"Kelly Cells(赠送Str鉴定报告)|人神经母细胞瘤细胞
细胞背景资料：神经母细胞瘤；女性
细胞形态：上皮细胞样
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
细胞生长：贴壁
DMS 114细胞类似产品：：MDAMB175VII细胞、BrCL12细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞
SNU16细胞类似产品：：CAL39细胞、FL 62891细胞、RIN14B细胞
H2171细胞类似产品：：LS513细胞、293T/17细胞、HSC-4细胞
MDA-MB-231 #4175细胞类似产品：：REC 1细胞、EBNA293细胞、ROS17/28细胞
HeLa-229细胞类似产品：：HEK 293T/17细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、SP2/0 Ag-14细胞
Kelly Cells(赠送Str鉴定报告)|人神经母细胞瘤细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
A549ATCC细胞类似产品：：H-1435细胞、SJCRH30细胞、RGB细胞
HTR8/SVneo细胞类似产品：：COS7细胞、P19细胞、Hela-Ap-1细胞
SNK1细胞类似产品：：H1882细胞、NCI-H847细胞、Human Hepatocyte Line 5细胞
H-1238细胞类似产品：：ARH77细胞、Anip[973]细胞、THLE-3细胞
NCI-H1048细胞类似产品：：TE 85.T细胞、CMT 167细胞、RAG细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性：贴壁
HCC-202细胞类似产品：：RT4细胞、NB1-RGB细胞、ND7/23细胞
BMSCs（mBMSCs）细胞类似产品：：U-2OS细胞、Cloudman S91 melanoma细胞、BALB/3T3 (clone A31)细胞
SKNEP细胞类似产品：：U-138MG细胞、U14细胞、BIC1细胞
A-427细胞类似产品：：D407细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞、SL-1细胞
McCoy B细胞类似产品：：SNU16细胞、NCIH1373细胞、BEL-7405细胞
OCI Ly3细胞类似产品：：Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDAMB436细胞、CESS细胞
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏HAO的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。
F81细胞类似产品：：UPCI-SCC-90细胞、Natural Killer-92细胞、BHK21细胞
SKNBE(2)细胞类似产品：：786-0WT细胞、HEL细胞、MDCK-2细胞
CV-1.K细胞类似产品：：OVMANA细胞、Ku812F细胞、RH8994细胞
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HEL-92_1_7细胞类似产品：：SKG-IIIa细胞、H4-IIE-C3细胞、NCI H226细胞
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McG-1细胞类似产品：：Y3.AG.1.2.3细胞、HPDEC细胞、ECV-304细胞
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HUC细胞类似产品：：FK81细胞、HuT78细胞、OSK-1细胞
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BL-6细胞类似产品：：CAL62细胞、Hs729细胞、HemECs细胞
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U-138MG细胞类似产品：：NS-20Y细胞、PC-9S1细胞、HFTF细胞
U-138MG细胞类似产品：：NS-20Y细胞、PC-9S1细胞、HFTF细胞
C-32细胞类似产品：：EST81细胞、Cloudman M3细胞、UK Pan-1细胞
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NCI-H2171细胞类似产品：：AN3细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞、RCK8细胞
Hep G2-Luc细胞类似产品：：SUDHL-5细胞、A673细胞、Ls-174-T细胞
HHL5细胞类似产品：：NCI-H322细胞、HTori3细胞、DOK细胞
LUDLU1细胞类似产品：：OCILY3细胞、CT-26 WT细胞、K562细胞
CHO细胞类似产品：：MT-2细胞、EVSAT细胞、HECCL-1细胞
OV2008细胞类似产品：：NS1-Ag4/1细胞、HRC-99细胞、NCI-H727细胞
U2OS细胞类似产品：：Hela-Ap-1细胞、BIU-87细胞、KLN-205细胞
OCI-AML-3细胞类似产品：：HS-294T细胞、MHCC-97细胞、UMUC3细胞
Mia PACA 2细胞类似产品：：U118细胞、Ramos 1细胞、GM06141B细胞
