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发布人:上海弘顺生物科技有限公司
发布日期:2025/5/15 6:33:32
"BeWo Cells人绒毛膜肿瘤细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察BeWo Cells人绒毛膜肿瘤细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【BeWo Cells人绒毛膜肿瘤细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
BEWO; Be Wo; Be-Wo
传代细胞培养是细胞生物学研究中的基础技术,其成功与否直接影响实验结果的可靠性。在操作过程中,细胞的消化时间和浓度控制尤为关键。消化时间过短会导致细胞难以从培养瓶壁脱落,影响后续传代效率;而消化时间过长则可能造成细胞膜损伤甚至死亡。研究表明,细胞的最佳消化时间通常控制在1-3分钟,具体需根据细胞状态和培养条件进行调整。消化浓度方面,当使用较高浓度(0.25%胰酶-EDTA)时,消化时间应缩短至1-2分钟;若使用较低浓度(0.05%),则需延长至3-5分钟。建议在显微镜下密切观察细胞形态变化,当细胞间隙增大、边缘回缩时立即终止消化。
当T25瓶复苏细胞收到货时,请观察好细胞状态后,将T25细胞瓶壁进行75%酒精消毒,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态,当细胞密度达80%-90%,即可进行首次传代培养;干冰运输的细胞冻存管收到货后,需立即转入液氮保存或直接进行复苏(第三天换液并检查复苏细胞密度,以便进行下一步)。 能够在实验室条件下进行大量培养和繁殖。这种细胞系在分子生物学和生物技术研究中十分常用。
【背景信息】
BeWo Cells人绒毛膜肿瘤细胞低代次保种|STR图谱取自人绒癌脑转移组织,在仓鼠颊囊移植传代8年。利用移植瘤组织进行体外培养,建立细胞系。利用不同传代方法建立了不同亚系,JEG-3是其衍生克隆。该细胞可以产生雌激素、孕激素、雌酮、雌二醇、雌三醇、hCG、胎盘催乳素、角蛋白。
【传代比例】
1:2-1:4(BeWo Cells人绒毛膜肿瘤细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
BeWo Cells人绒毛膜肿瘤细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
BeWo Cells人绒毛膜肿瘤细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
BeWo Cells人绒毛膜肿瘤细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
BeWo Cells人绒毛膜肿瘤细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:BeWo Cells人绒毛膜肿瘤细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
在生命科学研究的微观世界里,细胞培养技术犹如搭建了一座精密运转的舞台,而细胞消化过程则是这台大戏中至关重要的场景转换环节。当科研人员需要为细胞进行传代培养、开展单细胞分离或执行精确计数时,胰蛋白酶便化身成为舞台幕后的魔法师,用其精妙的生物化学机制完成这场细胞集体的""温柔离散""。
细胞系在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来,即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的,不要再去延长消化时间,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞:润洗方法5min还不能消化,以结肠癌细胞为例,比如:HCT15、LS411和KM12细胞,胰酶消化,一般10 cm培养皿,一次加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。
【物种来源】
BeWo Cells人绒毛膜肿瘤细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定BeWo Cells人绒毛膜肿瘤细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化BeWo Cells人绒毛膜肿瘤细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代准备工作:预热培养基和PBS:在开始传代前,将完全培养基和磷酸盐缓冲液(PBS),预热至37℃,以确保细胞在操作过程中不会受到温度冲击。准备无菌器材:包括无菌吸管、移液枪、离心管、培养皿、胰蛋白酶(或EDTA)溶液、完全培养基等。检查细胞状态:在显微镜下观察细胞的生长密度和形态,确保细胞处于对数生长期且状态良好。
ATCC细胞库(American Type Culture Colection),该中心一直致力于细胞分类、鉴定和保藏工作。ATCC是全球最大的生物资源保藏中心,ATCC通过行业标准产品、服务和创新解决方案支持全球学术、政府、生物技术、制药、食品、农业和工业领域的科学进步。ATCC提供的服务和定制解决方案包括细胞和微生物培养、鉴定、生物衍生物的开发和生产、性能测试和生物资源保藏服务。美国国家标准协会(ANSI)认可了ATCC标准开发组织,并制定了标准协议,以确保生物材料的可靠性和可重复性。ATCC的使命是为了获取、鉴定、保存、开发、标准化和分发生物资源和生物信息,以提高和应用生物科学知识。
C81-61 Cells;背景说明:皮肤黑色素瘤;腹壁转移;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:JB 6细胞、Hs 445细胞、Panc8.13细胞
CL-34 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MDA134细胞、IOSE-29细胞、Hep 3B细胞
PC14 Cells;背景说明:肺腺癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:LMTK-细胞、Sup T-1细胞、HOPC细胞
LLC-WRC 256 Cells;背景说明:乳腺癌;雌性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HuNS1细胞、HEEpiC细胞、MHCC-LM3细胞
Hs 737.T Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2—1:3传代;每周换液2-3次;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:293 F细胞、BT细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞
