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发布人:武汉艾美捷科技有限公司
发布日期:2024/7/24 15:53:56
胶质母细胞瘤细胞是一种致病细胞,引发胶质母细胞瘤,常见于男性。有研究发现原发性胶质母细胞瘤与继发性胶质母细胞瘤的分子发生机制不同。原发性胶质母细胞瘤的分子改变以表皮生长因子受体(EGFR)的扩增与过量表达为主,而继发性胶质母细胞瘤则以p53的突变为主。
艾美捷胶质母细胞瘤细胞 U - 87 MG细胞是一种人类原发性胶质母细胞瘤细胞系,常用于研究胶质母细胞瘤的因果关系和进展。
U-87MG(U87MG)人脑星形胶质母细胞瘤细胞是由Ponten·J等建立,源于恶性神经胶质瘤;U-87MG细胞裸鼠皮下接种可成Chemicalbook瘤。细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌,培养条件:RPMI-1640+10%FBS;37℃,5%CO2。
U-87MG(U87MG)人脑星形胶质母细胞瘤细胞
细胞培养
U - 87 MG细胞在添加了10%FBS和1x pen - strep的Eagle最低必需培养基中维持培养。当培养物达到80 - 90%汇合时进行传代。对于2D水凝胶涂层培养和3D细胞培养,根据用户手册,使用VitroGel 3D - RGD和VitroGel RGD - PLUS,如下所述。
2D涂层培养方法
用VitroGel稀释溶液(类型1)以1:0、1:1和1:3的稀释度制备2D涂层水凝胶,然后与无细胞的U - 87 MG培养基以4:1的比例混合;向每个24孔板中加入300μL。水凝胶在室温下稳定20分钟,然后将细胞添加到悬浮在300μL覆盖培养基中的水凝胶顶部。每隔一天更换培养基。
3D涂层培养方法
根据制造商的方案,用VitroGel稀释溶液(类型1)以1:1和1:3的稀释度制备水凝胶。对于共聚焦/荧光成像,使用底部有盖玻片的8孔室培养细胞,每孔使用200μL水凝胶。每隔一天更换培养基。
荧光(IF)成像
对于IF成像,细胞在有盖玻片的腔室载玻片上生长,而不是在8孔板上。每个腔室容纳200μL水凝胶/细胞混合物。根据制造商的方案,使用Image - iT?固定/透化试剂盒、ActinGreen?488 ReadyProbes?试剂和NucBlue?固定细胞ReadyProbes?试剂(ThermoFisher)对细胞进行固定和染色。使用带有ZEN软件和ImageJ的Zeiss Axiovert 200M荧光细胞成像显微镜拍摄图像。
胶质母细胞瘤细胞U - 87 MG部分参考文献:
Kutwin, M. et al. Investigation of platinum nanoparticle properties against U87 glioblastoma multiforme. Arch Med Sci 13, 1322–1334 (2017).
Liu, H. et al. Differentiation of human glioblastoma U87 cells into cholinergic neuron. Neurosci. Lett. 704, 1–7 (2019).
Miyai, M. et al. Current trends in mouse models of glioblastoma. J. Neurooncol. 135, 423–432 (2017).
Wu, M. & Swartz, M. A. Modeling tumor microenvironments in vitro. J Biomech Eng 136, 021011 (2014).
Stock, K. et al. Capturing tumor complexity in vitro: Comparative analysis of 2D and 3D tumor models for drug discovery. Sci Rep 6, 28951 (2016).
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