CAL33细胞类似产品：：RPMI-1846细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞、F-81细胞
University of Arizona Cell Culture-893细胞类似产品：：GM2132细胞、SKBr3细胞、Sp2/O细胞
MEF (CF-1)细胞类似产品：：HPDE6c7细胞、RMG-I细胞、1301细胞
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NCI-H2122细胞类似产品：：R1610细胞、U-CH1细胞、HFL1细胞
343 MG细胞类似产品：：SUD6细胞、alpha-TC1.6细胞、H-747细胞
MPC-83细胞类似产品：：PL9细胞、MC 116细胞、H1355细胞
3AA细胞类似产品：：Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、LN299细胞、F9细胞
BT.549细胞类似产品：：H1755细胞、KU19-19细胞、DV90细胞
IPLB-Sf21细胞类似产品：：OV-2008细胞、HNTEC细胞、KYSE-510细胞
Ly10细胞类似产品：：SK-LU-1细胞、NRK 52E细胞、HT 144细胞
RPMI-1788细胞类似产品：：NCIH1693细胞、LK2细胞、SCC-1395细胞
H2023细胞类似产品：：SUPT-1细胞、Hmy.2 CIR细胞、H1651细胞
H2029细胞类似产品：：CAL27细胞、Panc08.13细胞、Hs 274细胞
Hs606T细胞类似产品：：FL-83B细胞、H322细胞、HCC2935细胞
A-549细胞类似产品：：MDAMB468细胞、HCC1937细胞、P30-OHK细胞
KYSE510细胞类似产品：：Eph4 1424细胞、AE1201细胞、Ramos 2G6.4C10细胞
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L-363细胞类似产品：：H2342细胞、MCF-7细胞、SK ES 01细胞
NCI-SNU-886细胞类似产品：：SJSA-1细胞、MGC-803细胞、R 2 C细胞
FK81细胞类似产品：：TK-10细胞、DMS53细胞、A375SM细胞
SW756细胞类似产品：：UCLA-SO-M14细胞、7860细胞、CAL120细胞
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PNT1/A细胞类似产品：：HCC-1599细胞、Hs729T细胞、NRK-49F细胞
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Capan 1细胞类似产品：：CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞
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HCT 15细胞类似产品：：COV 434细胞、L5178-R细胞、526 mel细胞
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HEL 92.1.7细胞类似产品：：MA104细胞、MSTO-211 H细胞、T-24细胞
NCI-H1385细胞类似产品：：TCCSUP细胞、H1703细胞、LYR细胞
YD-38细胞类似产品：：H64细胞、293-FT细胞、MS 751细胞
H660细胞类似产品：：TE5细胞、MC3T3-E1(C4)细胞、UPCI-SCC-90细胞
IHH4细胞类似产品：：NCTC929细胞、NCI-H1836细胞、VP267细胞
OCI Ly3细胞类似产品：：Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDAMB436细胞、CESS细胞
C57 Mouse Tumor 93细胞类似产品：：Ramos(RA1)细胞、HeLa-229细胞、Sf21细胞
SN12C-PM6细胞类似产品：：NBL-5细胞、SK-N-FI细胞、Strain KB细胞
KMS18细胞类似产品：：NS20-Y细胞、UCLA NPA-87-1细胞、JHH-7细胞
B-CPAP细胞类似产品：：MuM-2C细胞、SW 527细胞、KYSE 30细胞
DanG细胞类似产品：：207细胞、TGW细胞、T2(174 x CEM.T2)细胞
Kelly Cells(赠送Str鉴定报告)|人神经母细胞瘤细胞
MOPC细胞类似产品：：HS-294细胞、GM3570细胞、C57 Mouse Tumor 64细胞
SUSM-1细胞类似产品：：NCIH2073细胞、Hs604T细胞、MKN45细胞
OV-1063细胞类似产品：：C127细胞、SKMES1细胞、HCT-15细胞
MCF/Adr细胞类似产品：：BE(2)M-17细胞、BEL-7404细胞、CCC-ESF-1细胞
BRL 3A细胞类似产品：：PFSK细胞、UO.31细胞、HCC1954BL细胞
A 2780 CP细胞类似产品：：SW-620细胞、SKNBE-1细胞、NCI-H1838细胞
OCI-Ly 10细胞类似产品：：IEC 18细胞、HLE B-3细胞、WILL-2细胞
Alpha Mouse Liver 12细胞类似产品：：KTC-1细胞、COV-362细胞、EAhy 926细胞
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