"MM96L Cells(赠送Str鉴定报告)|人黑色素瘤细胞
细胞背景资料：黑色素瘤；淋巴结转移；女性
细胞形态：上皮细胞样
体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。
细胞生长：贴壁
SRS-82细胞类似产品：：BIC-1细胞、MDA-MB415细胞、UMNSAH-DF-1细胞
SKMES细胞类似产品：：THLE2细胞、HcerEpic细胞、hFOB1.19细胞
C4-2细胞类似产品：：BC-024细胞、NCI-H1693细胞、MDAMB453细胞
EFM19细胞类似产品：：HCC78细胞、MC3T3细胞、SKRC-52细胞
Caov-3细胞类似产品：：BLO 11细胞、LUDLU 1细胞、SUM-52细胞
MM96L Cells(赠送Str鉴定报告)|人黑色素瘤细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SNU354细胞类似产品：：NCI522细胞、PK (15)细胞、BN-CL2细胞
Madison lung细胞类似产品：：WEHI-279细胞、CFPAC-1细胞、K 562细胞
CoCL3细胞类似产品：：H1355细胞、H2228细胞、T-ALL1细胞
NCI H929细胞类似产品：：SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞
NCTC 929细胞类似产品：：Panc02.03细胞、HPMEC细胞、S3 HeLa细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性：贴壁
Liver-02细胞类似产品：：MC-4细胞、GM00637F细胞、Ca-Ski细胞
DMS-273细胞类似产品：：Hs840_T细胞、2780细胞、201T细胞
SCL-II细胞类似产品：：C41细胞、LL/2(LLc1)细胞、CCFSTTG1细胞
HCS2/8细胞类似产品：：SUSM-1细胞、CHP126细胞、H-2227细胞
HBL 100细胞类似产品：：RKOE6细胞、HCT 8细胞、ZR751细胞
LN 382细胞类似产品：：SK-N-FI细胞、T98G细胞、HuNS1细胞
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过GAO或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！
SK_N_BE2C细胞类似产品：：MSTO-211 H细胞、NCI-H865细胞、NCIH2126细胞
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NCI-H2126细胞类似产品：：NCIH1651细胞、BNL-HCC细胞、H-441细胞
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TE7细胞类似产品：：NCI-H1417细胞、CPA 47细胞、UM-UC-14细胞
TE7细胞类似产品：：NCI-H1417细胞、CPA 47细胞、UM-UC-14细胞
Roswell Park Memorial Institute 7951细胞类似产品：：NCI-ADR-RES细胞、SKN-AS细胞、A-375.S2细胞
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NCI H69细胞类似产品：：SU.86.86细胞、CAL51细胞、SNU-387细胞
DMS79细胞类似产品：：RBL-1细胞、SK MES 1细胞、BGC-823细胞
MM96L Cells(赠送Str鉴定报告)|人黑色素瘤细胞
C3H10T1/2 clone8细胞类似产品：：COS-1细胞、MCF10A细胞、NCIH322细胞
NCIH1869细胞类似产品：：H2.35细胞、NCI-H345细胞、NCI-H-295细胞
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H889细胞类似产品：：MDAMB415细胞、MDA.MB.435细胞、Ramos 2G6 4C10细胞
Hs 863.T细胞类似产品：：CHO-Lec1细胞、A431细胞、WEHI-231细胞
CAMA-1细胞类似产品：：Human Microglia Clone 3细胞、PC3M-IE8细胞、WERI细胞
Lewis lung carcinoma line 1细胞类似产品：：MDA157细胞、IPEC-1细胞、SNU119细胞
NCI-H1666细胞类似产品：：Mouse Bladder Tumor line-2细胞、MDA-MB-435 S细胞、GM02131细胞
LIM1215细胞类似产品：：HCC44细胞、HL60细胞、MDAMB468细胞
D10细胞类似产品：：HDLM2细胞、ACC-2细胞、AAV293细胞
A-72细胞类似产品：：MDA-157细胞、aTC1 Clone 6细胞、NU-GC-4细胞
OCILY3细胞类似产品：：Madison细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、HEK AD293细胞
H1238细胞类似产品：：Dysplastic Oral Keratinocyte细胞、PC-3M-IE8细胞、A549-Taxol细胞
WC00044细胞类似产品：：HEK 293 EBNA细胞、LA-N-6细胞、COLO-HSR细胞
NT2/D1细胞类似产品：：H-2170细胞、B16F1细胞、MDA-MB-175-VII细胞
H-1648细胞类似产品：：OVCAR-3细胞、NH-6细胞、Jurkat clone A3细胞
COV504细胞类似产品：：PLC-PRF-5细胞、U 266细胞、PLB 985细胞
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