武汉艾美捷科技有限公司

1. 产品概述

由艾美捷代理Bethyl推出的兔抗DDX6亲和纯化抗体（货号：A300-461A），经抗原亲和纯化，特异性靶向人源DDX6蛋白（DEAD-box解旋酶6，亦称p54或RCK）。该抗体适用于免疫组化、免疫沉淀及蛋白免疫印迹等多种实验应用，经验证可识别小鼠及人源样本，是研究RNA代谢、翻译调控及细胞增殖的重要工具。

2. 关键规格参数

项目 | 规格

目标抗原 | DDX6（DEAD-box解旋酶6）

验证反应性 | 小鼠，人

宿主/克隆性 | 兔 / 多克隆

抗体形式 | 完整IgG分子

免疫原 | 人DDX6蛋白C端区域（第433位至C末端）

特异性表位 | 人DDX6蛋白第425–483位残基之间（参照NP_004388.2）

纯度 | 抗原亲和纯化

浓度 | 1000 µg/mL

保存缓冲液 | Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液，pH 7–8，含0.09%叠氮化钠

保存条件 | 2–8°C（请勿冷冻）

有效期 | 自收货之日起1年

3. 推荐工作浓度与实验条件

应用 | 推荐稀释比例/用量 | 备注

Western Blot（WB） | 1:25,000 – 1:50,000 | 使用含5%脱脂牛奶的TBST进行封闭及抗体稀释；一抗建议4°C孵育过夜；细胞裂解物WB推荐使用山羊抗兔IgG（H+L）二抗（如A120-101P）

Immunohistochemistry（IHC） | 1:1,000 – 1:5,000 | 推荐使用Tris-EDTA缓冲液（pH 9.0）进行热诱导抗原修复（适用于石蜡包埋组织切片）

Immunoprecipitation（IP） | 6 µg/mg 裂解物 | 沉淀完成后进行WB检测时，推荐使用HRP标记的抗兔IgG轻链特异性二抗，并在封闭液中加入5%正常猪血清（如S100-020）以消除重链干扰

4. 产品特性与背景信息

靶标蛋白功能：DDX6属于DEAD-box解旋酶家族成员，其名称来源于家族高度保守的Asp-Glu-Ala-Asp（DEAD）氨基酸序列基序。该蛋白具有ATP依赖的RNA解旋酶活性，广泛参与RNA代谢的各个层面，包括前体mRNA剪接、RNA合成与降解、RNA核输出、翻译调控、RNA二级结构重塑、核糖体生物发生及核糖核蛋白（RNP）复合物组装。DDX6在翻译水平正向调控基因表达，影响细胞生长与增殖。

结构与活性相关性：本抗体靶向DDX6蛋白C端区域（第425–483位氨基酸），该区域包含部分保守的解旋酶结构域C端延伸区，其功能与RNA底物识别及ATP酶活性调控相关。该表位位于C端，即使N端发生修饰或截短，抗体仍可能维持识别能力，扩大了检测适用性。

主要别名：RCK、p54、HLR2、ATP依赖性RNA解旋酶p54。

基因信息：GeneID 1656，Uniprot ID P26196。

5. 储存与稳定性

储存：收到后请于2–8°C环境下垂直保存，避免反复开盖。切勿冷冻，冷冻可能导致抗体聚集变性及效价下降。

稳定性：在推荐储存条件下，自收货之日起1年内保持性能稳定。

6. 操作注意事项

超高稀释比优势：本品在WB应用中推荐稀释比高达1:25,000–1:50,000，远高于常规抗体使用浓度。建议初次使用时从1:25,000起始，根据信号强度向上或向下优化，以节省抗体用量并降低背景。

IHC抗原修复：不同于常规柠檬酸盐缓冲液（pH 6.0），本品在IHC中明确推荐使用Tris-EDTA缓冲液（pH 9.0） 进行热诱导抗原修复，以获得最佳染色效果。请勿使用柠檬酸盐缓冲液替代。

IP-WB关键要点：进行免疫沉淀后的Western blot检测时，务必使用抗兔IgG轻链特异性二抗，以避免IP体系中兔IgG重链（约55 kDa）的干扰信号。若使用常规抗兔IgG（H+L）二抗，重链信号可能掩盖目标蛋白在相应分子量区域的条带。

靶蛋白分子量：DDX6理论分子量约54 kDa，WB检测预计在~55 kDa处出现条带。

本抗体含0.09%叠氮化钠作为防腐剂，若后续实验涉及抗体标记偶联，建议使用前通过透析或脱盐柱去除。

建议设置已知表达DDX6的阳性对照细胞系（如HeLa、HEK293T）裂解物，以验证实验体系有效性。