"SK-N-BE(2)-C Cells(赠送Str鉴定报告)|人神经母细胞瘤细胞
细胞背景资料：神经母细胞瘤；骨髓转移；男性
细胞形态：上皮细胞样
解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
细胞生长：贴壁
Anip973细胞类似产品：：WI-38细胞、COLO-320-DM细胞、MDCKII细胞
JM-Jurkat细胞类似产品：：PFSK-1细胞、TE85细胞、Hs274T细胞
Hs832.Tc细胞类似产品：：Vero 76细胞、MDAMB231细胞、NCI-A549细胞
H-1793细胞类似产品：：ECC-10细胞、Swiss 3T6细胞、SCC-25细胞
Dysplastic Oral Keratinocyte细胞类似产品：：ACC2细胞、SK-RC-42细胞、SKMEL1细胞
SK-N-BE(2)-C Cells(赠送Str鉴定报告)|人神经母细胞瘤细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做HAO标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
H-2196细胞类似产品：：HTori 3细胞、PANC3.27细胞、C1R细胞
MRC-V细胞类似产品：：Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、HSC 3细胞、HO8910细胞
MN60细胞类似产品：：COLO-679细胞、VMRCRCZ细胞、WISH细胞
Mel-624细胞类似产品：：CCK81细胞、OCI-Ly8细胞、KYSE-30细胞
NCIH2122细胞类似产品：：LN-382细胞、OVTOKO细胞、NCIH1581细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
SK-N-BE(2)-C Cells(赠送Str鉴定报告)|人神经母细胞瘤细胞
细胞生长特性：贴壁
H-2198细胞类似产品：：KMS-11细胞、NCCIT细胞、JJN-3细胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞类似产品：：NCIH1838细胞、H157细胞、SK 1细胞
H2029细胞类似产品：：CAL27细胞、Panc08.13细胞、Hs 274细胞
JB 6细胞类似产品：：H1417细胞、16-HBE细胞、FC33细胞
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CTLL-2细胞类似产品：：M14细胞、CemT4细胞、KLM-1细胞
造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中Zui常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】１)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌３０min,酒精擦拭后直接开始试验；２)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；３)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；４)不带手套，徒手操作；５)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需１２１°CGAO压灭菌２０分钟后３７％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不HAO，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且HAO几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求GAO，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！
贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！
FF-WT-BJ细胞类似产品：：hTERT-HPNE细胞、R 2 C细胞、H-4细胞
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HBVSMC细胞类似产品：：CAL-27细胞、PG-LH7细胞、G402细胞
HCC-1438细胞类似产品：：LN229细胞、H-1666细胞、TOV21G细胞
OVCA 420细胞类似产品：：HCC-95细胞、OCI-Ly 10细胞、U031细胞
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PC 61 5.3细胞类似产品：：NE1-E6E7细胞、ST2细胞、HT 1197细胞
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MSB1细胞类似产品：：LIPF178C细胞、HGC-27细胞、KPL1细胞
HBVSMC细胞类似产品：：CAL-27细胞、Kelly细胞、OCI AML4细胞
SK-N-BE(2)-C Cells(赠送Str鉴定报告)|人神经母细胞瘤细胞
H3396细胞类似产品：：NCI-H1693细胞、KYSE 410细胞、WSU-DLCL(2)细胞
SNK6细胞类似产品：：BJA-B1细胞、H69C细胞、CCC-HPF-1细胞
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CATHa细胞类似产品：：KMB17细胞、GM 637细胞、GM 637细胞
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P3J HR1-K细胞类似产品：：A-101D细胞、HCC1008细胞、NCIH1563细胞
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JVM-3细胞类似产品：：KYSE180细胞、HEL92.1.7细胞、Tca8113细胞
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MDA-MB415细胞类似产品：：VMCUB-1细胞、CAL 85-1细胞、Y-1细胞
MRC5细胞类似产品：：SKNBE-1细胞、DSL6A/C1细胞、PCI-4B细胞
G292细胞类似产品：：Nb 2细胞、HS940细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞
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KAT5细胞类似产品：：HTori-3.1细胞、MHH-CALL2细胞、H-1404细胞
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