武汉艾美捷科技有限公司

糖胺聚糖（GAGs）是存在于大多数结缔组织和细胞外基质（ECM）中的带负电荷多糖，也存在于许多细胞类型的表面。糖胺聚糖由重复的核心二糖单元组成，分为四种类型：肝素/肝素硫酸、软骨素/皮肤糖硫酸、角质素硫酸和非硫酸化的透明质酸。ECM中的硫酸化GAG通常以蛋白聚糖的形式存在，蛋白聚糖由多个糖胺聚糖链连接到核心蛋白上。在高度有序的细胞外基质中，关节软骨由II型胶原蛋白、透明质酸、连接蛋白和富含软骨素硫酸的蛋白聚糖组成，这些成分提供了必要的渗透抵抗力，使软骨能够抵御压缩负荷。

除了II型胶原蛋白外，GAG还被认为是类风湿关节炎（RA）的自身抗原，因为与ECM降解相关的抗GAG抗体存在于RA患者的血清中。尽管蛋白聚糖在RA中的作用仍不明确，但研究表明，用含GAG的蛋白聚糖免疫小鼠可以诱导关节炎。类似地，在骨关节炎（OA）中，ECM的丧失是第一个可观察到的变化，因此，确定GAG水平可能是疾病进展的有用标志。此外，为了成功使用人工软骨治疗OA，必须分析II型胶原蛋白和GAG的含量，以确保软骨质量。

Chondrex 提供了一款硫酸化GAG检测试剂盒（编号：6022），该试剂盒使用阳离子染料1,9-二甲基亚甲蓝（DMB），能够与高电荷的硫酸化GAG结合，但不包括透明质酸。该试剂盒采用改进的DMB溶液，减少了与DNA和RNA等带负电荷污染物的干扰，并使用软骨素硫酸作为软骨中ECM分析的标准。此外，为了分析软骨中与GAG共存的胶原蛋白，Chondrex 提供多种类型和物种特异性的胶原蛋白检测试剂盒以及总胶原蛋白检测试剂盒。

艾美捷糖胺聚糖检测试剂盒：

货号：6022

格式：96孔ELISA板，带可拆卸条。

检测类型：比色法检测。

检测时间：5分钟。

标准范围：50 ug/ml到3.1 ug/ml。

样本数量：

不含额外蛋白质的样本：每板最多可处理42个（重复）样本。

含额外蛋白质的样本：每板最多可处理21个（重复）样本。

样本类型：组织匀浆。

推荐样本稀释：各样本稀释情况不同。

着色剂：不适用（在525 nm读取）。

存储：-20°C可保存12个月。

验证数据：组内重复（1.7-7.6%）/组间重复（5.2-8%）/加标测试（106-117%）。

注释：此检测使用五点标准曲线，样本需在检测前进行溶解。

糖胺聚糖检测试剂盒结果计算：

计算空白（B）、标准品、测试样本和样本空白（如果使用）重复OD值的平均值。

从标准品和测试样本的平均OD值中减去平均的空白OD值。

注意： 如果使用了样本空白，则从第1步中对应测试样本的平均OD值中减去平均“样本空白”（SB）OD值。

将标准品的OD值与硫酸软骨素浓度（ug/ml）绘制成图。使用对数-对数图将数据线性化。图1展示了标准范围为3.1 - 50 ug/ml的代表性实验。

可以使用回归分析计算测试样本中的硫酸软骨素浓度。将其乘以样本稀释因子，以获得原始样本中的硫酸软骨素浓度（ug/ml）。

糖胺聚糖检测试剂盒文献参考：

Gosztyla C et al., A Comparison of Sterilization Techniques for Production of Decellularized Intestine in Mice. Tissue Engineering 26(2):67-79, (2020). PMID: 31802699

Lv J et al., Human cardiac extracellular matrix chitosan gelatin composite scaffold and its endothelialization. Experimental and Therapeutic Medicine 19, 1225-1234 (2020). PMID: 32010293

Maier F, Lewis CG, Pierce DM, The evolving large-strain shear responses of progressively osteoarthritic human cartilage. Osteoarthritis Cartilage 27(5):810-822, (2019). PMID: 30660720

https://www.amyjet.com/products/Chondrex-6022.shtml