"EAC-E2G8 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠腹水瘤细胞
细胞背景资料：腹水瘤
细胞形态：上皮细胞样
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
细胞生长：贴壁
NS-I/1细胞类似产品：：3T3J2细胞、WRL-68细胞、SNUC2B细胞
NCI-H1105细胞类似产品：：NCI-H1694细胞、RKO-E6细胞、Sup T-1细胞
H-1563细胞类似产品：：NCI-H2023细胞、MIN6细胞、NCIH1568细胞
28SC细胞类似产品：：CCC-ESF-1细胞、HEC1A细胞、COLO201细胞
SF 767细胞类似产品：：TSUpr1细胞、ESC细胞、PE/CA-PJ-34细胞
EAC-E2G8 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠腹水瘤细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
COLO 16细胞类似产品：：EFM192C细胞、MSTO-211H细胞、MES23.5细胞
SNU-869细胞类似产品：：P 3 HR 1细胞、Uhth-74细胞、T-98细胞
NL20SV细胞类似产品：：MA-c细胞、NCI-SNU-398细胞、Jiyoye细胞
L cells细胞类似产品：：HMC3细胞、M619细胞、MKN 28细胞
MOVAS-1细胞类似产品：：Human Liver-7702细胞、NCI-H460细胞、WM266细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
EAC-E2G8 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠腹水瘤细胞
细胞生长特性：半贴壁
Hs 766T细胞类似产品：：HRVEC细胞、MDA MB 436细胞、WM-266-4细胞
DU4475细胞类似产品：：LNCaP细胞、MT-4细胞、KTC1细胞
C57 Mouse Tumor 64细胞类似产品：：BALB/3T3细胞、MDAPCa2b细胞、RT-4细胞
PaTu 8988s细胞类似产品：：22Rv1细胞、HK2细胞、NCTC 929细胞
Institute for Medical Research-32细胞类似产品：：MDA-415细胞、HCC1187细胞、COLO357细胞
SJSA1细胞类似产品：：L2细胞、CL34细胞、SHG44细胞
常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。
WM-266-4细胞类似产品：：CCD-966SK细胞、T-HSC细胞、MCF-7/ADR-RES细胞
RKO-AS45-1细胞类似产品：：HCC0827细胞、MDA-MB-468-RED细胞、OCI Ly19细胞
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2780CP细胞类似产品：：KOPN8细胞、TFH细胞、CHP-100细胞
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HCC-1937细胞类似产品：：RBMEC细胞、OE21细胞、MDAMB330细胞
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KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞类似产品：：NCIH1299细胞、SUP-B15细胞、C6细胞
LOU-NH-91细胞类似产品：：MCF-7/AdrR细胞、SUP-M2细胞、C-33-A细胞
KMB 17细胞类似产品：：MCF10A细胞、COV362细胞、SNU216细胞
A9细胞类似产品：：NCIH1688细胞、H-1573细胞、A-10细胞
Hs-675-T细胞类似产品：：HO8910细胞、C4 I细胞、RPMI-8226S细胞
NPC-TW039细胞类似产品：：Madison lung细胞、HCC-1954细胞、Ramos (RA)细胞
HS-294T细胞类似产品：：HF-91细胞、Hep 2细胞、LIXC002细胞
NCIH2135细胞类似产品：：MES-SA-Dx5细胞、OE-21细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞
COLO679细胞类似产品：：EPC细胞、Hs-940细胞、SCH细胞
A549/DDP细胞类似产品：：NCI-H2029细胞、SW 948细胞、COLO320 DM细胞
MKN 28细胞类似产品：：AG06814-N细胞、RPMI #1846细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞
PLB985细胞类似产品：：Pro-5WgaRI3C细胞、P30-OHKUBO细胞、Panc-05.04细胞
DLD1细胞类似产品：：AgC11x3A细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、Mahlavu细胞
