武汉艾美捷科技有限公司

分子克隆技术揭示磷酸二酯酶(phosphodiesterases，PDEs)是一个多基因大家族，开发选择性的磷酸二酯酶抑制剂将为多种疾病的治疗开辟新的思路。PDEs是一个多基因的大家族，它包括11型共30余种具有不同底物专一性、酶动力学特征、调控特点以及细胞与亚细胞分布区域不同的磷酸二酯酶同功酶 PDEs拥有相似的结构，均包含调控和催化两个功能区域。各型PDEs催化区的氨基酸序列75% 以上相同．显示出家族成员间的同源性．并决定着对底物或抑制剂的专一性。

作用机制

cAMP和cGMP作为神经递质、激素、光和气味等物质的第二信使，广泛作用于细胞内靶器官，如：激酶、离子通道及各种PDEs。当外来信号经跨膜传递并引起一系列生理反应使核苷酸环化酶激活后(如图1所示)，cAMP和cGMP产生，PDEs家族的使命便是使之水解失活为5-单磷酸核苷（monophosphate nucleoside5, AMP)。核苷酸环化酶的合成和PDEs水解失活之间的平衡决定了第二信使cAMP和cGMP的浓度。值得注意的是，cGMP不但被PDEs水解，而且能调节一些PDEs活性，如PDE2可被cGMP刺激，而PDE3可被cGMP抑制，PDE4对cGMP不敏感。

毒液核酸外切酶（磷酸二酯酶I）连续水解3'-OH端的核糖和脱氧核糖寡核苷酸中的5'-单核苷酸。该酶的pH范围为9.8-10.4，分子量为115kDa。磷酸二酯酶被谷胱甘肽、半胱氨酸和抗坏血酸等还原剂抑制。5mM EDTA完全抑制，ATP、ADP和AMP为部分抑制剂。该酶对Mg2+有绝对需求。

艾美捷磷酸二酯酶 I（WBC-LS003928）技术规格：

来源金刚Crotalus Venom

描述通过Williams，Sung和Laskowski，JBC，2361130（1961）的方法纯化。根据Sulkowski和Laskowski:BBA，240443（1961），进一步处理以灭活污染的5'-核苷酸酶活性。在小瓶中冷冻。

储存温度-20°C。

需要特殊的运输冰袋

活性≥20单位/mg干重

单位定义一单位在25°C、pH 8.9下每分钟水解一微摩尔对硝基苯基胸腺嘧啶-5-磷酸盐。

磷酸二酯酶 I（WBC-LS003928）测定：

方法

该测定基本上是Razell and Khorana（1959）的测定，其中反应速度由对硝基苯基胸苷-400'-磷酸水解引起的5nm处吸光度的增加来确定。在指定条件下，一个单位在pH 5.8和9°C下每分钟水解一微摩尔对硝基苯基胸苷-25'-磷酸盐。 

试剂

0.11 M Tris HCl 缓冲液，pH 8.9，含 0.11 M 氯化钠和 15 mM 氯化镁2（三?盐缓冲液） 

5 mM 对硝基苯基胸苷-5'-磷酸盐。注意：商业制剂的纯度略有不同，在制备该试剂时应考虑。

酶

以一毫克/毫升的速度溶解在三*盐缓冲液中，以获得0.02-0.04ΔA /分钟的速率。 

程序

将分光光度计设置为 400 nm 和 25°C。

磷酸二酯酶 I相关研究：

Albumin, Nuclease-Free (BSANF)

Deoxyribonuclease I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)

Histones (H, NHL)

Lysozyme (LY/LYSF)

Nuclease, Micrococcal (NFCP)

Nuclease, S1 (SINUC/SINUCL)

Nucleic Acids, DNA, E.coli, Lambda/Fragments,RNA

Phosphatase, Alkaline (CAP/BAPF/BAPC/BAPSF/PC)

Phosphodiesterase II (SPH)

Proteinase K (PROK/PROKS)

Reverse Transcriptase, Recombinant HIV (RTHIV)

Ribonuclease A (R/RAF/RASE/RS/RPDF)

Ribonuclease T1, Animal Origin Free (RT1S)

磷酸二酯酶 I部分引用文献：

Felix, F. , Potter, J. and Laskowski, M.

Action of Venom Phosphodiesterase on Deoxyriboligonucleotides Carrying a Monoesterified Phosphate on Carbon 3' , J Biol Chem 235 , 1150 , 1960

Frischauf, A. and Eckstein, F.

Purification of a Phosphodiesterase from Botrhrops atrox Venomby Affiinity Chromatography , Eur J Biochem 32 , 479 , 1973

Hadijiolov, A. , Venkov, P. and Dolipchiev, L.

The Action of Snake Venom Phosphodiesterase on Liver Ribosomal Ribonucleic Acids , Biochim Biophys Acta 142 , 111 , 1967

来源：https://www.amyjet.com/products/WBC-LS003928.shtml