武汉艾美捷科技有限公司

一、产品概述

beta Actin（β-肌动蛋白）是真核细胞中普遍表达的高度保守的细胞骨架蛋白，广泛用作Western Blot、IHC等实验的内参对照。由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的本产品（A300-491A）为针对人beta Actin N端区域的兔多克隆抗体，经抗原亲和纯化，可同时识别人和小鼠来源的beta Actin。初步数据表明，该抗体还可识别高度同源的gamma Actin。产品适用于免疫组织化学（IHC）和蛋白质印迹（WB），具有极高的检测灵敏度（WB稀释比高达1:25,000），是蛋白表达定量和细胞结构研究的理想内参工具。

二、关键规格

参数 | 详细信息

靶标 | beta Actin

反应性 | 小鼠、人

应用 | IHC, WB

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

免疫原 | 第1–50位氨基酸（N端）

同型 | IgG

偶联物 | 未偶联

纯度 | 抗原亲和纯化

抗原种属 | 人

浓度 | 1000 ug/ml

保存条件 | 2 – 8 °C

有效期 | 收货后1年

缓冲液 | Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液，pH 7-8，含0.09%叠氮化钠

三、分子生物学背景

beta Actin（基因名ACTB，Gene ID 60，Uniprot P60709）是六种高度保守的肌动蛋白异构体之一，在真核细胞中普遍表达。作为细胞骨架的主要组成部分，beta Actin具有以下核心功能：

维持细胞结构：形成微丝网络，赋予细胞机械强度和形态。

调控细胞运动：参与细胞迁移、分裂、胞质分裂及细胞连接形成。

信号转导：与多种信号蛋白相互作用，影响基因表达和细胞命运。

由于beta Actin在各组织、各发育阶段及多种实验条件下表达水平相对稳定，它被广泛用作蛋白质印迹（WB）和免疫组织化学（IHC）中的上样对照或内参，用于校正蛋白定量和检测体系的一致性。

注意：本抗体免疫原为beta Actin N端第1–50位氨基酸。该区域在beta Actin与gamma Actin（基因ACTG1）之间高度保守，因此初步数据显示A300-491A也可能识别gamma Actin（Gene ID 71）。在解释实验结果时需考虑此交叉反应性。

别称：细胞质肌动蛋白1、beta细胞骨架肌动蛋白、BRWS1、PS1TP5结合蛋白1等。

四、储存与稳定性

抗体以1000 ug/ml浓度提供于Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液（pH 7-8）中，含0.09%叠氮化钠作为防腐剂。收到后请于2–8°C条件下垂直保存，切勿冷冻。冷冻会导致蛋白变性和聚集，影响抗体结合活性。在正确储存条件下，自收货之日起可稳定保存1年。

重要提示：叠氮化钠会抑制辣根过氧化物酶（HRP）活性。若后续使用HRP偶联二抗进行化学发光检测，请确保洗涤步骤充分；如需完全去除叠氮化钠，可使用脱盐柱或透析。

应用与推荐工作条件

蛋白质印迹（WB）

推荐稀释范围：1:10,000 – 1:25,000（超高灵敏度）

封闭与抗体稀释液：5%脱脂牛奶-TBST

一抗孵育：过夜孵育（推荐4°C）

推荐二抗：山羊抗兔IgG（重链+轻链）抗体（货号A120-101P）

五、性能特点

beta Actin在常见细胞裂解液（如HeLa、HEK293T、NIH/3T3）中表达丰度极高，通常仅需5–10 ug总蛋白即可获得强信号。

稀释度1:25,000已足以检测大多数样品中的内源性beta Actin。对于特别丰富的样品，可进一步稀释至1:50,000。

超高稀释比意味着极低的抗体消耗：一支100 ul抗体（1000 ug/ml，即100 ug总量）可制备高达2,500 ml工作液（按1:25,000计算），显著降低单次实验成本。

六、优化建议

起始稀释度：建议从1:20,000开始。若信号过强（出现饱和或背景弥散），可提高至1:25,000或更高；若信号偏弱，可降至1:10,000。

上样量：对于全细胞裂解液，建议上样5–20 ug总蛋白。过高的上样量可能导致信号饱和，不适合作为定量内参。

曝光时间：由于beta Actin丰度高，化学发光曝光时间通常很短（数秒至1分钟），注意避免过曝导致条带合并。

七、注意事项

1. 研究用途限制：本产品仅供生命科学研究使用，不得用于临床诊断、治疗或人体相关应用。

2. 安全操作规范：缓冲液含0.09%叠氮化钠，操作时请佩戴实验手套和护目镜，避免皮肤接触或吸入。

3. 交叉反应性说明：本抗体可同时识别beta Actin和gamma Actin，在需要特异性区分两种异构体的实验中请谨慎使用。

4. 批次验证：尽管浓度已标准化为1000 ug/ml，不同批次间可能存在细微差异，建议收到新抗体后进行稀释度验证。

本抗体凭借其超高的检测灵敏度（WB高达1:25,000）、人鼠跨物种反应性以及明确优化的IHC修复条件，是蛋白表达定量、细胞定位研究以及多实验室数据标准化中的可靠内参工具。