武汉艾美捷科技有限公司

产品核心规格

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的抗CP110抗体（货号A301-343A）是一款靶向中心体蛋白CP110（又称CCP110、Cep110）的兔多克隆抗体。该抗体经抗原亲和纯化，以Whole IgG形式提供，未偶联标记，适用于免疫沉淀（IP）和免疫印迹（WB）检测人源样本。关键参数汇总如下：

参数 详细信息

靶点 CP110 / CCP110（中心体卷曲螺旋蛋白110 kDa）

反应性 人

应用 IP、WB

宿主 兔

克隆性 多克隆

格式 Whole IgG

浓度 200 µg/ml

纯化方式 抗原亲和纯化

同种型 IgG

偶联物 未偶联

免疫原与表位特异性

该抗体通过针对人CP110蛋白内部区域的特异性表位进行亲和纯化获得。具体而言，识别表位位于第575位至第625位残基之间（对应蛋白序列编号基于CAH18111.1，GeneID 9738）。免疫原为人CP110蛋白的该区域（600-650区间）。

技术要点：CP110分子量约110 kDa，其C末端包含卷曲螺旋结构域，参与蛋白二聚化和与中心体其它组分的相互作用。靶向575-625区域（位于CP110中部偏C端）的抗体可特异性识别全长CP110，同时避免与N端其他中心体蛋白发生交叉反应。该区域包含可能的磷酸化位点和SCF泛素化连接酶的识别基序，适用于研究CP110的细胞周期依赖性调控。生产中采用固相固定化表位亲和纯化，确保高特异性和低背景。抗体浓度通过比尔定律测定，以1 mg/ml IgG在A280吸光度1.4为标准。

储存与稳定性

储存条件：2 8°C

有效期：自收货之日起1年

缓冲液组成：Tris缓冲盐水，含0.1% BSA及0.09%叠氮化钠（防腐剂）

应用与实验方案

通用方法

所有免疫印迹实验均使用5% Milk-TBST作为封闭液和抗体稀释液。一抗孵育条件为过夜（推荐4°C摇动孵育）。

检测体系

实验类型 推荐检测抗体

细胞裂解液Western Blot 羊抗兔IgG重链和轻链抗体（A120-101P）

免疫沉淀物Western Blot 抗兔IgG轻链HRP偶联抗体，封闭缓冲液中添加5%正常猪血清（货号S100-020）

推荐工作浓度

应用 推荐稀释度/用量

免疫沉淀（IP） 6 µg/mg裂解物

免疫印迹（WB） 1:2000 1:10000

详细实验提示：

免疫印迹（WB）：推荐起始稀释比为1:2000。CP110分子量约为110 kDa，在多数人细胞系（如HeLa、HEK293T、U2OS）中表达水平中等。若信号过强可提高至1:5000-1:10000；若信号弱可降至1:1000。建议使用HeLa细胞全裂解液作为阳性对照。注意CP110在细胞周期中表达水平波动：G1期较低，S期升高，G2/M期达到峰值，有丝分裂后期被降解。使用同步化细胞可获得更一致的信号。转膜后使用5% Milk-TBST室温封闭1小时，一抗4°C孵育过夜，二抗室温孵育1小时，ECL化学发光检测。

免疫沉淀（IP）：按照6 µg抗体/mg总蛋白裂解物的比例加入抗体。由于CP110参与中心体复合物，推荐使用温和裂解条件（如含50 mM Tris-HCl pH 7.4、150 mM NaCl、1% NP-40、0.5%脱氧胆酸钠及蛋白酶抑制剂）以保持蛋白相互作用。避免使用SDS或强变性剂。抗体与裂解物在4°C旋转孵育2-4小时或过夜，然后加入Protein A/G磁珠，继续孵育1-2小时。用裂解缓冲液洗涤3-5次后，用1× SDS上样缓冲液95°C加热5分钟洗脱免疫复合物。

IP后WB检测：推荐使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体（配合5%正常猪血清封闭）进行检测。CP110分子量（~110 kDa）与兔IgG重链（~55 kDa）无重叠，因此使用常规抗重轻链二抗也可接受。但轻链特异性HRP可消除IP洗脱液中可能存在的重链降解片段或非特异性沉淀的背景信号，提高数据质量。若使用常规二抗，目标条带区域（100-120 kDa）通常不会受重链干扰。

别名

centriolar coiled-coil protein 110kDa、centriolar coiled-coil protein of 110 kDa、centrosomal protein CP110、centrosomal protein of 110 kDa、Cep110、CP110

产品优势总结

特异性表位亲和纯化：靶向575-625区域（CP110中部偏C端），区别于靶向N端或C端卷曲螺旋结构域的抗体，适用于检测全长蛋白及可能的磷酸化/泛素化修饰形式。

宽工作浓度范围：WB稀释比1:2000-1:10000，兼容从高表达（同步化S/G2期细胞）到低表达（G1期细胞）样本的相对定量分析。

高效IP性能：6 µg/mg裂解物的推荐用量确保高效捕获内源性CP110及其互作蛋白（如Cep97、Cep290、SCF复合物组分）。

亲和纯化高浓度：200 µg/ml浓度，经抗原亲和纯化去除血清蛋白和非特异性抗体，确保低背景和高信噪比。

稳定储存：2-8°C年效期，无需分装或-20°C冷冻，避免反复冻融导致的效价损失，保障批次间实验重现性。