武汉艾美捷科技有限公司

产品概述

由艾美捷代理Enzo推出的泛素化检测试剂盒Ubiquitinylation kit（货号BML-UW9920）是一款用于生成泛素-E2硫酯（ubiquitin-E2 thioester）的多功能工具试剂盒。该产品利用泛素级联反应的前两步，为泛素化实验提供生成多种硫酯连接泛素结合酶（E2）的手段，适用于将泛素转移至E3连接酶以及后续靶蛋白泛素化的研究。试剂盒提供生物素化泛素，支持硫酯形成及泛素结合物的高灵敏度检测。

核心功能与优势

多功能工具：该试剂盒是生成多种硫酯连接泛素结合E2酶（E2s）的优秀工具，利用泛素级联反应的前两步，为泛素化实验提供灵活的实验平台。

生物素化泛素检测：试剂盒提供生物素化泛素（Bt-Ub），支持硫酯形成，并可通过链霉亲和素连接的酶实现泛素结合物的高灵敏度检测，简化检测流程并提高信号强度。

充足的实验材料：试剂盒提供足够的材料，可进行50次50 µl反应，满足多次实验需求。

应用场景

该试剂盒建议用于以下实验：

1. 靶蛋白泛素化：在专用E3连接酶存在下，对靶蛋白进行泛素化。试剂盒提供的E2组合可用于生成E2-Ub硫酯结合物，以测试特定E3/靶标组合。例如，在mdm2（E3）和UbcH5b（E2）存在下对p53进行泛素化。

2. 新型E2酶的泛素激活：将泛素激活用于与新型E2酶的硫酯结合，可在直接可比的条件下与试剂盒提供的E2酶进行替换实验。

3. 细胞裂解物作为E3来源：利用细胞裂解物或粗提物/制备物作为E3连接酶来源，在试剂盒组分存在下促进纯化靶蛋白的泛素化。

4. 底物非依赖性体外泛素化反应：确定候选E3酶及其催化结构域/片段的泛素连接酶活性/特异性。

注：试剂盒提供应用1和2的实验方案。通过包含、省略或替换特定酶组分，可轻松修改实验设置以适应其他应用。

试剂盒组成

20X泛素激活酶溶液：人重组E1（His6标签），125 µl

10X泛素结合酶溶液（E2）：每种E2提供20 µl，包括UbcH1、UbcH2、UbcH3、UbcH5a、UbcH5b、UbcH5c、UbcH6、UbcH7、UbcH8、UbcH10及UbcH13/Mms2，共计11种E2酶

20X生物素化泛素溶液（Bt-Ub）：125 µl

20X Mg-ATP溶液：125 µl

2X非还原性凝胶上样缓冲液：2.5 ml

10X泛素化缓冲液：250 µl

规格与储存

该试剂盒提供足够的材料，可进行4次反应（每种包含的E2酶）。所有试剂盒组分应储存于-80°C以确保稳定性和活性。操作时需避免反复冻融，运输采用干冰包装。

Ubiquitinylation试剂盒以其多功能性、生物素化泛素检测系统及充足的实验材料，为泛素化研究提供了高效、灵活的实验工具，适用于靶蛋白泛素化、E3连接酶活性分析及新型E2酶表征等多种应用场景。

部分引用文献

BAG2 Inhibits Cervical Cancer Progression by Modulating Type I Interferon Signaling through Stabilizing STING.: Yao, S., Chen, S., et al.; Adv. Sci. (Weinh.) 12, e70005 (2025)

MYLIP attenuates hypoxia tolerance by inducing K27-linked polyubiquitination and subsequent proteasomal degradation of HIF-α: Li, J., Li, Z., et al.; Commun. Biol. 8, 774 (2025)

GW9 determines grain size and floral organ identity in rice: Wen, Y., Hu, P., et al.; Plant Biotechnol. J. 22, 915 (2024)

本产品仅供研究使用（RUO），不适用于临床诊断。