武汉艾美捷科技有限公司

1. 产品概述

由艾美捷代理Bethyl推出的兔抗4EBP1亲和纯化抗体（货号：A300-501A），经抗原亲和纯化，特异性靶向人源4EBP1蛋白（真核翻译起始因子4E结合蛋白1）。该抗体适用于免疫组化及蛋白免疫印迹应用，是研究mTORC1信号通路、翻译调控及细胞生长代谢的重要工具。

2. 关键规格参数

项目 | 规格

目标抗原| 4EBP1（真核翻译起始因子4E结合蛋白1）

验证反应性| 人

宿主/克隆性| 兔 / 多克隆

抗体形式| 完整IgG分子

免疫原| 人4EBP1蛋白C端区域（第68位至C末端）

特异性表位| 人4EBP1蛋白第75至118位残基之间（参照NP_004086.1）

纯度| 抗原亲和纯化

浓度| 1000 µg/mL

保存缓冲液| Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液，pH 7–8，含0.09%叠氮化钠

保存条件| 2–8°C（请勿冷冻）

有效期| 自收货之日起1年

3. 推荐工作浓度与实验条件

应用 | 推荐稀释比例 | 备注

Western Blot（WB）| 1:1,000 – 1:6,000 | 使用含5%脱脂牛奶的TBST进行封闭及抗体稀释；一抗建议4°C孵育过夜；细胞裂解物WB推荐使用山羊抗兔IgG（H+L）二抗（如A120-101P）

Immunohistochemistry（IHC）| 1:5,000 – 1:20,000 | 推荐使用柠檬酸盐缓冲液（pH 6.0）进行热诱导抗原修复（适用于石蜡包埋组织切片）

4. 产品特性与背景信息

靶标蛋白功能：4EBP1（亦称EIF4EBP1或PHAS-I）是翻译起始的关键负调控因子。其通过直接结合eIF4E，阻止eIF4E与eIF4G组装，从而抑制帽依赖性翻译起始。在生长因子刺激下，mTORC1复合物直接磷酸化4EBP1，磷酸化后的4EBP1从eIF4E上解离，释放eIF4E以启动翻译。该通路的异常调控与多种肿瘤的发生发展密切相关。

特异性说明：本抗体靶向人4EBP1蛋白C端区域（第75–118位氨基酸），该区域包含多个mTORC1磷酸化位点（如Thr70、Ser83等）。检测磷酸化修饰时，建议配合磷酸化特异性抗体使用以区分总蛋白与修饰状态。

主要别名：4E-BP1、BP-1、PHAS-I、磷酸化热酸稳定蛋白（由胰岛素调节）。

基因信息：GeneID 1978，Uniprot ID Q13541。

5. 储存与稳定性

储存：收到后请于2–8°C环境下垂直保存，避免反复开盖。切勿冷冻，冷冻可能导致抗体聚集变性。

稳定性：在推荐储存条件下，自收货之日起1年内保持性能稳定。

6. 操作注意事项

本抗体含0.09%叠氮化钠作为防腐剂。若后续实验涉及细胞活性检测或抗体标记偶联，建议使用前通过透析或脱盐柱去除。

4EBP1存在多个磷酸化亚型（α、β、γ），在Western Blot中可能呈现多条迁移速率不同的条带（分子量约15–20 kDa），此为正常现象，反映不同磷酸化状态。建议根据实验目的选择合适的样本处理条件（如磷酸酶抑制剂添加）。

IHC推荐高稀释比（1:5,000起），建议设置同型对照或抗原吸收对照以评估背景信号。