武汉艾美捷科技有限公司

一、产品概述

心肌肌球蛋白是驱动心脏肌肉收缩的核心分子马达蛋白，通过将ATP水解释放的化学能转化为机械力，维持心脏的正常泵血功能。心肌肌球蛋白活性的异常调控与多种心脏疾病密切相关，因此该蛋白已成为心血管药物研发的重要靶点。

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的心肌肌球蛋白S1片段（货号：CS-MYS03）是通过α-糜蛋白酶在EDTA存在条件下酶解高纯度心肌肌球蛋白（MY03）制备的可溶性蛋白片段。S1片段保留了完整的ATP酶活性中心及与肌动蛋白结合的功能域，是体外研究肌球蛋白-肌动蛋白相互作用及筛选靶向药物的理想分子工具。

二、核心应用场景

本产品主要适用于以下研究领域：

钙激活心肌肌球蛋白S1 ATP酶活性的测定：在肌动蛋白细丝存在条件下，定量评估S1片段的酶动力学参数

心肌肌球蛋白S1与F-肌动蛋白相互作用的调控研究：鉴定和表征影响二者结合的蛋白质或小分子化合物

靶向心肌肌球蛋白的先导化合物筛选：为心脏疾病治疗药物的早期发现提供功能性筛选工具

三、产品规格与组分

参数 | 指标

产品形式 | 白色冻干粉末

来源 | 牛心脏组织（含必需轻链ELC和调节轻链RLC）

纯度 | ≥90%（由MY03酶解制备，SDS-PAGE考马斯亮蓝染色扫描密度法测定）

复溶后缓冲液组成 | 20 mM PIPES pH 7.0、5%（w/v）蔗糖、1%（w/v）葡聚糖

复溶后浓度 | 3.3 mg/ml（复溶体积：250 μg规格加75 μl水，1 mg规格加300 μl，5 mg规格加1.5 ml）

储存条件 | 冻干粉于4°C干燥（湿度<10%）密封保存，有效期1年

四、生物活性验证

本产品的生物活性通过可溶性肌小节体系中的钙刺激ATP酶活性测定进行验证。该检测体系的核心构成与原理如下：

检测体系组成：

心肌细丝复合物（CTFC）：由纯化F-肌动蛋白（Cat. #AD99）与原肌球蛋白/肌钙蛋白复合物（TT）按特定化学计量比（肌动蛋白:原肌球蛋白α:原肌球蛋白β:肌钙蛋白C:肌钙蛋白I:肌钙蛋白T = 7:1:1:1:1:1）组装而成，模拟肌纤维中的细丝结构

待测心肌肌球蛋白S1片段（以亚化学计量比加入）

检测原理与质控标准：

在无钙条件下，CTFC对肌球蛋白ATP酶活性产生抑制，此时ATP酶活性处于低水平

加入10 μM钙离子后，钙离子与肌钙蛋白C结合，触发构象变化，解除CTFC对肌球蛋白的抑制，恢复肌球蛋白与F-肌动蛋白的相互作用，ATP酶活性显著激活

严格质控标准确保：无钙条件下ATP酶被有效抑制，加钙后ATP酶活性恢复至预期水平

五、储存与使用注意事项

复溶操作：

1. 使用前将冻干粉管短暂离心，确保所有粉末聚集于管底

2. 按规格加入相应体积的Milli-Q水（详见上方复溶体积表）

3. 轻轻混匀至完全溶解，即得3.3 mg/ml的S1片段储备液

储存与操作要点：

复溶后的蛋白溶液应避免反复冻融，建议按单次使用量分装后于–80°C保存

冻干粉在4°C干燥条件下（湿度<10%）可稳定保存1年

所有操作建议于冰上进行，以最大限度保护蛋白活性

六、产品优势总结

CS-MYS03心肌肌球蛋白S1片段来源于高纯度（≥90%）牛心肌肌球蛋白，经严格酶解与纯化工艺制备，批次间一致性好。产品附带完整的生物活性验证数据（钙刺激ATP酶活性测定），确保客户收到即用的高质量活性蛋白。其冻干粉形式便于长期稳定储存和灵活复溶使用。作为体外肌球蛋白ATP酶活性测定和肌球蛋白-肌动蛋白相互作用研究的标准工具，该产品广泛应用于基础心肌生理学研究及心血管药物发现领域的基础筛选工作。

文献参考

1. Pollard T.D. 1982. Myosin purification and characterization.Methods Cell Biol. 24:333-371.

2. Margossian S.S. and Lowey S. 1982. Preparation of myosinand its subfragments from rabbit skeletal muscle. MethodsEnzymol. 85:55-71.

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5. Holroyde M.J., et al. 1980. The calcium and magnesiumbinding sites on cardiac troponin and their role in the regulation of myofibrillar adenosine triphosphatase. J. Biol.Chem. 255: 11688-11693.