iFluor 860 琥珀酰亚胺酯，iFluor 860 succinimidyl ester，iFluor 860 NHS ester

iFluor 860 琥珀酰亚胺酯，中文名称iFluor 860 NHS活性酯，也可称为iFluor 860 succinimidyl ester、iFluor 860 SE、iFluor 860胺反应荧光染料，是一款工作在近红外II区的高性能胺类标记试剂，专为蛋白质、抗体、多肽等含伯胺基团的生物分子的共价标记设计。它的激发波长853nm、发射波长878nm，处于生物组织的低透光衰减窗口，能有效减少光子在样本内部的散射和吸收，实现更深层次的信号穿透。

这款染料的核心反应基团琥珀酰亚胺酯，能在pH 8.0-9.0的弱碱性环境下，与生物分子表面的伯胺基团发生高效共价反应，生成稳定性*强的酰胺键，标记后的荧光缀合物在4℃条件下储存3个月，荧光保留率仍可达到90%以上。不同于传统近红外染料，它的水溶性经过特殊优化，标记反应体系中有机溶剂占比可控制在10%以内，*大程度避免高浓度DMSO对蛋白活性的破坏，尤其适合活性敏感的功能蛋白标记。

在实验优化层面，该染料的标记摩尔比可根据靶标分子的特性灵活调整：对于分子量150kD左右的IgG抗体，推荐从10:1的染料蛋白摩尔比开始测试，通过紫外吸收光谱计算取代度，将最终取代度控制在4-6之间，既不会因标记不足导致信号强度偏低，也不会因过度标记影响抗体的抗原结合活性。标记完成后的纯化步骤，使用常规的Sephadex G-25脱盐柱即可完全去除未反应的游离染料，获得纯度95%以上的荧光缀合物。

该染料的光谱与常见的Cy5、Cy7等远红荧光染料完全分离，几乎不存在信号串扰，在多通道近红外成像实验中可作为独立的检测通道使用，广泛应用于蛋白示踪、纳米载体标记、体外高灵敏度免疫检测等科研场景，为近红外区的高信噪比检测提供了稳定可靠的标记工具。

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