武汉艾美捷科技有限公司

本抗体为艾美捷Bethyl Laboratories推出的兔源多克隆抗体（货号：A300-604A），特异性识别CAP-D3蛋白的C末端区域（第1450位至C末端）。经抗原亲和纯化，提供完整IgG分子形式，未偶联任何标记物（Unconjugated），浓度为200 µg/mL。适用于免疫沉淀（IP）和蛋白质印迹（WB），反应种属为人。

产品规格与理化参数

参数项目 详细规格

目标抗原 CAP-D3（染色体相关蛋白D3）

反应种属 人

宿主来源 兔

克隆类型 多克隆

抗体形式 完整IgG

免疫原 第1448位至C末端之间的区域

亚型 IgG

偶联物 无

纯度 抗原亲和纯化

抗原物种 人

浓度 200 µg/mL

保存条件 2–8 °C

有效期限 自收货起1年

缓冲体系 Tris缓冲盐水，含0.1% BSA和0.09%叠氮化钠

浓度测定依据：采用比尔定律（Beer’s Law），标准为1 mg/mL IgG在280 nm波长处的吸光值（A280）为1.4。

抗原背景：CAP-D3与凝缩蛋白II复合物

CAP-D3（Chromosome-Associated Protein D3）是非SMC凝缩蛋白II复合物亚基D3，也称为NCAPD3、hCAP-D3或hHCP-6。它是凝缩蛋白II复合物（condensin II complex）的五个亚基之一。

凝缩蛋白复合物的功能：

染色体凝缩：在细胞分裂过程中参与染色体的凝缩，通过促进拓扑异构酶I和II介导的正超螺旋和打结作用，实现DNA的压缩

姐妹染色单体分离：确保有丝分裂和减数分裂中姐妹染色单体的正确分离

着丝粒解离：CAP-D3受蛋白磷酸酶2A（PP2A）调控，可能参与着丝粒的分辨（centromere resolution）

凝缩蛋白II复合物的组成：

两个SMC亚基：SMC2和SMC4

三个非SMC亚基：CAP-D3、CAP-G2、CAP-H2

本抗体的靶向优势：识别CAP-D3的C末端区域（1450–1498），可检测内源性CAP-D3蛋白，适用于研究凝缩蛋白II复合物的组装、细胞周期依赖性表达及磷酸化调控（C末端为PP2A调控区域）。

别名：CAPD3、hCAP-D3、hcp-6、hHCP-6、MCPH22（小头畸形22型相关）。

生产与纯化流程

1. 免疫原设计：选择人CAP-D3蛋白C末端第1448位至第1498位之间的合成肽段或重组片段（该区域在CAP-D3中高度特异）

2. 免疫方案：免疫兔，诱导产生多克隆抗血清

3. 亲和纯化：将表位特异性肽段固定在固相支持物上，从抗血清中亲和捕获特异性抗体，去除与其他凝缩蛋白亚基或非特异性序列的交叉反应

4. 浓度标定：A280法，1 mg/mL对应吸光值1.4

5. 缓冲体系：Tris缓冲盐水（TBS）含0.1%牛血清白蛋白（BSA）作为稳定蛋白，以及0.09%叠氮化钠作为防腐剂

注：本品浓度较低（200 µg/mL），但经过亲和纯化后特异性高，推荐稀释倍数在WB中可达1:2,000–1:10,000，IP中固定使用6 µg/毫克裂解液（需按体积计算用量）。

适用范围与推荐使用条件

> 重要说明：本抗体的应用经验集中于免疫沉淀（IP）和Western blot（WB）。使用前建议根据细胞系、细胞周期同步化状态和表达丰度进行预实验优化。

应用技术 推荐使用条件 备注

免疫沉淀（IP） 6 µg抗体/毫克裂解液 按总蛋白质量计算抗体用量

蛋白质印迹（WB） 1:2,000 – 1:10,000 推荐起始稀释度1:5,000

浓度换算：本品浓度为200 µg/mL，即0.2 µg/µL。进行IP时，如需6 µg抗体/毫克裂解液，则需加入30 µL抗体原液/毫克裂解液。

储存与稳定性

储存条件：

温度：2–8°C（严禁冷冻）

防腐剂：0.09%叠氮化钠抑制细菌生长

稳定蛋白：0.1% BSA有助于防止低浓度抗体（200 µg/mL）在储存过程中吸附损失

分装建议：本品浓度较低，不建议过度分装，避免表面吸附。如需长期保存，可无菌分装为50 µL/管，仍储存于2–8°C

有效期：自收货之日起12个月。

产品优势总结

特性 功能优势

C末端特异性 识别CAP-D3第1450–1498位区域，远离SMC相互作用域，避免干扰复合物研究

亲和纯化 高特异性，低背景，适合IP-MS等下游应用

双重应用（IP+WB） 同一抗体可用于免疫沉淀和Western blot，实验体系一致性强

宽稀释范围（WB 1:2,000–1:10,000） 即使浓度较低（200 µg/mL），效价仍然良好，节省抗体用量

含BSA稳定剂 保护低浓度抗体在储存期间的稳定性，减少吸附损失

提供IP后WB优化方案 轻链特异性二抗+5%正常猪血清可进一步降低背景，提升信噪比

典型工作流程：

细胞培养 → 紫杉醇同步化（可选）→ 收集细胞 → 核裂解 → 蛋白定量 →

IP（6–10 µg抗体/mg裂解液，4°C过夜）→ 蛋白A/G珠捕获 → 洗涤 →

洗脱 → SDS-PAGE（6–8%凝胶）→ 转膜（湿转，PVDF）→ 封闭 →

一抗孵育（本抗体，1:5,000，过夜）→ 二抗孵育（抗兔H+L HRP或轻链HRP）→

ECL检测 → 显影分析