AA细胞
OVCAR5细胞类似产品：：SK-NSH细胞、C3H10T1/2 clone8细胞、H524细胞
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NALM 6细胞类似产品：：MDA-1386细胞、BT-549细胞、EC-109细胞
LA-N-6(OAN)细胞类似产品：：Mel RM细胞、MHCC97H细胞、NG 108-15细胞
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RTE细胞类似产品：：ECC-1细胞、UACC 893细胞、H-250细胞
U 937细胞类似产品：：EAHY-926细胞、N1S1细胞、HBdSMC细胞
RMS 13细胞类似产品：：NCI-H1793细胞、EBC1细胞、LC-1Sq细胞
CAL12T细胞类似产品：：L6细胞、SEG1细胞、NCI H747细胞
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JB 6细胞类似产品：：H1417细胞、16-HBE细胞、FC33细胞
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MDCC-MSB-1细胞类似产品：：C-33-A细胞、RDES-1细胞、NCI-H1623细胞
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