在生物化学和分子生物学实验中,有一类缓冲剂的缓冲范围偏碱性,高于常用的生理酸碱度范围,即环己氨基缓冲剂家族——2-环己氨基乙磺酸(CHES)与3-环己氨基丙磺酸(CAPS)。二者均为两性离子缓冲剂,并且不与金属离子络合,同样适用于碱性范围,那么它们之间在使用上有什么区别呢?本文将为大家进行总结。
2-环己氨基乙磺酸(CHES)
        CHES分子式为C8H17NO3S,25°C下pKa值为9.5,pH缓冲范围8.6~10.0,是生物化学和分子生物学中使用的两性离子缓冲剂,尽管不是Good等人引入的,它仍被成为Good's缓冲液。其应用范围如下:
(1)用作酶反应的缓冲液;
(2)用于各种毛细管电泳的样品和运行缓冲液;
(3)对肝醇脱氢酶的碘乙酸酯结合位点表现出高亲和力,可保护酶不被碘乙酸灭活;
(4)与其他缓冲液相比,磷酸二酯酶在CHES中有的活性;
(5)CHES可以在pH为9.5时抑制藤黄微球菌的活力。
3-环己氨基丙磺酸(CAPS)
        CAPS分子式C9H19NO3S,25°C下pKa值为10.4,pH缓冲范围9.7~11.1。与CHES相比,更长的磺酸基碳链使得其更倾向于碱性。与CHES相同,尽管CAPS不是Good等人引入的,它也被称为Good's缓冲液。其应用领域如下
(1)作为蛋白印迹转移缓冲液或转膜缓冲液,更适用于小分子量蛋白质转移到PVDF膜或硝酸纤维素膜;
(2)作为结合缓冲液和阳离子交换层析中的洗脱液;
(3)作为毛细管电泳中的运行缓冲液;
(4)作为各种蛋白质的有效结晶溶液;
(5)作为酶测定缓冲液;
(6)可以支持碱性磷酸酶活性并在pH为10.5时抑制气单胞菌属的生长;
(7)适用于二喹啉甲酸(BCA)的测定。
        综上所述,CHES与CAPS虽然有诸多共同之处,如缓冲范围均为碱性,均为两性离子缓冲剂,以及同样不与金属离子反应等特性,但是它们之间也存在着差异:其缓冲范围不同,CAPS比CHES更偏碱性,而且适用的实验也不同。在使用之前,需要仔细分析具体条件,选择最合适的缓冲液。
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