"RPMI-2650 Cells(赠送Str鉴定报告)|人鼻腔上皮细胞
细胞背景资料：头颈鳞癌；胸腔积液转移；男性
细胞形态：上皮细胞样
解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
细胞生长：贴壁
DU-4475细胞类似产品：：HCC1359细胞、CCD 841 CoTr细胞、HSKMC细胞
T-T细胞类似产品：：CWR22-Rv1细胞、32D clone3细胞、SBC-5细胞
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IGR-OV1细胞类似产品：：H1734细胞、EMT6细胞、MFD-1细胞
RPMI-2650 Cells(赠送Str鉴定报告)|人鼻腔上皮细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做HAO标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
ETCC-007细胞类似产品：：HEL-92-1-7细胞、UT-7细胞、HCC1187细胞
NCI-H1688细胞类似产品：：MOLT3细胞、P 3 HR 1细胞、CCD 1112SK细胞
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Ra No. 1细胞类似产品：：Hs 852.T细胞、Li-7细胞、TCC-SUP细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
RPMI-2650 Cells(赠送Str鉴定报告)|人鼻腔上皮细胞
细胞生长特性：贴壁
RSC-96细胞类似产品：：SKRC-52细胞、769-P细胞、SUM 52PE细胞
H-146细胞类似产品：：HCC-1359细胞、H64细胞、KALS1细胞
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Clone 15 HL-60细胞类似产品：：Hs-578Bst细胞、CW-2细胞、KU-19-19细胞
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏HAO的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力ZuiHAO时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖HAO瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
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MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞类似产品：：Ketr-3细胞、HAPI细胞、C-6细胞
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NCIH1930细胞类似产品：：Hs888Lu细胞、LLC1细胞、NCI-H676细胞
RFL 6细胞类似产品：：BT 325细胞、HEC1-A细胞、SUM52细胞
NPA-87细胞类似产品：：RC92A细胞、H-4细胞、SUPT-1细胞
HCa/16A3-F细胞类似产品：：SHEP1细胞、CCK-81细胞、RA.1细胞
HCFB（HCF）细胞类似产品：：WEHI-231细胞、MG63细胞、OVCAR 420细胞
HIT clone T15细胞类似产品：：NL20细胞、SVEC4-10细胞、NW-38细胞
A2780CP70细胞类似产品：：P3 NS1 Ag4/1细胞、THLE2细胞、B16 melanoma细胞
HPAF2细胞类似产品：：EB-2细胞、NCI-H1373细胞、NCIH358细胞
Potorous tridactylus Kidney 1细胞类似产品：：Caco-2BBe细胞、Eca-109细胞、H157细胞
NCI-H1581细胞类似产品：：ROS1728细胞、NCI-SNU-C2A细胞、GBC-SD细胞
GM03573细胞类似产品：：L5178Y TK+/-3.7.2c细胞、GM03320细胞、H-2141细胞
OC 316细胞类似产品：：SF-539 BT细胞、Nittby-Salford 1细胞、MNNG-HOS (Cl#5)细胞
PTK1细胞类似产品：：UPCISCC154细胞、NuTu 19细胞、RPE-1细胞
NT2-D1细胞类似产品：：Lewis Lung细胞、LUDLU1细胞、DMS 114细胞
L5178Y-R细胞类似产品：：mIMCD3细胞、RGM-1细胞、OCI-Ly 1细胞
ChaGo K-1细胞类似产品：：CV-1 in Origin Simian-1细胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞、H4IIEC3细胞
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