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PSII的PsbA|D1蛋白,C端(兔抗体)(类囊体膜标记物)在光合作用研究中的应用

发布人:武汉艾美捷科技有限公司

发布日期:2025/1/21 15:42:52

psbA基因已从许多植物、绿藻和蓝藻中克隆出来。psbA基因组位于叶绿体基因组中,编码D1蛋白,D1蛋白是光系统II的核心成分。在所有含氧光生物中,PsbA/D1在光照下快速循环。使用Global PsbA抗体跟踪PsbA池可以显示光系统II在各种样本中的功能含量。别名:32kDa类囊体膜蛋白,光系统II蛋白D1

 

艾美捷PSII的PsbA|D1蛋白,C端(兔抗体)(类囊体膜标记物)

货号:AS05-084

免疫原:与KLH偶联的合成肽,源自已知的植物、藻类和蓝藻的PsbA序列,包括拟南芥(UniProt:A4QJR4,TAIR:AtCg00020)、水稻(P0C434)、白杨(Q14FH6)、泥炭藓(Q6YXN7)、莱茵衣藻(P07753)、蓝藻(Synechocystis sp.,P14660)以及其他许多物种。

宿主:兔

克隆性:多克隆

纯度:血清

形式:冻干粉

数量:50 µl

复溶方法:复溶时加入50 µl无菌水

储存条件:冻干粉/复溶后于-20°C保存;复溶后请分装,避免反复冻融。打开管子前请短暂离心,以避免因材料粘附在盖子或管壁上而导致的损失。

额外信息:

由于PsbA(D1)蛋白的生物学特性,样本中可能会出现多种降解产物,并在使用抗PsbA抗体时观察到这些产物,包括表观分子量为24 kDa和16 kDa的产物。D1的降解是一个复杂的事件集合,观察到的产物可能受到提取程序和采样前细胞生理状态的影响。此外,D1与细胞色素b559之间可能发生交联,导致蛋白在凝胶中位置上移。在蓝藻(PCC7942)中,通过用PsbA自由肽预孵育抗体,竞争出三条不同的条带,表明所有条带均为PsbA及其前体或降解产物。类似的竞争实验也在菠菜和莱茵衣藻中进行,确认了PsbA条带的身份。

抗PsbA抗体不会检测到D2蛋白,因为用于生成PsbA抗体的肽与D2序列没有同源性。

如需含有ProClin的产品,可按要求提供。

推荐稀释度:1:500(免疫荧光),1:200(免疫组化),1:10,000(Western Blot)

预期/表观分子量:38 | 28-30 kDa

额外信息:

该抗体适用于检测24 kDa或10 kDa C末端片段,具体取决于给定处理条件下的生成产物。在我们的分析中,根据处理和分离程序的不同,我们观察到了来自不同样本的大约24 kDa和大约10 kDa的片段。

与鸡抗PsbA抗体(AS01 016)相比,兔抗PsbA抗体可以检测到PsbA蛋白的多个条带,例如前体蛋白和成熟蛋白。

该抗体可以在高分辨率凝胶上检测到D1的磷酸化形式作为主条带的替代条带。

该抗体可以结合交联蛋白:D1/D2、D1/细胞色素b559、D1/CP43。

该肽在蓝藻D1:1和D1:2中是保守的。

 

应用实例:

51.png

图:从以下来源提取的总蛋白2 µg:(1)拟南芥叶片,使用蛋白提取缓冲液PEB(AS08 300)提取;(2)大麦叶片,使用PEB提取;(3)莱茵衣藻全细胞,使用PEB提取;(4)蓝藻Synechococcus sp. 7942全细胞,使用PEB提取;(5)念珠藻全细胞,使用PEB提取。这些蛋白在4-12% NuPage(Invitrogen)LDS-PAGE上分离后,转印至PVDF膜,转印时间为1小时。转印后,膜立即用2% ECL Advance封闭液(GE Healthcare)在20 mM Tris、137 mM氯化钠(pH 7.6)和0.1%(体积比)Tween-20(TBS-T)中封闭1小时,室温下搅拌。膜在1:50,000稀释的一抗中孵育1小时,室温下搅拌。弃去一抗溶液后,膜短暂冲洗两次,然后在室温下用TBS-T洗涤一次15分钟,再洗涤三次,每次5分钟,期间不断搅拌。膜在二抗(抗兔IgG辣根过氧化物酶偶联抗体,推荐的二抗为AS09 602,稀释至1:50,000)中孵育1小时,室温下搅拌,二抗溶液中含有2%的封闭液。膜按上述方法洗涤后,用化学发光检测试剂显色5分钟,按照制造商的说明进行操作。膜的图像使用CCD成像仪(FluorSMax,Bio-Rad)和Quantity One软件(Bio-Rad)获取。

 

PSII的PsbA|D1蛋白,C端(兔抗体)(类囊体膜标记物)文献参考:
Pica et al. (2024). Functional ecological traits in young and adult thalli of canopy-forming brown macroalga Gongolaria barbata (Phaeophyta) from a transitional water system. PeerJ. 2024 Sep 12:12:e17959. doi: 10.7717/peerj.17959.  

Salazar et al. (2024). SOS1 tonoplast neo-localization and the RGG protein SALTY are important in the extreme salinity tolerance of Salicornia bigelovii. Nat Commun. 2024 May 20;15(1):4279.doi: 10.1038/s41467-024-48595-5.  

Phukan et al. (2024). Externally supplied ascorbic acid moderates detrimental effects of UV-C exposure in cyanobacteria. Photochem Photobiol Sci. 2024 Jul 12. doi: 10.1007/s43630-024-00612-8.

Zhao et al. (2024). Psb28 protein is indispensable for stable accumulation of PSII core complexes in Arabidopsis.Plant J. 2024 May 26. doi: 10.1111/tpj.16844.     

 

https://www.amyjet.com/products/AS05-084.shtml

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