高产 RNA 合成试剂盒(≥2000nt)| High Yield RNA Synthesis Kit(≥2000nt)

发布人：武汉瀚海新酶生物科技有限公司

发布日期:2023/1/18 10:50:18

产品概述:T7 RNA聚合酶是一种来源于T7噬菌体的一种依赖于DNA的RNA聚合酶，具有DNA聚合酶活性和较强的3´→5´核酸外切酶活性。T7 RNA聚合酶对T7启动子具有较高的特异性，能够以T7启动子下游序列为模板合成大量的RNA。

运输与保存方法:≤0℃运输；-25～-15℃保存。

单位定义：在标准反应体系下，37℃1 h内将1 nmol的ATP掺入酸性不溶物所需要的酶量定义为一个活性单位（U）。

质量控制

核酸内切酶残留检测：50μL反应体系中加入50 U本酶和1μgλDNA在37℃下孵育16 h，琼脂糖凝胶电泳DNA谱带不发生变化。

核酸外切酶残留检测：50μL反应体系中加入50 U本酶1μgλ-Hind III digestDNA在37℃下孵育16 h，琼脂糖凝胶电泳DNA谱带不发生变化。

RNase残留检测：40μL反应体系中加入40 U本酶和1μg MS2 RNA在37℃下孵育2 h，琼脂糖凝胶电泳RNA谱带不发生变化。

DNase残留检测：40μL反应体系中加入40 U本酶和4μg pUC19 DNA在37℃下孵育16 h，琼脂糖凝胶电泳DNA谱带不发生变化。

热失活：75℃，20 min。

反应终止：加入2μL 0.2 M EDTA(pH8.0 25℃)或者75°C加热20 min。

DNA模板去除：可用DNase I(2U)37℃处理15 min。

反应抑制剂：金属离子螯合剂、NaCl和KCl，该酶对高浓度NaCl或KCl不耐受，当其浓度超过150 mM时，活性受到显著抑制（活性约降低50%）。