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岩藻糖Fucose探索:糖生物学中的重要角色

发布人:武汉艾美捷科技有限公司

发布日期:2025/1/20 15:40:30

岩藻糖Fucose特异性地与结合在α1,3中的蛋白质N-聚糖上的岩藻糖残基发生交叉反应。这种残基是植物蛋白N-聚糖的特征,在动物蛋白N-聚糖中不存在。将该残留物加入高尔基体中。

 

艾美捷岩藻糖Fucose:

货号:AS07-268

免疫原:核心岩藻糖残基通过α1,3连接至N-糖链。

宿主:兔子

克隆性:多克隆

纯度:免疫原亲和纯化的血清,溶于pH 7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)中。

形式:冻干

数量:50 µg

复溶:复溶时加入50 µl无菌水。

储存:冻干品/复溶后储存于-20°C;复溶后请分装保存,避免反复冻融。打开前请短暂离心管子,以避免因物质粘附在管盖或管壁上而导致的损失。

测试应用:酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫定位(IL)、西方印迹(WB)

推荐稀释度:0.5 µg/ml(ELISA),1:40(IL),1 µg/10 ml(WB)

预期 | 表观分子量:10 - 100 kDa(针对各种糖蛋白)

确认的反应性:高等植物、Phaeodactylum tricornutum(硅藻)

预测的反应性:高等植物、Phaeodactylum tricornutum

未反应的:目前尚未发现与预测反应性不符的已知例外。

21.png

图:抗岩藻糖抗体与PLA2(磷脂酶A2)和链霉亲和素(Avidin)呈阳性反应,而与去唾液酸胎球蛋白(asialofetuin)呈阴性反应。这表明该抗体仅识别α1,3岩藻糖表位。

对于每份样品,将1 µg纯化蛋白用Laemmli样品缓冲液在100°C下变性10分钟,随后加载至4-12%的Bis-Tris凝胶上,并通过半干法转印至硝酸纤维素膜,转印时间为1小时15分钟。膜在TBST中过夜饱和,期间不断搅拌。膜在室温下用TBST稀释至1:5000的浓度,与一抗孵育2小时,期间不断搅拌。弃去抗体溶液,用TBST快速冲洗后,膜在TBST中洗涤3次,每次15分钟。膜在TBST中稀释至1:50,000的浓度,与二抗(山羊抗兔IgG,辣根过氧化物酶偶联,AS09 602,批号1707,来自AGRISE

 

岩藻糖Fucose文献参考:

Xu et al. (2023). The Golgi-localized transporter OsPML4 contributes to manganese homeostasis in rice. Plant Sci. 2023 Dec 2:339:111935.doi: 10.1016/j.plantsci.2023.111935.

Zhang et al. (2018). An important role of L -fucose biosynthesis and protein fucosylation genes in Arabidopsis immunity. New Phytol. 2018 Dec 15. doi: 10.1111/nph.15639.

Jansing et al. (2018). CRISPR/Cas9-mediated knockout of six glycosyltransferase genes in Nicotiana benthamiana for the production of recombinant proteins lacking β-1,2-xylose and core α-1,3-fucose. Plant Biotechnol J. 2018 Jul 3. doi: 10.1111/pbi.12981.

Nakanishi et al. (2017). Protection of Human Colon Cells from Shiga Toxin by Plant-based Recombinant Secretory IgA. Sci Rep. 2017 Apr 3;7:45843. doi: 10.1038/srep45843. (ELISA)

Hanania et al. (2017). Establishment of a tobacco BY2 cell line devoid of plant specific xylose and fucose as a platform for the production of biotherapeutic proteins. Plant Biotechnol J. 2017 Feb 3. doi: 10.1111/pbi.12702.

Ebert et al. (2015). Identification and Characterization of a Golgi-Localized UDP-Xylose Transporter Family from Arabidopsis. Plant Cell. 2015 Mar 24. pii: tpc.114.133827.

Lehtimäki et al. (2014). Posttranslational modifications of FERREDOXIN-NADP+ OXIDOREDUCTASE in Arabidopsis chloroplasts. Plant Physiol. 2014 Dec;166(4):1764-76. doi: 10.1104/pp.114.249094

Baiet et all. (2010). N-glycans of Phaeodactylum tricornutum diatom and functional characterization of its N-acetylglucosaminyltransferase I enzyme. J Biol. Chem. Dec 17.

 

https://www.amyjet.com/products/AS07-268.shtml

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