CHL/IU Cells(赠送Str鉴定报告)|中国仓鼠肺细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在GAO压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠GAO盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。

细胞生长：贴壁

MBMEC细胞类似产品：：CNLMG-B5537SKIN细胞、alphaTC1 Clone 6细胞、UPCI:SCC90细胞

CCC-HEL-1细胞类似产品：：SF763细胞、MDA.MB.231细胞、WM-266-mel细胞

HDMEC细胞类似产品：：Hs895.T细胞、GLC-82细胞、Karpas 422细胞

U-2932细胞类似产品：：Hs 839.T细胞、P3HR1细胞、NRK52E细胞

G361mel细胞类似产品：：VP 267细胞、HCC-202细胞、HPB/ALL细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

HIEC6细胞类似产品：：JeKo-1细胞、Ramos-RA1细胞、LNCaP FGC细胞

DI TNC1细胞类似产品：：H-2172细胞、HREC细胞、ATDC5细胞

MUGCHOR1细胞类似产品：：no.11细胞、HCCC-9810细胞、WIL2S细胞

149 PT细胞类似产品：：Hs 578T细胞、H-9细胞、SNU878细胞

CORL23细胞类似产品：：DoTc2细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞、RF/6A细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

DU-145细胞类似产品：：HRGEC细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、Hx-147细胞

MOLT-4细胞类似产品：：HEL92.1.7细胞、RGC-5细胞、SNU668细胞

DU-4475细胞类似产品：：HCC1359细胞、CCD 841 CoTr细胞、HSKMC细胞

FD-LSC-1细胞类似产品：：DI-TNC1细胞、DK-MG细胞、C127细胞

JurkatE6-1细胞类似产品：：Walker-256-TC细胞、NR8383.1细胞、28SC细胞

CORL105细胞类似产品：：HT-29细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞、MDA-MB 361细胞

细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提GAO血清浓度(ZuiGAO不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。

细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。

H4-II-E细胞类似产品：：Hmy.2 CIR细胞、PANC 203细胞、624细胞

NCI-H460细胞类似产品：：SK Mel28细胞、NCI-H1793细胞、SW 480细胞

BT474细胞类似产品：：H-727细胞、McA-RH8994细胞、MS-751细胞

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RMa-bm细胞类似产品：：CT26WT细胞、HEL-92.1.7细胞、HCC2218细胞

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A 253细胞类似产品：：P31 FUJ细胞、HFLS-RA细胞、FOXNY细胞

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LU-65M细胞类似产品：：OE19细胞、LL/2细胞、NCIH1436细胞

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H-1435细胞类似产品：：YD15细胞、H-2135细胞、OCI/AML2细胞

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WIL2S细胞类似产品：：TGW细胞、HOC细胞、SF-539细胞

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Huh7.5细胞类似产品：：Hs819.T细胞、L-WRN细胞、Mono Mac6细胞

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J 111细胞类似产品：：NCI-H2030细胞、MRMT-1细胞、L929细胞

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CWR22-Rv1细胞类似产品：：P3-X63-Ag8-6-5-3细胞、Hs822T细胞、Panc203细胞

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HeLa/DDP细胞类似产品：：COLO 320细胞、KATO 3细胞、L-6 myoblast细胞

HEK293A细胞类似产品：：NK62a细胞、Panc 4.03细胞、L-540细胞

M-G63细胞类似产品：：SKMel-5细胞、SUIT-2细胞、HLE-B3细胞

MBdSMC细胞类似产品：：NCIH810细胞、MC3T3-E细胞、HCT.116细胞

NCIH1581细胞类似产品：：H-125细胞、EB-2细胞、Soleus clone 8细胞

HCC-2185细胞类似产品：：hTERT RPE-1细胞、SU-DHL-8细胞、KYSE140细胞

MPC 11细胞类似产品：：KLE细胞、H1105细胞、SEG-1细胞

Hs 895.T细胞类似产品：：DMS 79细胞、SRA01/04细胞、HOP 92细胞

Tb1.Lu细胞类似产品：：CPA47细胞、H-1869细胞、L363细胞

SKO3细胞类似产品：：143 B细胞、NCIH460细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞

Sarcoma OSteogenic-2细胞类似产品：：8305C_1细胞、LS-1034细胞、MC116细胞

GC1-SPG细胞类似产品：：SaOS-2细胞、X63-Ag8.653细胞、U266 Bl细胞

BT474细胞类似产品：：H-727细胞、GM-215细胞、BNL-CL.2细胞

FRO细胞类似产品：：HA细胞、MDAMB468细胞、HIT-T15细胞

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