武汉艾美捷科技有限公司

一、产品定位与核心用途

由艾美捷代理Epigentek推出的MethylFlash 甲基化DNA定量试剂盒（荧光法）（货号 P-1035）是一款用于DNA甲基化研究领域的即用型荧光检测试剂盒，核心功能是通过微孔板格式，特异性测定全球DNA甲基化水平，即5-甲基胞嘧啶（5-mC）的含量。该试剂盒以DNA为输入样本，适用于绝对定量与相对甲基化状态计算，采用96孔板格式，可在4小时内完成全部实验流程，兼容手动与高通量分析。

二、技术背景与检测原理

与LUMA、LINE-1、Alu及LTR等基于重复序列的间接评估方法相比，MethylFlash技术直接定量实际的全球DNA甲基化水平，结果更具代表性。该试剂盒还可与MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒（荧光法）配对使用，实现甲基化DNA与羟甲基化DNA的同步定量。

检测原理为：DNA结合于经特殊处理、具有高DNA亲和力的条孔中，甲基化DNA片段被捕获抗体和检测抗体识别，随后通过荧光读数在530 nm激发、590 nm发射波长下进行定量。甲基化DNA的量与相对荧光单位（RFU）成正比，用户可依据试剂盒提供的公式计算两个样本的相对甲基化状态，或通过标准曲线对5-mC进行绝对定量。

三、关键性能优势

1. 直接定量全球甲基化：相比LUMA或LINE-1等间接方法，本试剂盒直接测定实际5-mC水平，数据更真实可靠。

2. 超高灵敏度：检测下限低至50 pg甲基化DNA，可接受低至20 ng的基因组DNA输入，灵敏度显著优于比色法版本。

3. 高特异性：优化的抗体与增强液体系可特异性识别5-mC，不与未甲基化胞嘧啶发生交叉反应，在样本DNA浓度范围内对羟甲基胞嘧啶的交叉反应可忽略。

4. 极低背景：创新的试剂盒组分使背景信号极低，省去了传统方法中的平板干燥与封闭步骤，操作更简便、结果更稳定。

5. 快速灵活：全程4小时内完成，条孔式微孔板设计支持手动或高通量分析。

6. 通用对照：包含通用阳性与阴性对照，适用于哺乳动物、植物、真菌、细菌及病毒等任何物种的甲基化DNA定量。

7. 安全经济：无需DNA消化/变性、放射性、提取或色谱步骤，相比HPLC或质谱法更具成本效益。

四、应用场景

该试剂盒适用于全球DNA甲基化水平检测、表观遗传学研究、疾病相关甲基化标志物筛选、药物处理后的甲基化变化评估以及跨物种甲基化比较分析。其与羟甲基化定量试剂盒的配对设计，尤其适合需要同时评估两种修饰的研究场景。对于样本量有限或甲基化水平较低的研究，荧光法的高灵敏度优势尤为突出。

五、总结

MethylFlash 甲基化DNA定量试剂盒（荧光法）以直接定量、超高灵敏度、高特异性和极低背景为核心优势，为全球DNA甲基化研究提供了快速、安全且经济的解决方案。其50 pg的检测下限与20 ng的低输入量要求，使其特别适合珍贵样本或低丰度甲基化研究，是表观遗传学实验室中值得优先考虑的工具。

六、文献参考

de Azevedo Filho ER et. al. (November 2025). Unraveling the intertwined threads of insomnia and sarcopenia in cognitive and functional impairment in octogenarians. BMC Geriatr. 25(1):868.

Bisschop K et. al. (November 2025). Host-microbiota matching and epigenetic modulation drive Daphnia magna responses to cyanobacterial stress. ISME J.

Zhang M et. al. (September 2025). Overexpression of DRM2 Increases Resistance to Botrytis cinerea by Modulating JA Signalling Pathway in Tomato. Plant Cell Environ.

Betlej G et. al. (December 2024). The In Vitro Enhancement of Retinal Cell Viability via m6A and m5C RNA Methylation-Mediated Changes in the Levels of Heme Oxygenase (HO-1) and DNA Damage Repair Molecules Using a 50 Hz Sinusoidal Electromagnetic Field (EMF). Int J Mol Sci. 25(24)

Nair AR et. al. (December 2024). Differentially Expressed Genes (DEGs) in Umbelliferone (UMB) Producing Endophytic Fusarium oxysporum (ZzEF8) Following Epigenetic Modification. J Basic Microbiol. :e2400582.