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FGF-23 ELISA试剂盒/Human FGF-23 ELISA Kit检测原理：

FGF-23 ELISA试剂盒是用于测量血清中FGF-23的双位点酶联免疫吸附测定试剂盒。两种特异性小鼠单克隆抗体结合全长FGF-23。其中一种抗体固定在微量滴定板上进行捕获。另一种抗体与HRP（辣根过氧化物酶）缀合用于检测。

在这个反应中，将含有FGF-23的样品与固定在微量滴定孔的抗体一起培养。用抗体捕获样品中的FGF-23。在该反应结束时，洗涤该孔以去除未结合的FGF-23和其他组分。

在第二个反应中，将这种固定的FGF-23与HRP标记的抗体一起温育以形成“三明治”复合物：抗FGF-23抗体 - N端FGF-23C端-HRP标记的抗FGF-23抗体。在该反应结束时，洗涤该孔以除去未结合的组分。

在酶反应中，将固定在孔上的夹心复合物与底物溶液一起孵育，然后用分光光度微量滴定板读数器测量。与孔结合的复合物的酶活性与样品中FGF-23的量成正比。通过绘制吸光度与FGF-23标准品各浓度的关系绘制标准曲线。从该曲线确定样品中FGF-23的浓度。

 

 

艾美捷FGF-23 ELISA试剂盒/HumanFGF-23 ELISA Kit：

中文名称：FGF-23 ELISA试剂盒(Kainos CY-4000)

英文名称：HumanFGF-23ELISAKit

品牌：Kainos Laboratories

货号：CY-4000

规格：96T

反应种属：Human

样本类型：Serum

 

FGF-23 ELISA试剂盒/Human FGF-23 ELISA Kit组成：

1）FGF-23抗体包被微孔板（FGF-23板）

用抗FGF-23的鼠单克隆抗体包被微孔板96孔微孔板。

2）HRP标记的FGF-23抗体（FGF-23缀合物）

12mL与辣根过氧化物酶缀合的FGF-23的鼠单克隆抗体与防腐剂混合。该试剂应储存在2-10℃并避光。

3）FGF-23校准液（STD1～std7）

用防腐剂缓冲FGF-23的FGF-23标准品（Std1-Std7）12mL（Std1）和0.5mL（Std2-Std7）。7瓶含有防腐剂的缓冲碱的FGF-23。

4）测定稀释剂（AssayDiluent）

12mL缓冲液。

5）显色剂（底物）

12mL四甲基联苯胺TMBZ）与过氧化氢脲。

6）FGF-23清洗缓冲液（10倍浓缩）

53毫升缓冲表面活性剂与防腐剂的10倍浓缩溶液。使用前，用去离子水将内容物稀释至10倍并充分混合。

7）终止液（终止液）

12mL0.5mol/L硫酸。

8）封板器

试剂盒中包含密封板三。

注：这些试剂应在黑暗中储存在2-10℃。使用前将所有试剂置于室温下。

 

使用注意事项：

1）测试样品的储存条件是什么？

使用鲜的血清样本。如果您无法立即测试您的样品，请将其存放在-70°C以下。避免解冻/重新冷却循环。

在我们的实验室测试中，在冰箱中13天后，给定样品的活性降至86.6％。样品在-80°C下可保持稳定约三年，但在-20°C时稳定性不能得到保证。

我们已确认zui多六次解冻/再次冻结循环可能不会影响活动，但我们建议小批量冻结样本，以尽量缩短解冻/再次冻结周期。

2）试剂盒检测的样本

虽然血浆和血清都可以使用FGF-23 ELISA试剂盒进行检测，但建议使用血清。

3）试剂盒是否可以测试动物样本？

FGF-23ELISA试剂盒可用于测量小鼠，大鼠或猴血FGF-23水平。

4）试剂盒是否含有任何汞基防腐剂？

FGF-23 ELISA试剂盒不使用水银防腐剂，如硫柳汞。标准溶液，稀释溶液，酶标抗体溶液和浓缩洗涤溶液使用Kathon TM CG作为防腐剂。

5）操作预防措施

校准曲线必须为每次测试准备。

如果测试多个样品，则反应时间必须保持一致。

搅拌板时必须进行一级反应。搅拌前应密封盘子。

洗涤周期中必须遵守以下预防措施：

不要将洗版溶液留在其中。

一旦从井中充分移除洗涤液，立即进入下一步。

 

试剂使用方法：

1）在支架上准备足够数量的抗体涂层带。

2）向孔中加入50μL检测稀释剂。

3）向每个孔中加入50μLFGF-23标准品或样品，并用平板密封器盖住平板。

4）在板式混合器上在室温下孵育平板2小时。

5）拆卸封板器。吸取每孔中的样品。用300μL工作洗涤缓冲液洗涤每个孔4次，并完全吸出内容物。

6）向每个孔中加入100μL的FGF-23结合物并用封板器覆盖该板。

7）在平板混合器上在室温下孵育平板1小时。

8）拆卸封板器。吸取每孔中的样品。每孔用300μL工作洗涤缓冲液洗涤4次，并将其完全吸出。

9）向每个孔中加入100μL底物，并用平板封口机和铝箔覆盖平板。

10）在室温下孵育板30分钟。

11）去除封口机和铝箔。立即加入100μL终止液到每个孔。在平板混合器上摇动板1分钟。

12）用微量滴定板读数器在10分钟内读取450nm处的吸光度。