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MMP-19检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫吸附测定（ELISA），用于定量检测仓鼠（CHO）细胞样本中的基质金属蛋白酶19（Matrix Metalloproteinase 19，MMP-19）。仅供研究使用，不得用于诊断程序。

艾美捷CHO MMP-19 ELISA试剂盒【#41-M19HA-E01】检测原理：

双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在此检测中，样本中的MMP-19与已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗MMP-19抗体发生反应。经洗涤去除未结合的蛋白质后，加入检测抗体（生物素偶联的抗MMP-19抗体），形成复合物。洗涤后，加入辣根过氧化物酶（HRP）偶联的链霉亲和素，形成复合物。再经洗涤后，通过加入显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）来测定复合物。结合的酶量与样本中MMP-19的浓度成正比；因此，450 nm处的吸光度是测试样本中MMP-19浓度的量度。可以通过标准曲线（由标准品构建）来估算测试样本中MMP-19的量，并根据样本稀释情况进行校正。

程序限制：

仅供研究使用：不得用于诊断程序。

可靠性和重复性：当完全理解包装说明书中的信息并遵循良好的实验室操作规范时，可以获得可靠和可重复的结果。可能影响检测性能的因素包括仪器功能、玻璃器皿的清洁度、蒸馏水或去离子水的质量、试剂和样本的移液准确性、洗涤技术以及孵育时间和温度。不要将不同批次或来源的试剂混合或替换使用。

所需材料（未提供）：

精密移液管（2 µL至1000 µL），用于制备和分装稀释液

试管

喷壶或微孔板清洗/吸引器

蒸馏水或去离子水

能在450 nm处读数的微孔板读数仪

用于制备试剂和缓冲液溶液的各种玻璃器皿

用于样本收集的离心机

用于血浆收集的抗凝剂

计时器

微孔板振荡器

样本采集与处理：

所有生物材料应被视为潜在危险品。在处理和丢弃时应遵循通用预防措施。

已知干扰物质：浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。

样本稀释：

检测要求每个测试样本在使用前进行稀释。每次进行检测时，所有样本都应进行双份检测。推荐的稀释倍数仅为建议。稀释倍数应基于未知样本的预期浓度，使得稀释后的样本落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样本水平，在运行整个板之前，强烈建议对一个或两个代表性样本进行系列稀释。

CHO培养上清液或提取样本：推荐起始稀释倍数为1:80。要制备样本的1:80稀释液，将5 µL样本转移至395 µL的1X稀释液中。充分混合。

结果计算：

从所有孔的测试值中减去平均背景值（标准零的平均吸光度读数）。

对每个标准品的重复读数取平均值，并使用结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑曲线拟合的计算机软件来处理数据，构建标准曲线。也可以使用二阶多项式（二次）或其他曲线拟合；然而，它们将提供数据的拟合精度较低。

从标准曲线上估算测试样本值。根据稀释因子进行校正，以得出原始样本中MMP-19的浓度。

https://www.amyjet.com/products/ALP-41-M19HA-E01.shtml