PG [Human lung carcinoma] Cells(赠送Str鉴定报告)|人巨细胞肺癌细胞

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细胞背景资料：巨细胞肺癌

细胞形态：上皮细胞样

体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。

细胞生长：贴壁

L-6TG细胞类似产品：：P-2003细胞、A875细胞、GS-9L细胞

H4IIE细胞类似产品：：H-1975细胞、M109细胞、C4I细胞

NCIH209细胞类似产品：：LA-N-5细胞、Capan 1细胞、VE细胞

NCI-H322T细胞类似产品：：Rh30细胞、H-660细胞、BC-PAP细胞

Anglne细胞类似产品：：COC1/CDDP细胞、HO-8910 PM细胞、GM03573细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

End1/E6E7细胞类似产品：：Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞类似产品：：B10BR细胞、C-33A细胞、HuH 6细胞

H2110细胞类似产品：：COV504细胞、HEK-AD 293细胞、CCD18Co细胞

IAR 20细胞类似产品：：NG-108-15细胞、N9细胞、293 F细胞

KMH2细胞类似产品：：SKNBE(2)细胞、ARIP细胞、PG-4 (S+L-)细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

ME180细胞类似产品：：PNT1-a细胞、L78细胞、Fetal Human Colon细胞

SO-RB50细胞类似产品：：U118-MG细胞、NP69SV40T细胞、H-660细胞

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Panc 02细胞类似产品：：T47-D细胞、Hs675T细胞、Pan02细胞

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Pt K2 (NBL-5)细胞类似产品：：NP69SV40T细胞、Cor L88细胞、NCIH1650细胞

细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。

细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力ZuiHAO时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖HAO瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。

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PG [Human lung carcinoma] Cells(赠送Str鉴定报告)|人巨细胞肺癌细胞

Porcine Kidney-13细胞类似产品：：H-1048细胞、P3HRI细胞、HPAF II细胞

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Hs 675.T细胞类似产品：：PanC1细胞、KYSE-270细胞、NHEK细胞

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OVCAR4细胞类似产品：：PL45细胞、Duke University 145细胞、H-2195细胞

U266 Bl细胞类似产品：：H1651细胞、TM4细胞、SU.86.86细胞

BJA-B-1细胞类似产品：：GES1细胞、OVCAR-10细胞、SLMT-1细胞

Hs 578.Bst细胞类似产品：：H-2107细胞、MPC-5细胞、HL-60细胞

CG4细胞类似产品：：PaTu 8988s细胞、PLC/PRF/5细胞、HCC1954-BL细胞

C4-I细胞类似产品：：BpRc1细胞、D-341 Med细胞、Hs 888.Lu细胞

MPC-83细胞类似产品：：PL9细胞、MC 116细胞、H1355细胞

H-460细胞类似产品：：GLC-82细胞、RT-4细胞、B16F0细胞

H1436细胞类似产品：：Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞

PC-9/S1细胞类似产品：：SU86-86细胞、H-498细胞、D407细胞

VMCUB1细胞类似产品：：H-508细胞、CEMC1细胞、PANC0403细胞

3T3 Swiss Albino细胞类似产品：：OVTOKO细胞、BNL CL2细胞、CCK81细胞

Me Wo细胞类似产品：：MDAMB453细胞、SUM 159PT细胞、SW 1417细胞

SKMEL-31细胞类似产品：：NOMO1细胞、VK-2/E6E7细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞

SW480细胞类似产品：：HPAEpiC细胞、3-LL细胞、ECC10细胞

CF-1 MEF细胞类似产品：：Centre Antoine Lacassagne-62细胞、PK-13细胞、H1793细胞

D-341Med细胞类似产品：：JROECL33细胞、MDA-MB435细胞、SUNE-1细胞

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