武汉艾美捷科技有限公司

一、产品概述

微管是由α/β微管蛋白异二聚体组装而成的管状细胞骨架结构，直径约25 nm，由13根原丝组成。每微米微管长度约由1650个异二聚体构成，具有内在的结构极性。微管作为细胞骨架的核心组分，参与有丝分裂、胞内物质运输、细胞形态维持等多种关键生命活动，同时也是驱动蛋白（kinesin）等分子马达蛋白行使功能的重要轨道。

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的紫杉醇稳定冻干微管（货号：MT002）由猪脑来源的微管蛋白（纯度≥99%，T240规格）经聚合及紫杉醇稳定化处理后制备而成，以冻干粉形式供应。该产品省去了实验人员自行制备微管的繁琐步骤，为驱动蛋白ATP酶活性测定及微管相关蛋白（MAPs）研究提供了即用型、高批次间一致性的标准化底物。

二、核心应用场景

本产品主要适用于以下研究领域：

微管激活的驱动蛋白ATP酶活性测定：作为驱动蛋白ATPase活性的底物，支持ELIPA™（BK060）及终点法（BK053）ATPase检测体系

驱动蛋白抑制剂IC₅₀的测定：为靶向驱动蛋白的先导化合物筛选提供标准化底物

微管相关蛋白（MAPs）的发现与功能表征：作为MAPs结合与活性调控研究的底物

三、产品规格与关键性能参数

参数 | 指标

微管蛋白来源与纯度 | 猪脑来源，≥99%纯度（T240规格）

产品形式 | 白色冻干粉末

平均微管长度 | 约2 µm

产品优势 | 无需自行制备微管，开瓶即用

ATPase检测批内/批间变异系数 | ≤3%

储存条件（冻干粉） | 4°C干燥（湿度<10%）可稳定保存1年

运输条件 | 室温运输

四、生物活性验证

本产品的生物活性通过微管激活的ELIPA™（Enzyme Linked Inorganic Phosphate Assay）ATPase检测体系（BK060试剂盒）进行验证。该检测使用驱动蛋白重链（KHC）马达结构域（Cat. KR01）作为模式分子马达，通过监测ATP水解过程中释放的无机磷酸盐来定量ATPase活性。

验证体系组成：

重组驱动蛋白重链马达结构域（KHC）

ELIPA反应缓冲液（15 mM PIPES、5 mM MgCl₂，pH 7.0）

ELIPA试剂1（1 mM 2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤核糖苷，MESG底物）

ELIPA试剂2（0.1 U/µl嘌呤核苷磷酸化酶，PNP）

ATP（100 mM储备液）

紫杉醇（2 mM储备液）

质控标准：

在该检测体系的标准条件下，KHC的微管激活ATPase活性速率为1,000 nmol ATP水解/min/mg KHC，批内/批间变异系数≤3%。这一严格的质控标准确保了每批次产品在驱动蛋白ATPase激活性能方面的高度一致性和可重复性。

五、复溶与使用操作指南

推荐复溶方案（适用于微管激活驱动蛋白ATPase检测）：

推荐复溶浓度：5 mg/ml（如需长期保存）

复溶后应确保缓冲液中含有紫杉醇以维持微管稳定性

可按需复溶至任意目标浓度或更换缓冲液体系，但须确保紫杉醇的存在

储存注意事项：

冻干粉：于4°C干燥条件下（湿度<10%）可稳定保存1年；亦可于–70°C干燥保存

复溶后短期使用：建议4°C避光保存

复溶后长期保存：建议复溶至5 mg/ml浓度后分装冻存于–70°C（1 mg/ml亦可冻存但保质期较短）

若需更换缓冲液体系，建议先咨询技术支持以确认兼容性

六、产品优势总结

MT002紫杉醇稳定冻干微管产品由纯度≥99%的猪脑微管蛋白制备，经严格质控确保微管长度均一（平均2 µm）及驱动蛋白ATPase激活活性稳定（CV≤3%）。冻干粉形式支持室温运输及4°C长期保存（1年），复溶灵活便捷。该产品省去了实验人员从微管蛋白开始自行聚合制备微管的繁琐流程（包括37°C聚合、紫杉醇稳定、超速离心收集等步骤），避免了批次间差异，为驱动蛋白抑制剂筛选、MAPs功能研究和分子马达ATPase活性测定提供了即用型标准化微管底物。配套的ELIPA™ ATPase检测体系（BK060）可实现连续动力学监测，是驱动蛋白相关研究的理想组合方案。

文献参考

1. Amos, LA. & Klug A. 1974. J. Cell Sci. 14: 523-530.

2. Funk, C.J. et al. 2004. Development of High ThroughputScreens for Discovery of Kinesin ATPase modulators.Analytical Biochemistry. 329: 68-76