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发布人:湖南汇百益新材料有限公司
发布日期:2026/6/9 13:59:44
EPPS(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪丙磺酸),又名HEPPS,是Good's缓冲液家族中针对生理pH范围的重要成员,由Good等人于20世纪60年代开发并推广应用。作为一种两性离子磺酸类缓冲剂,EPPS在pH 7.3-8.7范围内具有优异的缓冲能力,其pKa为8.0(25°C),完美覆盖了大多数细胞培养、酶学研究和分子生物学实验的pH需求 。
EPPS的结构与HEPES相似(哌嗪环连接丙磺酸基团而非乙磺酸),但pKa略高(8.0 vs 7.55),使其在pH 7.8-8.2范围内缓冲能力更优 。该产品已通过BioPerformance认证,适用于哺乳动物细胞培养,经内毒素和总需氧微生物计数检测,确保细胞实验的可靠性 。
EPPS的核心优势在于其卓越的生物相容性。它继承了Good's缓冲液的七大核心特性:高水溶性、低细胞膜通透性、pKa稳定性、低金属螯合能力(不与Mg²⁺、Ca²⁺等常见金属离子形成络合物)、高化学稳定性、低紫外吸收(A290 ≤0.1,33%溶液),以及高化学惰性 。
在Western Blot蛋白转膜领域,EPPS具有独特的重要价值。2013年发表于《Analytical Biochemistry》的研究首次证实,基于HEPES和EPPS的缓冲液是快速半干式转移(12分钟内)最有效的缓冲体系,其转移效率优于传统Towbin缓冲液 。这一发现解决了传统转移方法耗时、转移效率低的问题,使EPPS成为蛋白免疫检测的首选缓冲液之一。
EPPS也已用于验证pH变化对后中肠内容物和前中肠组织匀浆蛋白水解活性的影响,作为凝胶内酶解消化的消化缓冲液,以及用于脑源性细胞外囊泡蛋白的16-plex等压串联质谱标签肽标记 。
湖南汇百益提供纯度≥99%的EPPS产品,严格符合分子生物学级质量标准,不含DNase、RNase和蛋白酶,现货供应,可按需定制包装。
EPPS属于Good's缓冲液家族,该家族缓冲剂专门设计用于生物学研究。Good's缓冲剂的共同特点包括 :
高水溶性:在生理pH范围内完全溶解
低细胞膜通透性:不易穿透生物膜,对细胞过程干扰小
pKa稳定性:位于中性pH范围,受温度影响小
低金属螯合能力:不与Mg²⁺、Ca²⁺等金属离子形成络合物
高化学稳定性:不易与反应物发生副反应
低紫外吸收:在紫外和可见光区吸光度极低
EPPS完全符合这些标准,其pKa为8.0(25°C),有效缓冲范围为pH 7.3-8.7 。
EPPS与HEPES结构相似,但丙磺酸基团(3碳链)替代了乙磺酸基团(2碳链)。这一结构差异带来了几个关键优势:
选择建议 :
Western Blot快速半干转膜:EPPS和HEPES均极佳,EPPS是优质选择
磷酸化反应:EPPS特别适用,尤其当Tricine不能使用时
细胞培养(pH 7.4-8.0):两者均可,EPPS在较高pH缓冲能力更强
Folin蛋白检测:EPPS可用,不适用于biuret检测
EPPS在Western Blot快速半干转膜领域具有重要的应用价值,是该领域的新兴标准缓冲液 。
研究数据 :
发表期刊:Analytical Biochemistry(2013年)
实验条件:12分钟内完成半干式转移
关键发现:基于HEPES和HEPPS/EPPS的缓冲液是快速半干式转移最有效的缓冲体系
转移效率:显著优于传统Towbin转移缓冲液
应用优势:
转移时间从传统1-2小时缩短至12分钟
转移效率高,蛋白质损失少
适用于多种蛋白类型
与下游免疫检测兼容性良好
标准转膜缓冲液配方:
适用蛋白类型:适用于常规蛋白及碱性蛋白的转移。
EPPS已被验证适用于哺乳动物细胞培养,是细胞培养基的优质缓冲组分 。
质量保证 :
BioPerformance认证:高等级质量认证(400级)
内毒素检测:经验证符合规格
总需氧微生物计数:经验证符合规格
细胞培养验证:适用于哺乳动物细胞培养技术
应用特点:
pKa=8.0,在pH 7.8-8.2范围内缓冲能力最佳
对细胞无毒,支持细胞正常生长和增殖
在需要金属阳离子的培养基中优势明显
化学稳定性高,不与培养基组分反应
培养基补充方法:配制0.5-1 M EPPS母液,0.22 μm滤膜过滤除菌后,按需要添加至终浓度10-30 mM。
EPPS在蛋白质组学和质谱分析中具有重要应用 。
应用场景:
凝胶内酶解:作为消化缓冲液,用于制备凝胶内酶解样品
