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发布人:上海麦克林生化科技股份有限公司
发布日期:2024/2/23 17:07:18
亚磷酰胺化学是在20世纪80年代开发的,后来用固相支持和自动化增强,是目前实验室合成短片段寡核苷酸序列时最常采用的方法。其合成过程主要包括脱保护反应、活化及偶联反应、加帽反应以及氧化反应四个步骤。
麦克林提供各类亚磷酰胺单体试剂及其衍生产品,具有纯度等级高、生产工艺先进、支持研发定制等特点,能被广泛适用于各类科研项目、研究实验中,欢迎选购。
本文通过以下几点简单介绍麦克林亚磷酰胺试剂的产品特性及相关应用:
1、亚磷酰胺法机理
2、亚磷酰胺法的优点
3、麦克林亚磷酰胺单体试剂及其相关产品介绍
亚磷酰胺法机理
注意:以下介绍的是DNA合成(虽然与TNA, RNA的化学合成类似,但存在差异)。
DNA的合成是重复循环这四个反应的过程:
1、亚磷酰胺单体上的-DMT保护基团在酸处理下被去除,使具有反应活性的5’-OH裸露,反应结束后洗去多余的酸。
2、向体系中加入新的亚磷酰胺单体以及活化试剂四唑,四唑与亚磷酰胺单体的三价磷反应,形成一个反应活性较高的中间体。
3、裸露的5’-OH能进攻中间体的三价磷,从而完成两个核苷酸的偶联。然后,没有发生反应的5’-OH通过乙酰化反应加上一个帽子,以避免在后续循环中继续反应。
4、使用氧化试剂将不稳定的三价磷氧化为五价磷,完成一个循环。
5、.新加入的亚磷酰胺单体上的DMT基团成为下一次循环的反应位点。
DNA固相亚磷酰胺合成示意图
亚磷酰胺法的优点
亚磷酰胺法由于偶联效率高、反应周期快且反应原料和中间产物比较稳定的特点,使其广泛应用于核酸合成领域。亚磷酰胺法可以再溶液或固相上合成核酸。现在,大多数的合成的反应实在不溶的固相载体如二氧化硅衍生的可控孔玻璃(CPG)或高度交联的聚苯乙烯上进行的,具有操作简单和产物分离简单的优点。
亚磷酰胺法以其独特的特性,发展成为固相合成寡核苷酸的主要方法。固相合成通常指连接在固相载体上的活性基团与亚磷酰胺单体的偶联反应,合成完毕后,整条链从固相载体上切下并纯化。随着DNA合成技术的发展,人们使用仪器实现了核酸的全自动合成,任意所需DNA片段都可以简便、快速、高效地合成,这为研究核酸和生命科学提供了巨大的便利。
以下为TNA, RNA固相亚磷酰胺合成示意图:
TNA固相亚磷酰胺合成示意图
RNA固相亚磷酰胺合成示意图
麦克林亚磷酰胺单体试剂产品介绍
麦克林亚磷酰胺单体试剂产品优势:
1、结构新颖、品种繁多
2、纯度等级高
3、生产工艺先进
4、接受研发定制
麦克林是亚磷酰胺单体试剂产品大规模生产商
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