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2×Taq PCR Master Mix (with dye) 含染料 Taq PCR 预混液

发布人:上海陌孚医药科技有限公司

发布日期:2026/7/9 15:57:24

PC15912.jpg

名称:2×Taq PCR Master Mix(with dye) 

品牌: Medlife

纯度:  ≥98%

货号:PC15912

规格:1ml/价格:¥101.00

规格:20x1ml/价格:¥637.00

规格:50x1ml/价格:¥1274.00

规格:100x1ml/价格:¥2038.00

规格:5x1ml/价格:¥191.00

链接:https://www.med-life.cn/product/1154541.html

一、产品简介

2×Taq PCR Master Mix (with dye) 含染料 PCR 预混液,采用分子生物学重组发酵工艺与 PCR 缓冲体系优化配比制备而成,本品全流程无核酸酶污染,严格管控宿主基因组残留、杂蛋白、核酸内切酶、内毒素及扩增抑制杂质;无额外添加抑制剂、变性剂,批次酶活性、缓冲液渗透压、镁离子浓度、染料兼容性、扩增特异性高度统一,广泛应用于常规定性 PCR 扩增、目的基因片段鉴定、菌种分子分型、载体构建鉴定、样本核酸筛查、科研分子生物学实验、教学 PCR 实训等基因工程、分子免疫学、临床分子检验科研场景。外观为无色澄清透明缓冲溶液,无沉淀、无絮状杂质、无分层析出;保留高活性重组 Taq DNA 聚合酶、标准配比 dNTP、最优镁离子缓冲体系与惰性电泳示踪染料;体系扩增稳定性优异,常温加样耐受度高,不会自发降解失活。密封 - 20℃避光冷冻储存,避免反复冻融、高温环境、核酸酶交叉污染、强酸碱反应体系,规范储存条件下稳定保质期 12 个月。本品为分子实验室核心 PCR 扩增预制试剂,二倍浓缩一体化配方无需单独配制基础反应体系;区别于普通无染料 PCR 预混液,内置惰性电泳上样染料不干扰扩增反应,不抑制聚合酶活性。无需后续添加上样缓冲液,扩增产物可直接凝胶电泳检测,是分子生物学科研与临床分子筛查领域标准化 PCR 扩增专用试剂。


二、作用机制

DNA 靶标片段扩增机制:本产品核心活性组分 Taq DNA 聚合酶为嗜热水解聚合酶,在适宜缓冲离子环境、基因特异性上下游引物、足量 dNTP 底物共存条件下,可识别核酸模板特异性结合位点,遵循碱基互补配对原则催化脱氧核糖核苷酸聚合反应,沿模板链定向延伸合成全新靶标 DNA 片段,完成目标核酸片段链式扩增。重组酶催化活性机制:本品搭载的 Taq DNA 聚合酶为工程菌重组表达产物,通过基因工程手段将Thermus aquaticus(水生栖热菌)DNA 聚合酶功能基因导入大肠杆菌工程菌株,经高密度诱导发酵、菌体裂解、层析纯化、杂蛋白去除、超滤脱盐制备;完整保留天然耐高温聚合酶空间结构与催化活性,耐受 PCR 反复高温变性循环,热稳定性强。2× 浓缩缓冲体系维稳机制:标准化二倍浓缩优化缓冲体系,精准配比钾离子、镁离子等辅因子,维持 Taq 酶最优空间构象与催化效率;缓冲体系可以稳定核酸模板、引物双链杂交结构,降低非特异性引物结合,减少杂带扩增,提升 PCR 扩增特异性与产物得率。

内置电泳染料兼容机制:体系复配生物惰性核酸示踪染料,染料分子不结合核酸模板、不抢占酶活性位点、不阻断碱基聚合反应;全程无扩增抑制作用,仅起到电泳迁移示踪作用,实现 PCR 产物扩增完成后直接上样检测,简化下游核酸电泳流程。


三、主要应用领域

1、常规目的基因 PCR 扩增各类原核、真核生物保守基因、外源插入基因片段特异性扩增,基础分子生物学靶标片段获取实验。2、微生物分子鉴定与菌种分型细菌、真菌病原核酸分子鉴定,菌株系统发育分型、临床分离病原微生物快速筛查检测。3、质粒载体与基因工程鉴定重组质粒阳性克隆鉴定、载体插入片段验证、基因敲除 / 过表达菌株基因组验证实验。4、大批量样本高通量 PCR 筛查药企、第三方检测、疾控实验室批量样本核酸扩增,减少人为配液误差,提升实验重复性。5、核酸电泳一站式检测实验无需配置上样缓冲液,扩增产物直接琼脂糖凝胶电泳,适配快速核酸筛查实验流程。6、分子生物学教学实训

高校 PCR 原理实操、核酸扩增实验、凝胶成像分析实训,试剂批次稳定,实验成功率高。


四、使用方法与注意事项

使用方法:标准 PCR 反应体系按照 2× 配比原则配制,无菌低温环境下,按体系终体积 50% 比例添加本品,投入模板核酸、上下游基因特异性引物,无菌无酶纯水补足至终体系体积;轻柔低速离心混匀后放入 PCR 仪,设置标准变性 - 退火 - 延伸温控程序完成扩增;扩增结束后,扩增产物可直接吸取进行琼脂糖凝胶电泳检测。

注意要点:本品需 - 20℃避光冷冻保存,反复冻融会造成 Taq 酶蛋白变性、辅因子失效、扩增效率下降;核酸实验全程无菌无酶操作,防止外源基因组 DNA、核酸酶污染导致假阳性、扩增失败;高 GC 含量复杂模板建议微调退火温度,提升特异性扩增效果;不可与强高温、强酸、重金属离子体系混合,会直接导致 Taq 聚合酶失活;操作佩戴离心手套、护目镜,防范核酸气溶胶交叉污染;属于生化科研试剂,仅限体外实验室分子实验使用,严禁体内注射、临床人体诊断用药;出现液体浑浊、絮状沉淀、酶活失效、染料析出,说明试剂变质污染,禁止用于精密分子扩增实验;批次酶活、缓冲体系、染料配比性能高度统一,无需预处理,可直接无菌加样配制 PCR 反应体系。


五、总结与展望

2×Taq PCR Master Mix (with dye) 含染料 PCR 预混液凭借大肠杆菌重组高活性 Taq 聚合酶、成熟 2× 一体化浓缩反应体系、无扩增干扰内置电泳染料、批次性能稳定、操作简单便捷、核酸酶阴性等核心优势,成为常规体外 PCR 扩增、基因分子鉴定、高通量核酸筛查领域的标准化分子科研试剂。有效解决传统分装 PCR 试剂配液繁琐、人为加样误差大、扩增后需额外配制上样缓冲液、普通 Taq 酶批次活性不稳定的科研痛点,适配高校实验室、生物医药企业、第三方医学检测、疾控中心全场景分子实验需求。当前依托该含染料 PCR 预混液搭建的标准化核酸扩增实验体系,持续支撑病原微生物分子诊断、基因工程载体验证、动植物种质分子筛选、基础分子机理研究等热点科研课题。随着快速 PCR 检测、现场核酸筛查、高通量分子分型技术不断升级,该标准化 2× 含染料 Taq PCR 预混液将在简易化核酸扩增、一站式电泳检测、批量样本分子筛查领域持续发挥核心作用,为分子生物学、基因工程、临床分子检验方向基础科研和标准化实验平台搭建提供酶活稳定、体系达标、批次可控的标准化 PCR 核心生化试剂。

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