TMT肽段标记:用于脑源性细胞外囊泡蛋白的16-plex等压串联质谱标签肽标记
质谱兼容性:低紫外吸收(A290 ≤0.1)不干扰质谱检测
应用优势:
不含干扰质谱检测的杂质
与多种质谱标签兼容
批次稳定性好,保证实验结果可重复性
EPPS常用于酶活性测定和酶动力学研究。
典型应用 :
验证pH变化对后中肠内容物和前中肠组织匀浆蛋白水解活性的影响
磷酸化反应缓冲液(尤其当Tricine不能使用时)
应用优势:
在pH 7.3-8.7范围内提供稳定缓冲环境
不螯合金属离子,不影响金属依赖性酶活性
对酶活性影响小
EPPS作为高质量生物缓冲剂,可用于体外诊断试剂的生产 。
应用场景:
生化诊断试剂盒缓冲组分
免疫检测试剂盒
诊断测定制造
质量优势 :
符合诊断试剂生产质量要求
低内毒素、低重金属
批间稳定性好
EPPS在蛋白质纯化和分子生物学技术中具有广泛应用。
应用场景 :
核酸纯化缓冲液
PCR反应缓冲体系
SDS-PAGE蛋白分析缓冲液
蛋白质纯化层析缓冲液
EPPS易溶于水,推荐使用去离子水配制 。
0.5 M EPPS储存液配制(1 L,pH 8.0):
注意事项 :
溶解度:25 g/50 mL水,配制高浓度溶液无需加热
调节pH时需缓慢滴加NaOH,避免局部过碱
EPPS溶液可在4°C稳定保存6个月
避免高温长时间储存
基于Analytical Biochemistry研究的最佳配方 :
EPPS转膜缓冲液标准配方(pH 8.0-8.5,1 L):
配制方法:
称取EPPS粉末,加800 mL去离子水溶解
加入甲醇,混匀
用10 M NaOH调节pH至8.0-8.5
定容至1 L
预冷至4°C后使用
转膜条件建议 :
转移时间:12分钟(快速半干式)
转移温度:4°C(冰浴)或室温
适用膜:硝酸纤维素膜(NC膜)或PVDF膜
电流/电压:根据转移仪器优化
BioPerformance级EPPS缓冲细胞培养基(pH 7.8-8.2) :
补充方法:配制1 M EPPS母液(用NaOH调至目标pH),过滤除菌后,按培养基体积的1/100-3/100比例添加。
质量验证:BioPerformance级EPPS经验证内毒素和总需氧微生物计数合格,适用于哺乳动物细胞培养 。
选择建议 :
Western Blot快速半干转膜(12分钟):首选EPPS,与HEPES并列最佳
磷酸化反应缓冲液:选择EPPS,尤其当Tricine不能使用时
细胞培养(pH 7.8-8.0):首选EPPS,缓冲能力优于HEPES
Folin蛋白检测:EPPS可用
biuret蛋白检测:EPPS不适用
Western Blot快速转膜要点 :
EPPS基于缓冲液可在12分钟内完成半干式蛋白转移
转移效率优于传统Towbin缓冲液
建议使用预冷的缓冲液进行转膜
转移时间需根据蛋白分子量和凝胶厚度优化
pH调节要点:
EPPS水溶液呈酸性,必须用NaOH调节至目标pH
25°C调节的pH在4°C时约升高0.2-0.3单位
缓冲液配制后应确认pH(25°C条件下测量)
金属离子兼容性 :
EPPS对Mg²⁺、Ca²⁺等常见二价金属离子的结合能力极低
不形成不溶性金属络合物
适合金属离子依赖性酶的研究和含金属离子的培养基
低紫外吸收 :
33% w/w溶液在290 nm处吸光度≤0.1
不干扰蛋白质和核酸的光度法检测
适用于质谱分析等光敏感检测
检测方法兼容性 :
EPPS可用于Folin蛋白检测
EPPS不适用于biuret蛋白检测
进行蛋白定量时需根据方法选择合适的缓冲体系
细胞培养注意事项 :
BioPerformance级EPPS已通过内毒素和微生物检测
适用于哺乳动物细胞培养
使用前需过滤除菌
产品吸湿性:
EPPS粉末具一定吸湿性
建议在干燥环境中称量,使用后立即密封容器
诊断试剂应用 :
EPPS可用于诊断测定制造
低内毒素、低重金属含量符合诊断试剂要求
EPPS通常被认为是安全、无毒的实验室试剂。BioPerformance级产品已通过严格的质量检测,适用于细胞培养和诊断试剂生产 。
湖南汇百益新材料有限公司提供的EPPS产品严格执行以下质量标准:
湖南汇百益通过优化合成与精制工艺,将产物纯度稳定控制在≥99%,产品符合分子生物学级质量标准。公司已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证,确保批次间稳定性。
包装规格:实验室规格:25g、100g、500g、1kg;工业规格:5kg、25kg;可按客户需求定制包装。
湖南汇百益新材料有限公司成立于2014年,位于湖南省怀化市洪江区工业园,拥有50,000平方米生产基地。公司是一家专注于生物基础试剂研发、生产与销售的国家高新技术企业、湖南省专精特新企业,拥有独立研发试验中心和生产基地,并已通过ISO 9001:2015质量管理体系认证。
