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抗AHA2 p|ATP酶2磷酸化,质膜型:探索植物质膜质子泵调控机制的关键试剂

发布人:武汉艾美捷科技有限公司

发布日期:2024/12/3 15:43:33

植物和真菌的质膜H+ATP酶产生质子梯度,通过H+同向转运体驱动营养物质的主动运输。

 

艾美捷抗AHA2 p|ATP酶2磷酸化,质膜型:

货号:AS22-4789

免疫原:来自拟南芥(Arabidopsis thaliana)AHA2蛋白序列的KLH偶联肽,UniProt: P19456, TAIR: At4g30190

宿主:家兔

克隆性:多克隆

纯度:抗原亲和纯化血清,PBS pH 7.4

格式:冻干

数量:50微克

复溶:复溶时,加入50微升的无菌或去离子水。

储存:冻干/复溶后储存于-20°C;一旦复溶,请分装成小份以避免反复冻融循环。请在打开管子之前短暂离心,以避免因冻干材料粘附在管盖或管壁上而造成的损失。

测试应用:Western blot (WB)

推荐稀释度:1:10,000 (WB)

预期/表观分子量:104.4千道尔顿

确认的反应性:苋菜(Amaranthus cruentus)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)、甜菜(Beta vulgaris)

预测的反应性:甘蓝(Brassica oleracea)、亚麻菜(Camelina sativa)、荠菜(Capsella rubella)、盐芥(Eutrema salsugineum)、萝卜(Raphanus sativus)

不反应于:目前没有已知的预测反应性例外

 

抗AHA2 p|ATP酶2磷酸化,质膜型应用实例:

51.jpg

 

样品:

1-AHA2的重组蛋白MBP-C末端区域,磷酸化处理

2-重组蛋白AHA2的MBP-C末端区域,随后去磷酸化

3-重组蛋白MBP,磷酸化处理

4-重组蛋白AHA2的MBP-C末端区域,Thr947Ala,磷酸化处理5-标记:分子量标记

将1µg/孔在大肠杆菌中产生并通过亲和层析纯化的重组蛋白在反应混合物(30ul)中孵育。将3 ul反应物与6 ul Laemli 2X混合,在95°C下变性5分钟。样品在10%SDS-PAGE上分离,并使用湿转移法在PVDF(Inmobion®-FL)(孔径0.45µm)上印迹过夜(on)。搅拌下用3%脱脂乳2h/RT阻断印迹。将印迹在1:10000稀释的第一抗体中孵育90分钟/RT,同时搅拌3%脱脂乳TBS。倾析抗体溶液,短暂冲洗印迹两次,然后在室温下在TBS-T中搅拌洗涤一次15分钟和三次5分钟。在搅拌下,将印迹在稀释至1:5000的匹配的第二抗体(抗兔IgG辣根过氧化物酶偶联)中孵育90分钟/RT。如上所述洗涤印迹,并用以下化学发光检测试剂AgriseraBright显影。暴露时间为2分钟。

 

西班牙巴伦西亚理工大学IBMCP Cristian Mayordomo提供

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