武汉艾美捷科技有限公司

一、产品背景

N6-甲基腺嘌呤（m6A）是真核生物RNA分子上最常见且丰度最高的修饰。DNA m6A同样已在多细胞真核生物中被鉴定，包括秀丽隐杆线虫和黑腹果蝇，并在包括植物、小鼠和人类细胞在内的更高等真核生物中得到确认。m6A在调控DNA复制、转座、转录和细胞防御中发挥关键作用。在人类中，DNA m6A修饰最可能由甲基转移酶复合物METTL3催化，并由α-酮戊二酸（α-KG）和Fe²⁺依赖性双加氧酶（如ALKBH5和TET样酶）去除。研究表明，METTL3和α-KG/Fe²⁺依赖性双加氧酶在从发育、代谢到生育力等许多生物学过程中发挥重要作用。DNA上动态且可逆的化学m6A修饰也可能作为一种具有深远生物学意义的新型表观遗传标记。m6A修饰的下调首次在人类癌细胞和组织中相对于正常对照被表征。研究发现，m6A是癌症中受调控最多的DNA修饰。除癌细胞中的调控外，相对于含有相当低量DNA m6A（<0.001%）的原代细胞/组织，体外培养的人类细胞中m6A修饰增加了数百倍（0.03%-0.22%）。因此，鉴定DNA m6A甲基化水平及其在DNA上的分布，可促进在基因组水平上理解生物过程的表观遗传调控，并进一步为改善疾病的诊断和治疗提供有用信息。

二、产品概述

由艾美捷代理Epigentek推出的MethylFlash™ m6A DNA甲基化ELISA试剂盒（比色法）（货号：P-9010）是一套完整的优化缓冲液和试剂组合，用于比色定量DNA中的N6-甲基腺嘌呤（m6A或6mA）。该试剂盒适用于直接检测从任何物种（如哺乳动物、植物、真菌、细菌和病毒）提取的DNA中的m6A甲基化状态。该试剂盒具有以下优势与特点：

操作简便——比色法步骤易于遵循，兼顾便捷与速度，整个流程可在3小时45分钟内完成。

高灵敏度——检测限可低至5 pg m6A。

独特结合液——独特的结合液使大于100 nts的DNA紧密结合至孔中，从而可定量完整DNA或片段化DNA（如ChIPed DNA）中的m6A。

高特异性——优化的抗体和增强液对m6A具有高特异性，在样本DNA浓度范围内与未甲基化腺苷无交叉反应。

通用对照——包含通用阳性和阴性对照，适用于任何物种的m6A定量。

灵活格式——条孔微板格式使检测适用于手动或高通量分析。

稳定可靠——检测条件简单、可靠且一致。

三、原理与操作流程

本试剂盒包含DNA中m6A定量所需的全部试剂。在检测中，DNA使用DNA高结合液结合至条孔中。m6A通过捕获抗体和检测抗体进行检测，检测信号经增强后，通过微板分光光度计读取吸光度进行比色定量。m6A的量与所测OD强度成正比。

四、起始材料

起始材料可包括各种组织或细胞样本，如培养瓶或微板培养的细胞、新鲜和冷冻组织、石蜡包埋组织、血液、体液样本等。

五、文献参考

Espi-Bastien D et. al. (July 2026). Circulating epigenetic and epitranscriptomic biomarkers identify EGFR status, predict TKI response and reveal therapeutic vulnerabilities in NSCLC. Sci Rep. PubMed: 42477403

Bernardino JI et. al. (October 2025). DNA N6-methyladenine and ABCA1 methylation associations with subclinical coronary atherosclerosis in people with HIV. Clin Epigenetics. 17(1):158.

Kalinka A et. al. (July 2025). Distribution patterns of N6-methyladenine in the rye genome. Sci Rep. 15(1):26066.

Li S et. al. (May 2025). METTL3 inhibits primed-to-naïve transition of pluripotent stem cells through m6A-YTHDF2-pluripotency/Gstp1 mRNA degradation axis. Cell Regen. 14(1):19.

Wang Y et. al. (April 2025). The Role of N6-Methyladenosine (m6A) RNA Modification in the Pathogenesis of Parkinson's Disease. Biomolecules. 15(5)