武汉艾美捷科技有限公司

由艾美捷代理abm提供的人肥大细胞系LAD2（目录号T8157）来源于一名44岁男性肥大细胞增生症患者的骨髓抽取物，具备释放组胺（脱颗粒）的能力。该细胞系呈现人肥大细胞的超微结构特征，表达FcεRI及CD4、CD9、CD13、CD14、CD22、CD31、CD32、CD45、CD64、CD71、CD103、CD117、CD132、CXCR4（CD184）、CCR5（CD195）等多种标志物，胞内含有组胺、类胰蛋白酶和糜蛋白酶。值得注意的是，LAD2细胞不携带c-kit基因816位密码子的激活突变。与LAD1类似，LAD2细胞在FcεRI或FcγRI聚集时可释放β-氨基己糖苷酶。

LAD2细胞系为研究人肥大细胞生物学提供了独特机会，已成为过敏与肥大细胞增生症研究领域应用最广泛、公认的金标准肥大细胞系，同时也是药物开发的重要工具。

培养条件

推荐使用PriGrow X系列培养基（TM8157），添加100 ng/ml人干细胞因子（Z100815）、2 mM L-谷氨酰胺（G275）及1%青霉素/链霉素溶液（G255），于37.0°C、5% CO₂条件下培养。每周更换一半培养基为等体积新鲜培养基，细胞密度不得超过1×10⁶ cells/ml，避免过度汇合。接种密度为500,000–800,000 cells/ml。

注意事项

复苏后前两周观察到细胞死亡属正常现象，应在推荐条件下让细胞恢复。该细胞生长缓慢，且对支原体污染极为敏感，需定期检测。细胞可能因连续培养而丧失功能，应每2个月进行脱颗粒实验检测功能。为获得最佳脱颗粒效果，取100万个LAD2细胞在无hSCF培养基中培养4小时后致敏，使用人IgE（Y70000）致敏，再通过IgE交联（Y79000）刺激脱颗粒，随后进行肥大细胞脱颗粒实验（G7800）。

储存与复苏

冻存细胞应立即转移至低于-130°C环境，优选液氮气相储存，切勿存于-70°C以免丧失活力。建议使用无血清CryoGuard™冻存液（TM078）。产品以冻存形式提供，生物安全等级为II级，仅供实验室研究使用。

文献参考

Kirshenbaum, A. S., Akin, C., Wu, Y., Rottem, M., Goff, J. P., Beaven, M. A., ... & Metcalfe, D. D. (2003). Characterization of novel stem cell factor responsive human mast cell lines LAD 1 and 2 established from a patient with mast cell sarcoma/leukemia; activation following aggregation of FcεRI or FcγRI. Leukemia research, 27(8), 677-682.

Kirshenbaum, A. S., Yin, Y., Sundstrom, J. B., Bandara, G., & Metcalfe, D. D. (2019). Description and Characterization of a Novel Human Mast Cell Line for Scientific Study. International journal of molecular sciences, 20(22), 5520.