Panc3_27细胞类似产品：：PG13细胞、Hs 746.T细胞、SVG p12细胞
HC11 Mammary Epithelium细胞类似产品：：F98细胞、H-1734细胞、4T1.2细胞
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CA 46细胞类似产品：：D283 Med细胞、WERI-Rb 1细胞、Colo741细胞
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Co-115细胞类似产品：：RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞
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COLO-357细胞类似产品：：SNU449细胞、S91细胞、MM1.S细胞
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Jurkat77细胞类似产品：：HCEC细胞、P3.times.63 Ag8.653细胞、H766T细胞
HCE-2 [50.B1]细胞类似产品：：G-401细胞、HRA-19细胞、NCIH378细胞
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NCIH510细胞类似产品：：N-9细胞、HCT GEO细胞、SNU-886细胞
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T2(174 x CEM.T2)细胞类似产品：：PANC.1细胞、H295R细胞、CNE2Z细胞
SK-ML2细胞类似产品：：COR L279细胞、Sp2/0-Ag14细胞、J 111细胞
LS1034细胞类似产品：：NRK-52E细胞、NCL-H548细胞、SK-N-F1细胞
EAC-E2G8 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠腹水瘤细胞
EMT-6细胞类似产品：：CTLL2细胞、MCM细胞、GA-10细胞
Tca-8113细胞类似产品：：KM12细胞、Hca-F细胞、NP-69细胞
NCI-UMC-11细胞类似产品：：WM-115细胞、H1623细胞、NK-92 MI细胞
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ASH-3细胞类似产品：：H-1703细胞、SW756细胞、NCI-H2342细胞
Hep-G2细胞类似产品：：Emory University-2细胞、FK81细胞、CCC-HSF-1细胞
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PLB985细胞类似产品：：Pro-5WgaRI3C细胞、P30-OHKUBO细胞、Panc-05.04细胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞类似产品：：NCIH2107细胞、NCI-H1581细胞、NFS-60细胞
Lec1细胞类似产品：：ChaGo-K-1细胞、Caco-2/BBe 1细胞、EOMA细胞
NG 108-15细胞类似产品：：GM03569B细胞、MDA-MB-436细胞、A431细胞
NCIADR.RES细胞类似产品：：SUNE 1细胞、SU-DHL-5细胞、3LL细胞
CEM-0细胞类似产品：：33604细胞、NCIH1341细胞、NB1-RGB细胞
IAR20细胞类似产品：：SW 1222细胞、WIL2-S细胞、NCIH1573细胞
KATOIII细胞类似产品：：NCI-841细胞、Z310细胞、NIH:OVCAR-4细胞
OCI-AML3细胞类似产品：：HCC0078细胞、UPCI:SCC90细胞、P3X63Ag8.653细胞
NIH:OVCAR4细胞类似产品：：Ly8细胞、CHL-1细胞、DK-MG细胞
H-1882细胞类似产品：：IPECJ2细胞、K7M2细胞、MIA PaCa-2细胞
H1623细胞类似产品：：OCILY7细胞、HO-8910PM细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞
AC29细胞类似产品：：HEC-1-B细胞、H8细胞、GM3190细胞
LLC-PK1细胞类似产品：：TR146细胞、RBE4细胞、A549/ATCC细胞
RS4-11细胞类似产品：：H1688细胞、H-292细胞、C-643细胞
RAW2647细胞类似产品：：P30/OHK细胞、0V-1063细胞、SNU520细胞
P31/Fujioka细胞类似产品：：B958细胞、SK BR 03细胞、D562细胞
NCIH250细胞类似产品：：NCIH322细胞、NCIH2009细胞、MDA-MB-175VII细胞
BC-028细胞类似产品：：FHC细胞、NALM-6细胞、CL-34细胞
HT-115细胞类似产品：：32D.3细胞、A-375SM细胞、NCI-H1355细胞
Clone 15 HL-60细胞类似产品：：GEO细胞、ETCC007细胞、BDCM细胞
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