武汉艾美捷科技有限公司

一、产品背景

5-羟甲基胞嘧啶作为第六种DNA碱基，在转录调控中发挥功能，已被检测到在人和小鼠大脑及胚胎干细胞（ES细胞）中含量丰富。在哺乳动物中，它可由5-甲基胞嘧啶氧化生成，该反应由十-十一易位（TET）家族胞嘧啶加氧酶介导。

TET家族胞嘧啶加氧酶包括TET1、TET2和TET3。这些TET蛋白可能通过结合富含CpG的区域以阻止不需要的DNA甲基转移酶活性，并通过羟化酶活性将5mC转化为5hmC并进一步转化为5caC（5-羧基胞嘧啶），从而促进DNA去甲基化。研究表明，基因组5hmC水平与TET羟化酶活性相关。此外，TET1在ES细胞中通过结合不同靶基因，表现出转录激活和抑制的双重功能。TET1也是急性髓系白血病中MLL基因的融合伙伴，被认为是一种癌蛋白。TET2被发现频繁突变于白血病中，被认为作为肿瘤抑制因子发挥作用。TET3被证明在哺乳动物受精卵的DNA甲基化重编程过程中发挥独特作用。因此，激活肿瘤抑制因子TET酶（如TET2）或抑制癌蛋白TET酶（如TET1），对于改善癌症诊断和开发新的靶向癌症治疗具有重要意义。

二、产品概述

由艾美捷代理Epigentek推出的Epigenase™ 5mC-羟化酶TET活性/抑制检测试剂盒（比色法）（货号：P-3086）是一套完整的优化缓冲液和试剂组合，用于测量来自广泛物种（如哺乳动物、植物、真菌和细菌）的核提取物或纯化TET同工酶（TET1-3）中总胞嘧啶加氧酶TET酶的活性/抑制，适用于多种形式样本，包括但不限于培养细胞及新鲜和冷冻组织。该试剂盒具有以下优势与特点：

快速简便——5小时比色法流程，步骤易于遵循，兼顾便捷与速度，整个流程可在5小时内完成。

直接检测——通过直接检测TET转化的羟甲基化产物，直接测量TET羟化酶活性。

低本底——创新的试剂盒组分使背景信号极低，检测简单、准确、可靠且一致。

灵活样本——可使用细胞/组织提取物或纯化TET蛋白，从而可在体内和体外检测TET羟化酶抑制剂的抑制效果。

高灵敏度——新颖的检测原理实现高灵敏度，可检测低至20 ng纯化TET1羟化酶的活性。

定量标准——包含羟甲基化标准品，可定量TET羟化酶的比活性。

灵活格式——条孔微板格式使检测适用于手动或高通量分析（96次检测）。

三、原理与操作流程

在本次检测中，甲基化底物稳定包被于微板孔中。活性TET酶（未包含在试剂盒中）与底物结合，将甲基化底物转化为羟甲基化产物。TET转化的羟甲基化产物可被特异性抗体识别。羟甲基化产物的比例或量（与酶活性成正比）可通过微板分光光度计在450 nm波长下读取吸光度进行比色测量。TET酶的活性又与所测光密度强度成正比。

四、文献参考

Deme P et. al. (January 2026). Aging kidney is associated with metabolic rewiring and epigenetic reprogramming. Geroscience.

Morresi C et. al. (December 2025). Effects of Methylglyoxal on Intestinal Cells: Insights on Epigenetic Regulatory Enzymes. IUBMB Life. 77(12):e70067.

Krepelova A et. al. (November 2025). Iron homeostasis and cell clonality drive cancer-associated intestinal DNA methylation drift in aging. Nat Aging.

Rong K et. al. (June 2025). Inflammatory macrophage-derived itaconate inhibits DNA demethylase TET2 to prevent excessive osteoclast activation in rheumatoid arthritis. Bone Res. 13(1):60.

He X et. al. (April 2025). Lysine vitcylation is a vitamin C-derived protein modification that enhances STAT1-mediated immune response. Cell. 188(7):1858-1877.e21.