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PLBL2检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫吸附测定（ELISA），用于定量检测仓鼠（CHO）细胞样本中的磷脂酶B样蛋白2（Phospholipase B-Like 2，PLBL2）。仅供研究使用，不得用于诊断程序。

艾美捷CHO PLBL2 ELISA试剂盒【#41-PLBL2HA-E01】检测原理：

双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在此检测中，样本中的PLBL2与已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗PLBL2抗体发生反应。经洗涤去除未结合的蛋白质后，加入检测抗体（生物素偶联的抗PLBL2抗体），形成复合物。洗涤后，加入辣根过氧化物酶（HRP）偶联的链霉亲和素，形成复合物。再经洗涤后，通过加入显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）来测定复合物。结合的酶量与样本中PLBL2的浓度成正比；因此，450 nm处的吸光度是测试样本中PLBL2浓度的量度。可以通过标准曲线（由标准品构建）来估算测试样本中PLBL2的量，并根据样本稀释情况进行校正。

程序限制：

仅供研究使用：不得用于诊断程序。

可靠性和重复性：当完全理解包装说明书中的信息并遵循良好的实验室操作规范时，可以获得可靠和可重复的结果。可能影响检测性能的因素包括仪器功能、玻璃器皿的清洁度、蒸馏水或去离子水的质量、试剂和样本的移液准确性、洗涤技术以及孵育时间和温度。不要将不同批次或来源的试剂混合或替换使用。

所需材料（未提供）：

精密移液管（2 µL至1000 µL），用于制备和分装稀释液

试管

喷壶或微孔板清洗/吸引器

蒸馏水或去离子水

能在450 nm处读数的微孔板读数仪

用于制备试剂和缓冲液溶液的各种玻璃器皿

用于样本收集的离心机

用于血浆收集的抗凝剂

计时器

微孔板振荡器

样本稀释：

检测要求每个测试样本在使用前进行稀释。每次进行检测时，所有样本都应进行双份检测。推荐的稀释倍数仅为建议。稀释倍数应基于未知样本的预期浓度，使得稀释后的样本落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样本水平，在运行整个板之前，强烈建议对一个或两个代表性样本进行系列稀释。在使用前立即稀释样本。

CHO培养提取样本：推荐起始稀释倍数为1:20。要制备样本的1:20稀释液，将15 µL样本转移至285 µL的1X稀释液中。充分混合。

试剂准备：

恢复至室温：使用前将所有试剂恢复至室温（16℃至25℃）。

稀释液：直接使用。

洗涤液浓缩液：提供的洗涤液为20X浓缩液，需用蒸馏水或去离子水稀释1:20（1份浓缩液，19份水）。当储存温度较低时，浓缩液中可能会出现结晶。在稀释前将浓缩液加热至30-35℃可以溶解结晶。

检测抗体：根据每条微孔板检测条的需求，将10 µL检测抗体加入990 µL 1X稀释液中，制备工作液。使用前立即稀释，避免光照。均匀混合，但动作要轻柔，避免起泡。

HRP-链霉亲和素：根据每条微孔板检测条的需求，将10 µL HRP-链霉亲和素加入990 µL 1X稀释液中，制备工作液。使用前立即稀释，避免光照。均匀混合，但动作要轻柔，避免起泡。

预包被ELISA微孔板：直接使用。打开铝箔袋，取出微孔板。将不用于检测的检测条和孔放回袋中，并与干燥剂一起重新密封。

仓鼠（CHO）PLBL2校准品：根据批次特定的分析证书进行准备。

https://www.amyjet.com/products/ALP-41-PLBL2HA-E01.shtml