武汉艾美捷科技有限公司

在神经科学研究中，准确识别和定位抑制性神经元及其突触结构是理解中枢神经系统功能环路的基础。囊泡性GABA转运蛋白（VGAT）是目前公认的最可靠的抑制性神经末梢标志物，而基于该靶点开发的抗体工具直接影响实验结果的可靠性。本文介绍的由艾美捷代理Synaptic Systems推出的VGAT抗体（Cat. No. 131 308）是一种经过优化的嵌合重组抗体，在保留经典单克隆抗体特异性的同时，提升了实验操作的兼容性。

一、靶点生物学意义：为何选择VGAT

VGAT，又称囊泡性抑制性氨基酸转运蛋白（VIAAT），是负责将GABA和甘氨酸转运进入突触囊泡的关键蛋白。与位于质膜上的神经递质转运体不同，VGAT定位于突触囊泡膜，利用囊泡膜两侧的质子电化学梯度驱动底物转运，从而实现抑制性递质在突触前末梢的储存与定量释放。

在哺乳动物中枢神经系统中，抑制性突触传递主要依赖GABA能或甘氨酸能神经元。由于目前尚未发现其他功能性异构体，VGAT已成为识别这两类抑制性神经末梢的通用且特异的分子标志物。无论是用于突触亚细胞定位、抑制性环路示踪，还是病理状态下抑制性突触可塑性的研究，高质量的VGAT抗体都是不可或缺的研究工具。

二、产品设计与技术优势

该抗体（克隆号Gp117G4）基于经典的鼠单克隆抗体117G4改造而来，是一种嵌合重组抗体。其重链和轻链的恒定区被替换为豚鼠特异性序列，而抗原结合的可变区保持不变。这一设计带来以下优势：

1. 兼容性提升：改造后的抗体可兼容标准的抗豚鼠二抗体系，为免疫组化、免疫细胞化学等基于二抗检测的实验提供了更多选择，尤其适合多色标记实验中需与小鼠来源抗体进行区分的场景。

2. 重组表达体系：抗体在哺乳动物细胞中重组表达，避免了杂交瘤细胞培养过程中可能出现的批次间差异，确保产品的一致性与可重复性。

3. 敲除验证：产品经过基因敲除（K.O.）验证，证明其识别特异性，排除了与非靶蛋白的交叉反应风险，这是抗体质量控制的关键标准。

三、产品规格与储存条件

产品以冻干粉形式提供，每管含50 g纯化的重组IgG。配方中添加了白蛋白和叠氮钠以维持稳定性。冻干状态下应储存于+4℃，切勿冷冻。使用前需用50 l无菌水复溶，得到浓度为1 mg/ml的TBS缓冲液体系，之后可分装保存于-20℃至-80℃。分装后可避免反复冻融导致的效价下降，分装后的工作液建议在短期内使用完毕。

四、应用验证与推荐稀释比例

该抗体在多种检测体系中均通过验证，具体推荐稀释比例如下：

免疫印迹（WB）：1:1000，采用碱性磷酸酶（AP）染色体系。需特别注意，为避免蛋白质聚集，样本在SDS-PAGE前不应进行加热处理。这是因为VGAT蛋白在加热条件下可能形成聚集体，影响电泳分离和抗体识别。

免疫细胞化学（ICC）：1:500，适用于培养细胞中VGAT的定位分析。

免疫组织化学（IHC）：1:500，适用于冷冻切片的常规免疫组化染色。

石蜡切片免疫组化（IHC-P）：1:400，适用于福尔马林固定、石蜡包埋组织的抗原检测。

上述稀释比例为起始优化推荐值，实际实验中可根据样本丰度、固定条件、检测系统灵敏度等因素进行适当调整。

五、种属反应性与免疫原信息

该抗体识别位于大鼠VGAT氨基末端附近的一段合成肽段（对应UniProt ID O35458）。经验证，其可检测人类（Q9H598）、大鼠（O35458）、小鼠（O35633）、豚鼠及猿类的VGAT蛋白，涵盖主要啮齿类动物模型及人类样本，为转化医学研究提供了跨种属应用的便利。

ICC文献：

MAD2B promotes podocyte injury through regulating Numb-dependent Notch 1 pathway in diabetic nephropathy.

Li MR, Lei CT, Tang H, Yin XJ, Hao Z, Qiu Y, Xie YR, Zeng JY, Su H, Zhang C

International journal of biological sciences (2022) 185: 1896-1911. 131 308 ICC; tested species: rat

The synaptic scaffold protein MPP2 interacts with GABAA receptors at the periphery of the postsynaptic density of glutamatergic synapses.

Schmerl B, Gimber N, Kuropka B, Stumpf A, Rentsch J, Kunde SA, von Sivers J, Ewers H, Schmitz D, Freund C, Schmoranzer J, et al.

PLoS biology (2022) 203: e3001503. 131 308 ICC; tested species: rat

IHC文献：

Repetitive concussions promote microglia-mediated engulfment of presynaptic excitatory input associated with cognitive dysfunction.

Chahin M, Mutschler J, Dzhuleva SP, Dieterle C, Jimenez LR, Bhattarai SR, Van Steenbergen V, Bareyre FM

Communications biology (2025) 81: 335. 131 308 IHC; tested species: mouse

Astrocyte specification in the mouse septum is shaped by both developmental origin and local signals.

Xie Y, Reid CM, Turrero Garcίa M, Dale-Huang F, Granados AA, Lu Y, Li J, Hanson SM, Mancia Leon WR, Liu J, Adam M, et al.

Nature neuroscience (2025) 288: 1676-1687. 131 308 IHC; tested species: mouse