武汉艾美捷科技有限公司

一、产品基本信息

属性 | 详细信息

靶种属 | 小鼠

宿主 | 驴

抗体形式 | 全 IgG

特异性 | IgG（H+L，即重链和轻链）

最小交叉反应 | 牛、鸡、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、兔、绵羊血清蛋白

标记物 | Cyanine Cy3

产品类别 | 亲和纯化全 IgG 抗体

克隆性 | 多克隆

二、产品描述

本品为驴源抗小鼠 IgG 二抗，经免疫亲和层析纯化，采用 Cy3 荧光染料标记。由Jackson推出，艾美捷代理。基于免疫电泳和/或 ELISA 验证，该抗体可与小鼠 IgG 全分子反应，同时也能识别其他小鼠免疫球蛋白亚类的轻链。经检测，未发现与非免疫球蛋白血清蛋白的交叉反应。

该抗体已通过 ELISA 及/或固相吸附验证，确保与牛、鸡、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、兔、绵羊血清蛋白的最小交叉反应。但仍可能与其他种属的免疫球蛋白发生交叉反应，建议用户在实验中设置适当的对照。

抗体形式：全 IgG 的特性

本产品为全 IgG 形式，即从抗血清中通过免疫亲和层析分离得到的完整抗体分子。全 IgG 包含一个 Fc 片段和两个通过二硫键连接的抗原结合 Fab 片段，因此为二价抗体，平均分子量约为 160 kDa。全 IgG 形式适用于绝大多数免疫检测实验（如免疫荧光、流式细胞术、免疫组化等），且性价比最高。

三、物理状态与储存条件

冻干粉状态

物理状态：冻干固体

储存温度：2–8°C（冻干粉）

产品规格单中注明了复溶所需去离子水的体积，请按指示操作。

复溶方法

1. 加入指定体积的去离子水（参见产品规格书）。

2. 轻轻混匀，若溶液未完全澄清，可短暂离心去除不溶物。

3. 工作稀释液应现用现配。

4. 复溶后的未稀释液体在 2–8°C 下稳定约 6 周。

长期储存（复溶后）

分装冻存：分装后于 -70°C 或以下冷冻保存。避免反复冻融。

甘油保存法：加入等体积的甘油（ACS 级或更优），使甘油终浓度为 50%，混匀后于 -20°C 以液体形式保存。

有效期：自复溶之日起 1 年。若检测结果符合预期用途，可适当延长有效期。

纯化与缓冲体系

参数 | 说明

纯化方法 | 使用琼脂糖偶联抗原进行免疫亲和层析

缓冲液 | 0.01 M 磷酸钠，0.25 M NaCl，pH 7.6

稳定剂 | 15 mg/ml 牛血清白蛋白（无 IgG、无蛋白酶）

防腐剂 | 0.05% 叠氮化钠

注意：叠氮化钠可能抑制某些酶标记体系（如 HRP），若用于酶联检测，请适当考虑。

四、推荐工作浓度与稀释范围

稀释比例：1:100 – 1:800（适用于大多数应用）

稀释倍数以范围形式提供，因为最佳稀释度取决于多种因素，包括：

抗原密度

细胞/组织的通透性

样本类型（冰冻切片、石蜡切片、细胞爬片等）

检测设备灵敏度

建议：首次使用时，对该稀释范围进行梯度预实验（例如 1:100、1:200、1:400、1:800），以确定特定实验体系中的最佳工作浓度。

五、Cy3 荧光染料特性

Cy3 是一种橙红色荧光染料，与传统的四甲基罗丹明（TRITC）相比，具有更亮、更耐光猝灭、背景更低的优点。

光学参数 | 数值

最大激发波长（Amax） | 550 nm

最大发射波长（Emax） | 570 nm

滤光片兼容性

荧光显微镜：可使用传统的 TRITC 滤光片组，因为 Cy3 的激发和发射光谱与 TRITC 几乎相同。推荐将 Cy3 作为 TRITC 的更亮替代品。

激光激发：

氩离子激光（514 nm 或 528 nm 谱线）：可激发约 50% 的最大强度。

氦氖激光（543 nm 谱线）或汞灯（546 nm 谱线）：可激发约 75% 的最大强度。

六、多色成像建议

与 FITC 双标：建议使用窄带通发射滤光片检测 FITC，以最大程度减少 Cy3 在 FITC 通道中的串色。

与 Alexa Fluor 647 多标：Cy3 可与 AF647 搭配用于共聚焦显微镜。如需更理想的光谱间隔（介于绿色荧光染料如 AF488 与远红染料如 AF647 之间），可考虑 Rhodamine Red-X。

七、应用场景

本产品适用于以下实验技术（需根据实验体系优化稀释倍数）：

免疫荧光（IF）：细胞爬片、冰冻切片、石蜡切片。

流式细胞术（FACS）：细胞表面或胞内染色。

免疫组化（IHC）：尤其适用于需要多重染色的组织切片。

其他需要橙红色荧光检测的免疫学实验。

八、质量控制与验证

通过免疫电泳和/或 ELISA 确认抗体与小鼠 IgG 全分子的反应性。

通过固相吸附确认对多种常见种属血清蛋白的交叉反应最小化。

未检测到针对非免疫球蛋白血清蛋白的抗体，表明纯度和特异性良好。

九、操作注意事项

1. 复溶后澄清度：若复溶后溶液浑浊，应以最大速度离心 5–10 分钟，取上清使用。

2. 避免反复冻融：分装冻存是维持活性的最佳方法。若采用甘油保存法，可直接从 -20°C 取用液体，无需反复冻融。

3. 工作液稳定性：稀释后的工作液应在当日使用完毕，不建议保存。

4. 避光操作：Cy3 为荧光染料，所有操作及孵育步骤应尽量避免强光直射，以保持荧光信号强度。

5. 防腐剂兼容性：叠氮化钠对活细胞有毒，若用于活细胞染色，需通过透析或稀释降低叠氮化钠浓度。

警告：本产品仅限研究使用，不适用于人类或兽医诊断治疗。