武汉艾美捷科技有限公司

一、产品概述

4EBP1（真核翻译起始因子4E结合蛋白1）是mTORC1信号通路下游的关键翻译抑制因子。由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的本产品（A300-501A）为针对人4EBP1蛋白的兔多克隆抗体，经抗原亲和纯化，适用于免疫组织化学（IHC）和蛋白质印迹（WB）检测。抗体识别表位位于4EBP1第75位氨基酸至C末端（第118位残基）之间，可特异性结合人源4EBP1蛋白。

二、关键特性

参数 | 详细信息

靶标 | 4EBP1

反应性 | 人

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

免疫原 | 第68位至C末端区域

同型 | IgG

偶联物 | 未偶联

纯度 | 抗原亲和纯化

抗原种属 | 人

浓度 | 1000 ug/ml

保存条件 | 2 - 8 °C

有效期 | 收货后1年

缓冲液 | Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液，pH 7-8，含0.09%叠氮化钠

三、生物学背景

4EBP1（真核翻译起始因子4E结合蛋白1，基因名EIF4EBP1，Gene ID 1978，Uniprot Q13541）直接结合eIF4E，抑制翻译起始复合物的组装，发挥翻译抑制功能。在生长因子刺激下，mTORC1复合物直接磷酸化4EBP1，导致其从eIF4E上解离，从而解除翻译抑制，允许蛋白质合成继续进行。4EBP1属于翻译抑制蛋白家族，在细胞生长、增殖和代谢调控中发挥重要作用。别称包括：4E-BP1、BP-1、PHAS-I（胰岛素调节的磷酸化热酸稳定蛋白）。

四、储存与稳定性

抗体以1000 ug/ml浓度提供于Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液（pH 7-8）中，含0.09%叠氮化钠作为防腐剂。收到后应在2-8°C条件下储存，避免冷冻。在此条件下，自收货之日起可稳定保存1年。叠氮化钠对某些细胞系具有毒性，如需用于活细胞实验，请通过透析或脱盐柱去除。

应用与推荐稀释度

蛋白质印迹（WB）

推荐稀释范围：1:1000 - 1:6000

封闭与抗体稀释液：5%脱脂牛奶-TBST

一抗孵育：过夜孵育（推荐4°C）

二抗推荐：山羊抗兔IgG（重链+轻链）抗体（如A120-101P）

操作提示：建议根据样本中4EBP1的表达丰度，在推荐范围内优化稀释倍数。对于高表达细胞系（如HeLa、HEK293），可使用较高稀释度（如1:5000）；对于低表达样本，可尝试1:1000。

免疫组织化学（IHC）

推荐稀释范围：1:5000 - 1:20,000

抗原修复：推荐使用柠檬酸盐缓冲液（pH 6.0）进行热诱导抗原修复（FFPE组织切片）

操作提示：对于福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织切片，抗原修复是获得最佳染色信号的关键步骤。建议在正式实验前进行稀释度梯度预实验，以确定特定组织类型的最佳工作浓度。1:10,000为常见起始稀释度。

五、生产与纯化工艺

本抗体通过固定化固相载体上的4EBP1特异性表位进行亲和纯化。具体而言，识别表位定位于人4EBP1蛋白第75-118位残基区域（参考序列NP_004086.1）。免疫球蛋白浓度采用比尔定律测定，设定1 mg/ml IgG在280 nm处吸光度为1.4。

六、注意事项

1. 防腐剂：缓冲液中含有0.09%叠氮化钠，该化合物毒性较低但需注意实验室安全规范。叠氮化钠可能与二抗中的HRP反应，在使用HRP检测系统前需充分洗脱。

2. 应用限制：产品仅限研究使用，不得用于诊断或治疗程序。

3. 批次差异：不同批次的抗体浓度已标准化为1000 ug/ml，但建议收到新批次后验证最佳工作稀释度。

本产品在优化条件下可提供高特异性和灵敏度的4EBP1检测结果，适用于研究mTORC1信号通路、翻译调控以及相关疾病模型中的蛋白表达分析。