NCTC clone 929 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠成纤维细胞

"NCTC clone 929 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠成纤维细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：成纤维细胞样

体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。

细胞生长：贴壁

NCI-H1048细胞类似产品：：TE 85.T细胞、CMT 167细胞、RAG细胞

U-hth74细胞类似产品：：MEL-526细胞、HuT-78细胞、P3HR1细胞

P3-Jiyoye细胞类似产品：：M-NFS-60细胞、SHZ-88细胞、SK-RC-39细胞

TERT-RPE1细胞类似产品：：HT-55细胞、GM00637I细胞、H4-II-E细胞

SKES1细胞类似产品：：Madison 109细胞、Hs819.T细胞、HONE1细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

HCA7细胞类似产品：：CAKI1细胞、H128细胞、Hs-606-T细胞

MDA-MB-231 #4175细胞类似产品：：REC 1细胞、EBNA293细胞、ROS17/28细胞

A-204细胞类似产品：：COLO 205细胞、P31/FUJ细胞、NCI H345细胞

DH 82细胞类似产品：：A549/DDP细胞、MEG01细胞、IMR 32细胞

SK-OV-3细胞类似产品：：WM-239-A细胞、TCMK1细胞、NCIH2405细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

MBT2细胞类似产品：：PC-9/GR细胞、M-14细胞、MHCC97H细胞

H209细胞类似产品：：HN6细胞、SKHEP1细胞、SPCA1细胞

MDA 435细胞类似产品：：SP2细胞、A-375.S2细胞、T47D细胞

SUDHL-5细胞类似产品：：MX-1细胞、NCI-H929细胞、SKml2细胞

OCI-Ly 19细胞类似产品：：SK-HEP-1细胞、UCLA RO-81-A-1细胞、J 82细胞

W133细胞类似产品：：HN 4细胞、UPCISCC090细胞、Sp2/0细胞

如何进行细胞复苏：１)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入３７℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；２)从３７℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加１０倍以上培养液，混匀；３)离心，１０００rpm，５min；４)弃去上清液，加入含１０%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，３７℃培养箱静置培养；５)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】１)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但ZuiHAO为对数生长期细胞。在冻存前一天ZuiHAO换一次培养液；２)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做HAO防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；３)冻存和复苏ZuiHAO用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放３７度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有３７度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

U-138MG细胞类似产品：：NS-20Y细胞、PC-9S1细胞、HFTF细胞

NCI-H446细胞类似产品：：WM 451-Lu细胞、TALL1细胞、H-226细胞

C6661细胞类似产品：：MOLP-8细胞、THLE-3细胞、NS1细胞

ST 486细胞类似产品：：HCEC-B4G12细胞、KLN 205细胞、BMF细胞

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Leukemia L1210细胞类似产品：：Normal Rat, August 3, 1983细胞、NCI.H226细胞、HCGC细胞

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Leukemic 1210细胞类似产品：：NCI-H2108细胞、H-1693细胞、Co320细胞

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HT-1197细胞类似产品：：766T细胞、GA-10 (Clone 4)细胞、HCT-8/V细胞

MNNG-HOS (Cl#5)细胞类似产品：：P31-FUJ细胞、HCGC细胞、Hi-5细胞

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NRK clone 49F细胞类似产品：：H322T细胞、OVCA-420细胞、OE21细胞

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Pa16C细胞类似产品：：F9细胞、Panc02-H0细胞、HO-8910 PM细胞

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F36P细胞类似产品：：MiaPaCa-2细胞、WM-266-4细胞、373MG细胞

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MSTO-211细胞类似产品：：HSC2细胞、TFK1细胞、SK.MEL.2细胞

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ARO细胞类似产品：：2PK3细胞、MOLM-14细胞、A375.S2细胞

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FHCRC-11细胞类似产品：：Metastatic Variant-522细胞、SupT1细胞、NCI-H2227细胞

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NCTC clone 929 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠成纤维细胞

SF295细胞类似产品：：H-2081细胞、Lu-165细胞、PK136细胞

Panc10.05细胞类似产品：：MUGCHOR1细胞、MLE-12细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞

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RMG-1细胞类似产品：：V79-GalK1细胞、LOU-NH-91细胞、OSC-19细胞

HCC95细胞类似产品：：RN-c细胞、Neuro-2a细胞、SV-HUC细胞

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