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Hypoxyprobe-CY 7 Kit的使用及应用指南

发布人:武汉艾美捷科技有限公司

发布日期:2024/10/22 16:21:43

固体盐酸吡莫硝唑(低氧探针™-1)CY 7染料偶联大鼠IgG1单克隆抗吡嘧达唑抗体方案:

 

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艾美捷Hypoxyprobe-CY 7 Kit

货号:HPB-HP14-100Kit

应用:用于免疫化学检测细胞和组织的缺氧,包括免疫荧光、免疫过氧化物酶或流式细胞术。Hypoxyprobe™-1 CY 7试剂盒在甲醛固定的石蜡包埋的大鼠肿瘤组织中提供了强烈的免疫染色和非常低的背景。

数量:a. Hypoxyprobe™-1 CY 7试剂盒包含100毫克、200毫克或1000毫克的Hypoxyprobe™-1(匹莫尼达唑盐酸盐)。通常,动物研究中使用的剂量为每公斤体重60毫克。

b. 一个瓶(100毫克和200毫克试剂盒)或两个瓶(1000毫克试剂盒),含有200微升的稀释的CY 7染料偶联的IgG1大鼠单克隆抗匹莫尼达唑抗体(克隆11.23.22.R)。每个瓶含有200微升的0.50毫克/毫升的CY 7染料-MAb1溶液,该溶液在含有1%牛血清白蛋白和0.09%叠氮钠的PBS中。CY 7染料-MAb1的最佳稀释度应由研究者确定,但发现1:50-100稀释度在大鼠肿瘤组织中能给出强烈的免疫荧光染色。特别为免疫荧光设计,CY 7染料-MAb1可以在荧光显微镜下或在流式细胞术和Western印迹应用中被可视化。通常免疫荧光的抗体稀释度比免疫过氧化物酶检测系统中使用的要低。

不提供:用于免疫组织化学分析的标准试剂。

储存:a. 将Hypoxyprobe™-1固体存放在室温下避光处。(也可以存放在2-8摄氏度的暗处)。

b. 将CY 7染料-MAb存放在2-8摄氏度的暗处。不要冷冻。

 

Pimonidazole HCl的制备方法:

Pimonidazole HCl(盐酸匹莫硝唑)是一种水溶性化合物,通常以粉末形式存在。在实验室中,Pimonidazole HCl可以通过以下步骤制备工作溶液:

1. 溶解:将Pimonidazole HCl溶解在生理盐水或PBS中,推荐的浓度为116 mg/mL(即400毫摩尔)。可以使用超声波助溶来提高溶解度。

2. 储存:溶解后的Pimonidazole HCl应在避光条件下储存,最佳温度为2-8°C,避免冷冻以防止降解。

 

使用指南与注意事项:

1. 给药方式:Pimonidazole HCl通常通过静脉注射、腹腔注射或口服摄入的方式给药。推荐剂量为每公斤体重60 mg。例如,对于一只25克的小鼠,剂量为1.5 mg。

2. 组织收获:在给药后15至90分钟内收获感兴趣的组织。此时,Pimonidazole HCl会在缺氧细胞中形成稳定的加合物。

3. 免疫检测:使用特异性抗体检测Pimonidazole HCl的加合物,可以通过免疫荧光、免疫组化或Western blotting等方法进行。

注意事项

Pimonidazole HCl在体内的血浆半衰期约为25分钟,使用时需考虑这一点以确保有效性。

在使用过程中,需遵循适当的安全措施,避免与皮肤和眼睛接触。

 

Hypoxyprobe™-1 CY 7 Kit的储存:

Hypoxyprobe™-1固体:在室温下避光保存,或在2-8°C的条件下避光保存。

CY 7染料-MAb:在2-8°C的条件下避光保存,切勿冷冻。

 

https://www.amyjet.com/products/HPB-HP14-100Kit.shtml

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