武汉艾美捷科技有限公司

一、产品背景

蛋白质-DNA相互作用在信号转导、基因转录、染色体分离、DNA复制与重组以及表观遗传沉默等细胞功能中发挥关键作用。识别DNA结合蛋白的遗传靶标并了解蛋白质-DNA相互作用机制，对于理解细胞过程至关重要。染色质免疫沉淀（ChIP）是研究蛋白质-DNA相互作用的有利工具。与EMASA、DNA微阵列和报告基因检测等分析体外蛋白质与DNA直接相互作用的方法不同，ChIP可检测活细胞中特定蛋白质是否与基因的特定序列结合。

二、产品概述

由艾美捷代理Epigentek推出的EpiQuik™ 染色质免疫沉淀（ChIP）试剂盒（货号：P-2002）是一套完整的优化试剂组合，可通过便捷的微板格式进行染色质免疫沉淀（ChIP）。该试剂盒即开即用，提供成功完成ChIP实验所需的全部必需组分。EpiQuik™ ChIP试剂盒适用于将免疫沉淀的特异性与定性/定量PCR、ChIP-Seq和ChIP-on-chip相结合。该试剂盒具有以下优势：

快速简便——基于微板的操作流程，可在5小时内完成。

灵活格式——条孔微板格式使检测灵活：可手动或高通量操作。

内置纯化柱——包含DNA纯化柱，节省大量时间并减少不必要的体力劳动。

广泛兼容——兼容所有基于DNA扩增的方法。

稳定可靠——实现非常可靠且一致的检测条件。

三、原理与操作流程

本ChIP试剂盒包含阳性对照抗体（RNA聚合酶II）、阴性对照正常小鼠IgG，以及GAPDH引物，可用作阳性对照以证明试剂盒试剂和方案的有效性。RNA聚合酶II被认为富集于GAPDH基因启动子，该启动子在大多数生长中的哺乳动物细胞中预期正在进行转录，可被RNA聚合酶II免疫沉淀，但不被正常小鼠IgG沉淀。在该ChIP中，细胞用甲醛交联并提取染色质。随后将染色质剪切并加入固定有亲和抗体的微孔中。交联DNA从抗体捕获的蛋白质-DNA复合物中释放，经逆转和纯化通过专门设计的F-Spin柱。洗脱的DNA可用于各种下游应用。

四、起始材料

起始材料可包括各种细胞样本。通常，每个反应的输入量应为500,000至2,000,000个细胞。