公司先后获得“怀化市工程技术研究中心”“湖南师范大学化学生物学功能材料产学研基地”“创新创业大赛湖南省优秀企业”“湖南新材料企业”等一系列荣誉称号。
依托强大的生产平台与技术实力,公司可灵活提供OEM代工服务与个性化定制方案,如提纯、精制加工等,以满足客户多元化需求。旗下品牌“汇百试剂”,通过提供性能稳定可靠、品质媲美进口、成本更具优势的国产试剂,为生物医药、体外诊断、生物工程及科研机构等领域的客户提供基础材料解决方案。
公司研发、生产、销售各种高纯生化试剂,包括:
糖苷系列:IPTG、ONPG、PNPG、DTT、x-gal、x-gluc等
生物缓冲剂:Tricine、HEPES、MOPS、EPPS、PIPES、MES、CAPS、TAPS、BES、Tris、Tris-HCl、BIS-TRIS、BICINE、TES钠盐等
表面活性剂与去污剂:SDS、SURFACTIN、EMPIGEN BB、CHAPS、CHAPSO、SB-8至SB-18系列等
检测试剂:泛影酸钠、G-418硫酸盐、DTE、TCEP-HCl、PMSF、PNPP、ABTS、TMB、TMB-PS、鲁米诺、异鲁米诺、ABEI、D-荧光素钾盐、NAD⁺、NADH、NADP⁺、NADPH等
高纯生化试剂:DEPC、异硫氰酸胍、盐酸胍、PMSF、MTT、BSA、WST-8等
湖南汇百益提供的EPPS产品具有以下突出优势:
高纯度:纯度≥99%,批次稳定性好,符合分子生物学级质量标准
Western Blot快速转膜标准试剂:12分钟完成半干式转移,效率最优
细胞培养级品质:BioPerformance认证,适用于哺乳动物细胞
生理pH缓冲专家:有效缓冲范围pH 7.3-8.7,pKa=8.0,覆盖碱性生理pH需求
磷酸化反应适用:特别适合磷酸化研究,Tricine替代选择
金属离子兼容:不结合Ca²⁺、Mg²⁺等金属离子
蛋白质组学验证:已用于凝胶内酶解和TMT肽段标记
诊断试剂适用:可用于诊断测定制造
现货供应:常备库存,支持快速发货,可定制包装
技术支持:专业技术团队提供全程使用指导与问题解答
源头工厂:自产自销,具备价格优势和供应稳定性
在采购EPPS(CAS 16052-06-5)时,建议重点关注以下几点:
纯度要求:对于Western Blot转膜、细胞培养和IVD诊断试剂生产,应选择纯度≥99%的高品质产品。对于哺乳动物细胞培养,建议选择BioPerformance级(Sigma E0276等效级别)产品,经内毒素和微生物检测验证 。
应用方向选择:
Western Blot快速半干转膜(12分钟):首选EPPS,与HEPES并列最佳
细胞培养基缓冲(pH 7.8-8.0):首选EPPS,BioPerformance级经验证适用于哺乳动物细胞
磷酸化反应缓冲液:选择EPPS,尤其当Tricine不能使用时
蛋白质组学样品制备:用于凝胶内酶解消化缓冲液
质谱分析TMT肽标记:用于脑源性细胞外囊泡蛋白的16-plex等压TMT肽标记
IVD诊断试剂生产:可用于诊断测定制造
Folin蛋白检测:EPPS可用
biuret蛋白检测:EPPS不适用
产品形态选择:
EPPS游离酸(本品,CAS 16052-06-5):需用NaOH调pH,灵活性最高
HEPPS钠盐:预先中和形式,直接溶解即可使用
与HEPES的选择 :
需要较高pH缓冲(pH 8.0-8.5):首选EPPS
Western Blot快速半干转膜:EPPS和HEPES均极佳
磷酸化反应:EPPS特别适用
缓冲范围确认:EPPS的有效缓冲范围为pH 7.3-8.7,pKa=8.0(25°C)。如实验pH在此范围内,EPPS是HEPES的优质替代品 。
储存条件:粉末室温密封保存,阴凉干燥处。EPPS溶液可在4°C稳定保存6个月。
安全操作:操作时佩戴实验服、护目镜及手套,避免吸入粉尘。本产品仅限科研和工业生产使用,不用于临床诊断或治疗。
如需获取EPPS(CAS 16052-06-5)的产品报价、样品或技术支持,请联系湖南汇百益新材料有限公司:
产品咨询:13319523173
订购邮箱:ivy@hnhbsj.com
公司地址:湖南省怀化市洪江区工业园8号
声明:本产品仅供科研和工业生产使用,不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读产品说明书,并遵守实验室安全操作规范。
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