GM09580 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 ATP1A3 (-) 4 Cells(提供STR鉴定图谱)
KMH2 Cells;背景说明:霍奇金淋巴瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SKNBE(2)细胞、ARIP细胞、PG-4 (S+L-)细胞
ECC-12 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:RCC10细胞、SCL1细胞、Lec1细胞
BLO 11 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:COR-L105细胞、HEK-2细胞、MKN28细胞
H-35 Cells;背景说明:在糖皮质激素、胰岛素或cAMP衍生物的诱导下可以产生酪酸基转移酶;可被逆转录病毒感染;可产生白蛋白、转铁蛋白、凝血酶原;在AxC大鼠中可以成瘤。;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:KP 4细胞、SUDHL2细胞、BSC1细胞
BE2C Cells;背景说明:神经母细胞瘤;骨髓转移;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H.Ep.-2细胞、DLD1细胞、LA4细胞
HEL9217 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周2-3次。;生长特性:悬浮生长;形态特性:成淋巴细胞;相关产品有:Kato-III细胞、H1836细胞、TE 85.T细胞
UC-3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:HCFB(HCF)细胞、NCIH650细胞、DH-82细胞
SW1116 Cells;背景说明:CSAp阴性(CSAp-)。 结肠抗原3,阴性。 角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。 癌基因c-myc, K-ras, H-ras, myb, sis 和fos的表达呈阳性。 未检测到癌基因N-myc和N-ras的表达。 表达肿瘤特异的核基质蛋白CC-4,CC-5和CC-6。;传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:KYSE0520细胞、HT-1197细胞、NCI-H719细胞
HG03021 Cells(提供STR鉴定图谱)
iBMK D3.19K-7 Cells(提供STR鉴定图谱)
Liver iPS 7 Cells(提供STR鉴定图谱)
NCF3A Cells(提供STR鉴定图谱)
PathHunter CHO-K1 GPR142 beta-arrestin Cells(提供STR鉴定图谱)
Ubigene Hep G2 CRBN KO Cells(提供STR鉴定图谱)
XS63 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 STAT1 (-) 4 Cells(提供STR鉴定图谱)
ROS-17/2.8 Cells;背景说明:骨肉瘤;ACI 9935;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MDA2B细胞、COLO 824细胞、GM03570E细胞
FDCP1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:2-3天换液1次;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞;相关产品有:RT4P细胞、CCRF/CEM细胞、COR-L23细胞
OUMS27 Cells;背景说明:软骨肉瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Tu-177细胞、SK-GT-2细胞、Panc_02_03细胞
L 428 Cells;背景说明:霍奇金淋巴瘤;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SNU475细胞、HCC-1833细胞、QGP1细胞
COLO 320 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:淋巴母细胞;相关产品有:THLE-2细胞、UM-UC-3细胞、NCI-H1876细胞
U-373-MG Cells;背景说明:胶质瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MC 3T3-E1细胞、WSU-DLCL-2细胞、PANC0327细胞
NCIH82 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2—1:5传代,每周换液2-3次;生长特性:悬浮生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:HT55细胞、NTera 2细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞
RPMI 7666 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:DMS 53细胞、SR-786细胞、SN12C-PM6细胞
C-127 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:McARH7777细胞、TOV112细胞、BPH-1细胞
Pro-5WgaRI3C Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI-SNU-423细胞、NCIH69细胞、Hs 934.T细胞
U-87 MG Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:LAC细胞、L-6TG细胞、ST 486细胞
U87-MG Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI-H1385细胞、C3H10T1-2细胞、C33-A细胞
Wistar Institute, Susan Hayflick Cells;背景说明:最初以为这株细胞的起源是正常羊膜,但随后通过同工酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹法分析,证实该细胞是HeLa细胞污染的;角蛋白阳性。;传代方法:1:2-1:4传代,每周2-3次。;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:HEK293-EBNA1细胞、RPMI-1846细胞、JROECL 21细胞
AML-2 Cells;背景说明:急性髓系白血病;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:OCI-Ly7细胞、NCI-H1755细胞、C-28I2细胞
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