上海雅吉生物科技有限公司

一 、产品详情

二、 产品优势

• 稳定表达，数据可靠： 目标基因稳定整合至基因组，避免外源基因丢失，确保蛋白表达稳定可靠，实验结果可重复性高。

• 背景清晰，干扰少： 经过严格的筛选和验证，确保细胞株背景清晰，内源性干扰因素少，实验结果更准确。

• 种类丰富，选择多样： 提供多种宿主细胞（如HEK293、CHO、HeLa等）和靶基因（如荧光蛋白、报告基因、功能基因等）组合，满足您不同的研究需求。

• 严格质检，品质保证： 每株细胞均经过严格的支原体检测、STR鉴定和功能验证，确保产品质量稳定可靠。

• 专业服务，全程支持： 可根据客户需求定制特定基因的稳转株，提供完善的售前咨询、售后技术支持和服务，为您的研究保驾护航。

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• 三、细胞株可广泛应用于以下研究领域：

• 基因功能研究： 过表达或敲低目标基因，研究其功能及调控机制。

• 药物筛选与评价： 构建药物靶点稳转细胞株，用于高通量药物筛选和药效评价。

• 蛋白表达与纯化： 高效表达目标蛋白，用于蛋白结构、功能研究和药物开发。

• 疾病模型构建： 构建疾病相关基因稳转细胞株，用于疾病机制研究和药物开发。

• 操作步骤

1. 细胞培养:使用适当的培养基和条件培养宿主细胞，确保细胞处于最佳生长状态。

2. 转染:将含有目标基因的载体通过转染试剂（如Lipofectamine）导入宿主细胞。根据载体类型选择合适的转染方法（如化学转染、电穿孔等）。

3. 筛选:转染后24-48小时，加入筛选药物（如G418、Puromycin等）进行筛选。持续筛选2-3周，直至未转染细胞全部死亡。

4. 单克隆筛选:将存活的细胞进行有限稀释，接种到96孔板中，培养至单克隆形成。挑选高表达目标蛋白的单克隆进行扩增。

5. 验证:通过PCR、Western Blot等方法验证目标基因的整合和表达。检测目标蛋白的表达水平和功能活性。

6. 冻存:将验证后的稳转株细胞进行冻存，建立细胞库。

• 载体信息:

• 载体类型: 质粒、慢病毒、逆转录病毒等。

• 筛选标记: G418、Puromycin、Hygromycin等。

• 启动子: CMV、EF1α、SV40等。

• 筛选药物浓度:

• G418: 200-1000 μg/mL

• Puromycin: 1-10 μg/mL

• Hygromycin: 50-500 μg/mL

• 注意事项

1. 细胞状态: 确保细胞在转染前处于最佳生长状态，避免使用老化或污染的细胞。

2. 转染效率: 不同细胞系的转染效率差异较大，需优化转染条件。

3. 筛选药物: 筛选药物的浓度需根据细胞系和载体进行优化，避免过度筛选导致细胞死亡。

4. 单克隆筛选: 单克隆筛选是获得高表达稳转株的关键步骤，需耐心细致操作。

5. 冻存与复苏: 冻存和复苏过程中需严格控制温度和时间，避免细胞损伤。

四、 订购信息

雅吉生物产品全部优惠价供应，京津冀、江浙沪皖、川渝地区通常到货时间为次日达。其它主要大中城市到货时间为隔日达(周末和节假日除外)。

五、 联系我们

欢迎在线、电话、邮件(yajikit@163.com)、QQ或微信订购！订货热线：021-34661275或15317085058（微信同步）

六、 免责声明

产品仅用于科研用途，不得用于临床诊断或治疗。

七、 常见问题解答

Q1: 如何选择合适的稳转细胞株？

A1: 选择稳转细胞株需要考虑以下因素：

• 研究目的：明确您的研究目的，例如基因功能研究、药物筛选等。

• 宿主细胞：根据实验需求选择合适的宿主细胞，例如HEK293细胞适合蛋白表达，CHO细胞适合抗体生产。

• 靶基因：选择您感兴趣的靶基因，并确保其与宿主细胞兼容。

• 抗性标记：选择与您实验体系兼容的抗性标记，例如G418、Puromycin等。

Q2: 如何验证稳转细胞株的表达？

A2: 可以通过以下方法验证稳转细胞株的表达：

• Western Blot：检测目标蛋白的表达水平。

• qPCR：检测目标基因的mRNA表达水平。

• 荧光显微镜观察：如果目标蛋白带有荧光标记，可以直接观察荧光表达情况。

Q3: 稳转细胞株可以传代多少次？

A3: 稳转细胞株的传代次数取决于细胞类型、培养条件等因素。一般来说，稳转细胞株可以稳定传代20-30代。

[雅吉生物]致力于为您提供高质量的科研工具和服务，助力您的研究取得成功！